牛奶中安赛蜜检测的固相萃取方 法（Copure® 专用柱）

一、样品提取 

准确称取牛奶 1.0 g 于 15 mL 离心管中，加入 3 mL 水，加入 400 µL 0.25 mol/L 亚铁氰 化钾及 400 µL 1.0 mol/L 乙酸锌溶 液，超声混匀 5 min；4000 r/min 离心 5 min，取上清液。离 心管中继续加入 2 mL 水，重复提取一次，合并上清液备用。 

二、SPE 柱净化（Copure® ACE，500 mg/6 mL） 

活化：固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入合并上清液，收集流出液； 再加入 4 mL 水洗脱，收集合并洗脱液（整个上样和洗脱过程 流速控制在 1 mL/min 内）。 上机分析：洗脱液用水定容至 10 mL，摇匀，取 1 mL 过 0.22  µm 滤膜，供 HPLC 测试。 

三、仪器条件 

设 备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm) 检测波长：214 nm 检测器：Waters 2487 紫外检测器 流动相：A：20 mmol/L 硫酸铵溶液 B：乙腈 洗脱方式：等度洗脱，A：B=75：25  流速：1.0 mL/min 进样体积：20 µL 

四、实验结果 

表 1 20.0 mg/kg 牛奶中安赛蜜的添加回收结果