不同定量方法蛋白浓度实测对比(二) — 实际样品(杂蛋白)
2022-02-09944紫外吸收法是利用蛋白中色氨酸和酪氨酸残基在紫外280nm波长处有特征性的吸收峰,其光吸收值与蛋白质浓度呈正比,故可以用280nm波长吸收值大小来测定蛋白质含量。
然而对于杂蛋白来说,溶液中组成复杂,具有不同吸光系数的蛋白,除此之外溶液中的核酸也会影响蛋白检测的结果,因而当蛋白溶液不纯时,利用酶标仪进行比色法的蛋白定量将是您实验的更佳选择。
一、实验方法
用Trizol法提取8个湿重10mg大肠杆菌样品的总蛋白。
二、检测方法
2.1 紫外吸收法A280定量总蛋白浓度(奥盛Nano-500)
2.2 BCA法定量总蛋白浓度(奥盛Nano-500)
2.3 BCA法定量总蛋白浓度(奥盛FlexA-200全波长酶标仪)
三、检测结果
3.1 Nano-500的标准曲线建立
Nano-500微量分光光度计的比色法检测功能仅需2ul的上样量,仪器便可自动拟合出相应的曲线方程,并可导出保存,方便下次使用。
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