GX液相色谱工作原理和优点

液相色谱(HPLC)法是一种以液相为流动相，在高压和固定相下，颗粒很细的柱层析技术。液相色谱对样品具有广泛的适用性，不受分析物的挥发性和热稳定性的限制，弥补了气相色谱的不足。约20%的已知有机化合物可以用气相色谱法进行分析，80%的有机化合物可以用液相色谱法进行分析。

液相色谱与气相色谱在基础理论上没有显着性差异。两者之间的显着差异在于作为流动相的液相和气相性质的差异。

液相色谱分析原理

主要结果如下：(1)液相色谱分析过程：将储存瓶中的溶剂通过泵吸入到色谱系统中，然后输出，经流量和压力测量后，将其导入采样器。被测物体由取样器注入，用流动相分离在柱上。检测信号由数据处理设备采集和处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。在复杂混合物分离(极性范围宽)的情况下，梯度控制器也可用作梯度洗脱。这与气相色谱法设定的温度相似，不同之处在于气相色谱改变了温度，而HPLC改变了流动相的极性，使样品的组分在良好的条件下得以分离。

(2)液相色谱分离过程：与其他色谱过程一样，HPLC是固定相和流动相之间连续的、多次的溶质交换过程，两相间由于分配系数、亲和力、吸附力或分子大小的差异而引起的排阻差异使不同的溶质分离。

首先，假设样品中含有A、B和C三种组分，然后将样品加入该柱，然后以流动相进入该柱，并开始在固定相和流动相之间划分。"A组分分配系数小，不易被固定相堵塞，且较早流出色谱柱。高分配系数组分C在固定相上停留了很长一段时间，随后又从柱中流出。B组分的分配系数在A和C之间，第二流出柱之间。如果含有多种组分的混合物进入系统，则混合物中的每一组分根据其在两相之间的分配系数流出色谱柱，以达到分离的目的。

色谱过程中不同组分的分离首先取决于两相的分配系数、吸附容量和亲和力是否不同，这不仅是一个热力学平衡问题，也是分离的主要条件。其次，当不同组分在色谱柱中移动时，光谱带随柱长而变宽，分离与两相间的扩散系数、固定相的粒径、柱的填充和流动相的流动速率有关。因此，分离的zui终效果是热力学和动力学的综合效益。

工作原理

流动相通过高压泵进入系统，样品溶液通过注射器进入流动相，流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中的组分在两相中具有不同的分配系数，经过多次吸附-解吸分配后，各组分在两相中相对移动时的运动速度有很大差异。它被分离成一个单独的组件，然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时，样品浓度被转换成电信号并传送给记录器，数据以地图的形式打印出来。

GX液相色谱法的特点和优点

GX液相色谱法具有以下特点：

高压可达150~300 kg/cm²，色谱柱压降大于75 kg/cm²。

高速--流速为0.1~10.0ml/min。

每米可达5000盘，Z多可有100种元件同时在一列中分离。

高灵敏度--紫外检测器的灵敏度可达0.01ng，同时可消耗较少的样品。

与传统的液相色谱相比，GX液相色谱法具有以下优点：

快速-通常一个样品可以在15分钟内分析30分钟，有些样品甚至可以在5分钟内完成。

高分辨率-固定相和流动相可被选择以达到良好的分离效果。

灵敏度高-紫外检测器可达0.01 ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。

列可以重复使用，不同的化合物可以用一列分开。

样品体积小，易于回收--样品在色谱柱后不会被破坏，可以收集或制备单一成分。