卡梅德生物科技(天津)有限公司
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GST融合蛋白纯化


GST融合蛋白纯化

      卡梅德生物拥有多年重组抗体制备,重组蛋白表达服务经历,根据不同类型蛋白纯化技术具有专业技术水平和丰富经验积累,我们坚持为客户提供高品质的相关服务,包括从信息咨询到详细实验方案的设计与实施等一体化服务,能够针对性的满足不同客户的需求。

重组蛋白纯化服务 — GST融合蛋白纯化

GST (Glutathione S-transferase),中文名称为谷胱甘肽巯基转移酶,能够催化GSH(谷胱甘肽)形成GS-GST的复合物。纯化系统是利用GST(glutathione-S-transferase)融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过二硫键共价亲和,通过GSH交换洗脱的原理进行蛋白纯化。GST全长211个氨基酸,分子量为26kDa,具有高度的亲水性,因此也常被用于改善目的蛋白的可溶性。

---GST融合蛋白纯化步骤:

①从LB平板上挑取单克隆接种到2ml LB液中(Amp+),220-250rpm,37℃振荡培养至OD600值约为0.6;

②按照1:100的比例将活化后菌体接种到TB培养基中,测定起始OD600值,37℃振荡培养,当OD600值增加0.6-1.0单位时(通常3-6小时),加入IPTG至终浓度10μM继续摇床培养3~4h

③4000 rpm离心10min收集菌体

④5-10倍柱体积的lysis buffer重悬细菌,加入PMSF等蛋白酶YZ剂,超声400-600瓦破碎细胞

⑤4℃,8000rpm, 离心20min取上清过谷胱甘肽琼脂糖柱

⑥过柱前后,均用5×柱体积的lysis buffer洗层析柱,收集流穿液

⑦Elution buffer洗脱,收集洗脱峰前,峰中间和峰后,SDS-PAGE鉴定纯度

⑧GST标签移除:凝血酶等酶切后,非变性胶分离纯化。

                                                                        卡梅德生物期待与您的合作!


GST融合蛋白纯化

卡梅德生物拥有多年重组抗体制备,重组蛋白表达服务经历,根据不同类型蛋白纯化技术具有专业技术水平和丰富经验积累,我们坚持为客户提供高品质的相关服务,包括从信息咨询到详细实验方案的设计与实施等一体化服务,能够针对性的满足不同客户的需求。

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