FluidicLab智能LNP(脂质纳米颗粒)合成仪(LNP-S1)— 纳米级脂质颗粒一体化解决方案
在制备脂质纳米颗粒 LipidNanoparticle(LNP)的过程中,关键步骤 是 磷 脂 和 缓 冲 液( 缓冲液中溶解有mRNA、siRNA等生物大分子)在微流控芯片中快速均匀混合,自组装成LNP。微流控LNP制备平台具备粒径和单分散度高度可控、批次之间高重复性、低样品消耗、易操作等优势,可大幅度提高客户前期配方筛选效率。
FluidicLab智能LNP(脂质纳米颗粒)合成仪 —— 性能优势:
| 粒径高度可控,粒径均一
粒径从40 nm到200 nm可控,单分散度(PDI)低于0.02;
| 批次重复性高
全自动化系统,无管路连接,无需启动和清洁,消除不同批次的可变性;
| 智能控制
可自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况,自动停机,节约用户宝贵原料;
| 耗材成本低
芯片强度高,耐压50大气压,可经过清洗重复使用;
| 操作简易
无需外接电脑,全触屏配置,实验参数可加载或保存,开机30秒内即可开始制备;
| 运行高效
设备兼容国内外一次性注射器型号,单次运行时间 9~40s,一天内可完成上百种配方筛选。
| 智能控制
内置压力与位置传感器,精准控制样品流速;
双通道独立控制,流速比灵活设置;
自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况,自动停机;
快速到达设定流速,大幅度减少前废液体积。
| LNP中体积混合芯片
LNP粒径:40~200 nm;
总流速范围:0.04 ~ 40 mL/min( 乙醇和水按照1:3设置);
鱼骨形混合结构,层流混合时间<3 ms;
COC材质,耐压 50 Bar 以上,无泄漏堵塞风险;
无需管路,芯片与注射器直接连接。
| LNP包封试剂盒
即开即用;
可包裹 mRNA mRNA,siRNA,CRISPR/Cas9 等核酸;
>95% 的转染率;
低毒性;
可提供完整实验方案。
实验案例:
图注:包裹GFPmRNA的LNP转染细胞后,荧光成像结果,左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
A、LNP 原液粒径分布 B、 LNP 原液经稀释超滤后粒径分布
C、包 裹 SARS-CoV-2 NTD-RBD 部 分 mRNA 的 LNP 终产物 Cry D、 Cryo-EM 检测生成的 LNP
E、包裹 GFP mRNA 的 LNP 转染细胞后, 80% 以上细胞均表达 GFP F、包 裹 Luciferase mRNA 的 LNP 注射小鼠后的活体成像结果
LNP包封试剂盒
产品名称: LNP包封试剂盒
英文名称:Liposome nanoparticle encapsulation kit
组分信息:
产品名称 | 规格 |
复方磷脂M,8 mM(5 mg/mL) | 1 mL |
复方磷脂P,8 mM(5 mg/mL) | 1 mL |
50mM 柠檬酸钠缓冲液,pH4.0 | 3 mL |
10mM PBS缓冲液,pH7.4 | 120 mL |
Tris 缓冲液(含8%蔗糖),pH7.4 | 120 mL |
【保存条件】 4℃密封保存
【复方磷脂制备脂质纳米颗粒建议方案】
计算核酸用量:
核糖核苷酸的平均分子量为339.5,形成RNA时要脱去一分子水,因此分子量按330.5计算。脱氧核糖核苷酸的平均分子量为327.0,形成DNA时要脱去一分子水,因此分子量按318.0计算。
以可电离脂质比例计算氮原子数,每摩尔复方脂质中含有 0.5 mol氮原子。
试剂选择推荐:
保存方式 | 稀释/储存缓冲液 |
4℃保存 | 10mM PBS缓冲液,pH 7.4 |
冷冻保存 | Tris 缓冲液(含8%蔗糖),pH 7.4 |
脂质纳米颗粒制备:
以mRNA制备LNP为例:将mRNA溶解到50mM pH4.0的柠檬酸钠缓冲液中,使终浓度为0.073 μg/μL。
利用微流控设备,将含有核酸的柠檬酸钠缓冲液与磷脂在相应芯片中混合,相应参数参考下表,所得LNP使用30倍体积的缓冲液稀释,100KD超滤管,3000g离心超滤浓缩到所需体积,选择上述(2)中条件保存。
芯片型号 | 注射器型号 | 缓冲液与磷脂混合比例(v/v) | 流速(mL/min:mL/min) |
LNP-B1 | 10 mL,3 mL | 3 :1 | 18 :6 |
| 注意事项 · 磷脂使用前要充分混匀,储存环境保持干燥,水分的存在会引起脂质的自组装,对最终成品产生影响; · 脂质纳米颗粒的制备过程应该在无菌、无酶环境下进行,否则核酸被分解,会影响最终成品包封率。
设备参数:
上海澎赞生物科技有限公司
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