上海澎赞生物科技有限公司
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FluidicLab 智能LNP脂质纳米颗粒合成仪 微流控设备LNP制备芯片

FluidicLab智能LNP(脂质纳米颗粒)合成仪(LNP-S1)—   纳米级脂质颗粒一体化解决方案

在制备脂质纳米颗粒 LipidNanoparticle(LNP)的过程中,关键步骤 是 磷 脂 和 缓 冲 液( 缓冲液中溶解有mRNA、siRNA等生物大分子)在微流控芯片中快速均匀混合,自组装成LNP。微流控LNP制备平台具备粒径和单分散度高度可控、批次之间高重复性、低样品消耗、易操作等优势,可大幅度提高客户前期配方筛选效率。


FluidicLab智能LNP(脂质纳米颗粒)合成仪 —— 性能优势:


| 粒径高度可控,粒径均一

粒径从40 nm到200 nm可控,单分散度(PDI)低于0.02;

| 批次重复性高

全自动化系统,无管路连接,无需启动和清洁,消除不同批次的可变性;

| 智能控制

可自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况,自动停机,节约用户宝贵原料;

| 耗材成本低

芯片强度高,耐压50大气压,可经过清洗重复使用;

| 操作简易

无需外接电脑,全触屏配置,实验参数可加载或保存,开机30秒内即可开始制备;

| 运行高效

设备兼容国内外一次性注射器型号,单次运行时间 9~40s,一天内可完成上百种配方筛选。


| 智能控制

  • 内置压力与位置传感器,精准控制样品流速;

  • 双通道独立控制,流速比灵活设置;

  • 自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况,自动停机;

  • 快速到达设定流速,大幅度减少前废液体积。


| LNP中体积混合芯片

  • LNP粒径:40~200 nm;

  • 总流速范围:0.04 ~ 40 mL/min( 乙醇和水按照1:3设置);

  • 鱼骨形混合结构,层流混合时间<3 ms;

  • COC材质,耐压 50 Bar 以上,无泄漏堵塞风险;

  • 无需管路,芯片与注射器直接连接。


| LNP包封试剂盒


  • 即开即用;

  • 可包裹 mRNA mRNA,siRNA,CRISPR/Cas9 等核酸;

  • >95% 的转染率;

  • 低毒性;

  • 可提供完整实验方案。



实验案例:

LNP synthetic experiment (1).png

图注:包裹GFPmRNA的LNP转染细胞后,荧光成像结果,左侧为明场照片,右侧为荧光照片。

A、LNP 原液粒径分布                                                                         B、 LNP 原液经稀释超滤后粒径分布

C、包 裹 SARS-CoV-2 NTD-RBD 部 分  mRNA 的 LNP 终产物 Cry                         D、 Cryo-EM 检测生成的 LNP

E、包裹 GFP mRNA 的 LNP 转染细胞后, 80% 以上细胞均表达 GFP           F、包 裹 Luciferase mRNA 的 LNP  注射小鼠后的活体成像结果


 LNP包封试剂盒

产品名称: LNP包封试剂盒

英文名称:Liposome nanoparticle encapsulation kit

组分信息:

产品名称

规格

复方磷脂M,8 mM(5 mg/mL)

1 mL

复方磷脂P,8 mM(5 mg/mL)

1 mL

50mM 柠檬酸钠缓冲液,pH4.0

3 mL

10mM PBS缓冲液,pH7.4

120 mL

Tris 缓冲液(含8%蔗糖),pH7.4

               120 mL


【保存条件】   4℃密封保存


【复方磷脂制备脂质纳米颗粒建议方案】

  • 计算核酸用量:

核糖核苷酸的平均分子量为339.5,形成RNA时要脱去一分子水,因此分子量按330.5计算。脱氧核糖核苷酸的平均分子量为327.0,形成DNA时要脱去一分子水,因此分子量按318.0计算。

以可电离脂质比例计算氮原子数,每摩尔复方脂质中含有 0.5 mol氮原子。

DNA.png


试剂选择推荐:

保存方式稀释/储存缓冲液
4℃保存10mM PBS缓冲液,pH 7.4
冷冻保存Tris 缓冲液(含8%蔗糖),pH 7.4


脂质纳米颗粒制备:

以mRNA制备LNP为例:将mRNA溶解到50mM pH4.0的柠檬酸钠缓冲液中,使终浓度为0.073 μg/μL。

利用微流控设备,将含有核酸的柠檬酸钠缓冲液与磷脂在相应芯片中混合,相应参数参考下表,所得LNP使用30倍体积的缓冲液稀释,100KD超滤管,3000g离心超滤浓缩到所需体积,选择上述(2)中条件保存。

芯片型号注射器型号缓冲液与磷脂混合比例(v/v)流速(mL/min:mL/min)
LNP-B110 mL,3 mL3 :118 :6

| 注意事项 · 磷脂使用前要充分混匀,储存环境保持干燥,水分的存在会引起脂质的自组装,对最终成品产生影响; · 脂质纳米颗粒的制备过程应该在无菌、无酶环境下进行,否则核酸被分解,会影响最终成品包封率。


设备参数:

Equipment paramenter.png


粒径高度可控,粒径均一;批次重复性高;智能控制;耗材成本低; 操作简易;运行高效。

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