蜂蜜中糖含量测试有问题？安谱实验有新招儿

       蜂蜜具有很多养生和YY功能，既可食用又可YY，同时也可以作为辅料广泛应用于中药制剂与中药炮制中，在中药炮制和药物制剂生产中具有重要作用。蜂蜜的质控也越来越受到医药行业重视，糖含量测定是药典中蜂蜜的重要指标。2015版药典中推荐Prevail Carbohyrate ES色谱柱为糖含量测试色谱柱，但是2016年这款色谱柱停产。目前大家都使用氨基柱测试蜂蜜中糖含量，在测试过程中，经常会碰到一些问题，比如峰拖尾严重，葡萄糖和果糖没有实现基线分离，柱效低导致0.5mg/ml 麦芽糖检测不出，不同批次之间出峰时间差异大等等。

       针对药典中蜂蜜糖含量的测试，安谱实验采用CNW Athena NH2-RP(糖分析专用）液相色谱柱做了一项完整的测试，测试结果如下：

实验条件

       色谱柱：Athena NH2-RP 4.6*250mm，5um（LAEQ-462568）

       流动相：乙腈：水（75:25）

       柱温：30℃

       流速：1.0ml/min

       进样量：15ul

       检测器：示差折光检测器，30℃

实验结果

       系统适用性实验

       在2015 版药典条件下，Athena NH2-RP色谱柱做蜂蜜项目，葡萄糖和果糖的分离度为2.7，果糖的柱效塔板数大于9000，远高于药典要求的2000。

       RSD测试

       在2015版药典中的条件下，Athena NH2-RP色谱柱做蜂蜜糖含量项目，连续进混合对照品5针，果糖和葡萄糖峰面积RSD<2%，蔗糖和麦芽糖峰面积RSD<5%，重现性良好。

       标准曲线

       分别测定5个不同浓度的混合对照品，以浓度为横坐标，以峰面积值为纵坐标，得到的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的回归方程，可以看出，各个组分的响应和浓度呈优异的线性关系。

       供试品测试

       根据标准曲线计算，供试品中果糖的含量为40.45%，葡萄糖的含量为34.28%，蔗糖的含量为1.23%，麦芽糖的含量为0.88%，满足蔗糖和麦芽糖分别不得过5.0%，果糖和葡萄糖的总量不得少于60.0%，果糖与葡萄糖含量比值不得小于1.0%的要求。

       批次重现性测试

       随机选用2个不同批次的Athena NH2-RP 色谱柱测试，果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的出峰时间重现性好，果糖的柱效均大于2000。

       分离度改善摸索

       本次测试考察了柱温和检测器温度对出峰的影响，发现将柱温和示差检测器的温度升高到40℃，果糖和葡萄糖的分离度更好，各个组分的柱效更高。

实验结论

       在药典条件下，CNW Athena NH2-RP 色谱柱对果糖和葡萄糖的分离度良好，各组分峰形wan美，果糖的柱效塔板数超过9000，远大于药典要求的2000。连续进样，果糖和葡萄糖峰面积RSD<2%，蔗糖和麦芽糖峰面积RSD<5%，重现性良好。不同批次色谱柱对于各组分的出峰重现性良好，果糖柱效塔板数均远大于2000，符合药典要求，wan美解决了蜂蜜中糖含量测试常遇到的诸多问题。

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