气相毛细管柱塔板数下降的烦恼

       Z近小编实验室也发生了这个问题，使用CNW CD-1701（30m*0.32mm*0.25μm）的毛细色谱柱进行中药中9种有机氯的检测，参照的标准是《ZG药典 2015版》 四部通则 2341（见下图），标准中要求α-BHC的理论板数不低于1×106，具体色谱条件和要求如下：

在该色谱条件下，9种有机氯农残混标的谱图如下： 

       因药典中9种有机氯测定方法中未给出色谱柱具体流速，因此我们先尝试通过调整流速提高塔板数，下表为不同流速条件下α-BHC的理论塔板数，从表中可以看出，减小流速可以提高理论塔板数，但减小到0.6mL/min后继续减小流速到0.5mL/min，α-BHC的理论塔板数反而降低了，这是因为减小流速，可以使目标物保留时间变大，提高理论塔板数，但减小流速同时也会影响色谱峰的峰宽，在流速减小到一定程度后，峰宽变大起到决定作用，因此理论塔板数又有所减小。不过在Z 优的流速0.6mL/min条件下，α-BHC的理论塔板数也没有达到1×106的要求，而且流速0.6mL/min条件下，在药典规定的升温程序时间内9种有机氯目标物无法全部出峰。

       难道这根色谱柱柱效真的达不到要求了吗？小编没有放弃，通过多次反复试验，小编使用类似于液相梯度洗脱的方法，设置了一个梯度的色谱柱流速条件，具体条件和结果见下表，在此条件下，前期保持较低的流速，保证目标物α-BHC的保留时间不会太小，在α-BHC出峰前将流速迅速调整到高流速，这样保证了目标峰不会变宽，即同时增大了tR，又减小了W h/2，因此得到了较高的理论塔板数，满足了药典1×106的要求。这样我们就在不改变药典标准方法的前提下通过巧妙的流速条件设置满足了理论塔板数的要求。

       上述方法没有改变药典标准方法要求中的任何仪器条件，包括进样口，升温程序，检测器条件等，但实际上在《ZG药典2015版》四部通则 0512（见上图）中也有说明，是允许对色谱系统条件进行适当调整以满足系统适用性要求的，只要满足相应的方法学验证即可。因此小编也试验了通过改变升温程序是否可以提高理论塔板数，药典标准方法中柱温箱的初始温度为100℃，我们设置了不同的初始温度，后续升温速率和Z终温度等和标准方法一致，不同初始温度条件下的α-BHC的理论塔板数结果见下表，从表可以看出，随着初始温度的降低，α-BHC的保留时间tR也随之变大，而流速等其条件没有改变，目标峰的半峰宽变化不大，因此α-BHC理论塔板数随之变大。

       小编以中药中9种有机氯测定方法为例，说明了两种优化理论塔板数的方法，小伙伴们在遇到类似问题的时候也可以按照这个思路进行优化。

（来源：上海安谱实验科技股份有限公司）