披沙炼金 | 配方颗粒色谱柱推荐之广金钱草检测

在上期文章中，我们主要为大家梳理并推荐了适用于各类中药配方颗粒检测的安捷伦色谱柱，并对其使用及日常维护进行了相关耗材推荐。相信这满满的干货，一定让大家意犹未尽。那么本期就让我们持续输出，为大家带来关于广金钱草配方颗粒检测的色谱柱推荐。赶紧跟上，一起出发吧！

本实验选用的色谱柱 InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 采用 Agilent 专有的表面多孔型填料技术，其 2.7 μm 色谱柱的柱效能媲美亚二微米全多孔类型的色谱柱，但柱压仅有其一半。特征谱图采用的 Poroshell 120 SB-C18 2.1x150mm，2.7μm 色谱柱尽管与原标准中 1.6 μm 的色谱柱相比柱效低一些，但结果完全符合标准的规定。同时柱头采用较大的 2 μm 筛板能耐受更“脏”的样品，有利于提高色谱柱的耐受性。

根据国家药品监督管理局 《国家药品标准》中广金钱草配方颗粒的检测项目，对其特征谱图和含量测定都采用高效液相色谱法。特征谱图测定中要求理论板数按夏佛塔苷峰计算应不低于 10000，以及对供试品应呈现的特征峰相对保留时间和相对峰面积做了规定。含量测定中规定了理论板数按夏佛塔苷峰计算应不低于 5000。

特征谱图

实验结果

图 1. 广金钱草配方颗粒供试品的特征谱图与标准中对照谱图的比较（峰 3(S)：夏佛塔苷）

色谱条件：

✓流动相：A：0.1% 磷酸；B：乙腈

✓梯度：0-10min，15%B；10-11min，15%B-16%B；11-20min，16%B

✓流速：0.2 ml/min

✓柱温：30 °C

✓检测波长：340 nm(4nm), Ref: off; 采样频率：20Hz

✓进样量：1 μL

系统适用性结果见下表：

结果

1）供试品色谱中呈现标准中规定的 7 个特征峰，且相对保留时间都在规定范围内；

2）峰 6 与 S 峰的相对峰面积在规定范围内；

3）理论板数按夏佛塔苷峰计算为 19402，大于规定值 10000，结果符合要求。

含量测定

实验结果

图 2. 广金钱草配方颗粒供试品含量测定 HPLC 法和 UHPLC 法谱图对照

色谱条件：

✓流动相：A：65% 0.1% 磷酸；B：35% 甲醇

✓流速：1 ml/min (HPLC 法)；0.4 ml/min (UHPLC法)

✓柱温：30 °C

✓检测波长：340 nm(4nm), Ref: off; 采样频率：2.5Hz(HPLC)；20Hz(UHPLC)

✓进样量：5 μL (HPLC法)；1 μL (UHPLC法)

系统适用性结果见下表：

结果

1）主峰夏佛塔苷峰型对称，分离度符合含量测定要求，理论板数符合标准中的规定；

2）方法从 HPLC 转移到 UHPLC，分析时间缩短至原来的 1/6。

实验结论

本实验选用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 SB-C18 和 ZORBAX SB-C18 色谱柱对广金钱草配方颗粒特征谱图及含量进行了检测，均符合标准中对系统适用性的要求。本方法可用于广金钱草配方颗粒的分离和检测，为该配方颗粒的质量保证提供检测依据。

仪器系统及色谱柱推荐

1290 四元 UHPLC 系统: 全能泵(G7104A)，自动进样器(G7167B)，柱温箱(G7116B)，DAD(G7117B)

1260 四元 UHPLC 系统: 四元泵(G7111B)，自动进样器(G7129A)，柱温箱(G7116A)，DAD(G7115A)

其它详细操作可以参考 Agilent 配方颗粒图谱集，或联系 Agilent。