干血斑 (点) 技术应用于北京冬奥兴奋剂检测，优势在哪里？

2022 北京冬奥会

虎年大年初四 (2022 年 2 月 4 日)，在欢度新春佳节之际，我们也将迎来 2022 北京冬奥会。

本届冬奥会有众多精彩看点，身形矫健、奋勇拼搏的运动员，激动人心、动人心魄的雪上运动赛项，还有多项顶尖科技将集体亮相，创下历届冬奥会第一：第 1 个全 5G 覆盖的国际重大体育赛事；媒体转播全面上云；“冰丝带” (国家速滑馆) 是目前世界上Z大的采用二氧化碳跨临界直冷制冰技术打造的多功能全冰面，碳排放趋近于零；DBS 正式成为冬奥会兴奋剂检测方法……

北京冬奥会兴奋剂检测新亮点：DBS

一直以来，为保证体育赛事的公平公正公开，兴奋剂检测已成为运动员们赛前必不可少的体检项目。

兴奋剂检测可采用尿检和血检。尿检的取样需要由专人陪同，涉及 “隐私性”；血检必须由具备医学资质的专业人士，严格使用取血器材来抽取血样，且抽血程序需要得到运动员的认可和签字确认，强调专业性和程序正确性。

自 2019 年某运动员在兴奋剂检测中砸碎血样瓶引发国际体坛重大风波后，WADA (世界反兴奋剂组织) 就计划引入一种新型的样本采集方式，力求解决运动员兴奋剂检测的取样问题，避免同类事件再次发生。同年 10 月，由 WADA 牵头发起，包括中国反兴奋剂中心在内的世界 7 大国家反兴奋剂中心和国际组织共同决定将大力推行 DBS 方法，目标在 2022 年北京冬季奥运会和残奥会上实现使用 DBS 作为常规方法进行兴奋剂检测。

DBS

DBS (Dried Blood Spot) 的中文是干血斑 / 干血点 (将指血滴在专用卡纸上，干燥后形成的斑点)，可用于微量血液样本的储存、运输和分析检测。

与传统的血检相比，DBS 具有以下独特的优势：

•  采集方便，可由运动员自行独立完成。

•  微量采样，几滴指血即可。

•  固态血液样品安全、稳定，运输和储存方便。

DBS 在运动员兴奋剂检测中的应用，不仅适用于更大规模、更大覆盖面的检查，进而更有力地打击使用兴奋剂的违规者；还可以更好地保护运动员的隐私，提高运动员对于兴奋剂检测的依从性，尤其是在新冠病毒大流行的背景下，DBS 可以通过更少的人际接触展开兴奋剂的检查工作。

解决 DBS 分析 “痛点”，CAMAG 领跑反兴奋剂检测

随着 DBS 方法在兴奋剂检测中的大力推广应用，兴奋剂检测的频率和覆盖面将大幅增加。然而，在海量的样品面前，传统的 DBS 样品前处理方法已经不再适用，打孔-洗脱-超声-离心等多步骤，不仅费时耗力，而且难以质控，也成为 DBS 分析的重要瓶颈。

鉴于此，瑞士 CAMAG 公司依靠多年来在 DBS 样品处理领域积累的丰富经验和技术，推出新一代全自动干血斑样品处理系统：DBS-MS 500 HCT，可直接萃取 DBS 样品，无缝偶联液相色谱串联质谱 LC-MS/MS，实现样品全自动分析。

DBS-MS 500 HCT

DBS-MS 500 HCT 特性:

• One-Click 全自动样品制备

• 2 分钟制备 1 个样品

• 可连续制备 2,000 个样品

• 适用于萃取痕量的内源性和外源性物质

• 与主流的 LC-MS 和样品收集器无缝串联

目前 DBS-MS 500 HCT 已成功应用于自行车运动员的兴奋剂检测。

一直以来，DBS 分析过程中斑点面积还原成全血体积的准确性是一个 “痛点” 问题。由于每个人的 HCT (血细胞比容) 不一样，转换因子会受到 HCT 的影响，因此，测量 HCT 就成为了一个突破口。

由于运动员在运动前后会有大量体液的流失，这会造成 HCT 发生剧烈的变化，从而降低其 DBS兴奋剂检测的准确性。新一代全自动干血斑样品处理系统 DBS-MS 500 HCT 装有 HCT 分析模块，通过分析每个 DBS 样品的 HCT 值，可以消除 HCT 对全血体积定量不准确性的影响，从而大幅提高分析的准确度，进而大幅提高运动员在 DBS 兴奋剂检测的准确性。

检测案例

Tramadol 是一种主要用作镇痛药，可缓解普通到严重的疼痛。由于其在竞技自行车运动中的滥用，2019 年国际自行车联盟已将其列为禁用药物。针对 Tramadol 及其代谢物 O-desmethyltramadol，CAMAG 开发了一种方法，能够实现 4 分钟从样品到结果的全自动分析 (图 1)。研究者对 26 个真实样品进行传统血检和 DBS 检测，并将两种方法进行了交叉验证。结果显示，借助 DBS-MS 500 HCT，DBS 检测和传统血检的结果一致性良好 (图 2)，证明了 DBS 兴奋剂检测的可行性。

DBS 兴奋剂检测，中国在行动

反兴奋剂是一项长期而艰决的工作，需要世界各国的共同合作与努力。中国反兴奋剂中心作为 DBS 项目的发起者之一，全方位参与项目的规则和方法研究。中国反兴奋剂中心主任陈志宇表示，在全面总结、汲取备战东京奥运会史上Z严反兴奋剂工作成功经验基础上，中国反兴奋剂中心结合冬季项目备战的特点，制定了 “更严” 的北京冬奥会反兴奋剂工作方案和措施，以 “零容忍” 的态度全力实现北京冬奥会兴奋剂问题 “零出现” 目标。

反兴奋剂中心与国际同行合作开展的干血点检测项目将在 2022 年北京冬奥会和冬残奥会中执行。2021 年 6 月，反兴奋剂中心发布 《反兴奋剂中心关于开展干血点兴奋剂检查的通知》，并正式启动 DBS 兴奋剂检查检测工作。截至 2021 年 10 月底，北京冬奥会备战兴奋剂检查总例数已突破 4000 例，到运动员进村，还将实施超过 2000 例检查。

参考文献：

1. 一起向未来！多项顶尖科技亮相北京冬奥会，光明网，2022 年 1 月 17 日.

2. WADA leads exciting collaboration on dried-blood-spot testing, WADA RELEASES, 03 OCT 2019.

3. Updates on Anti-doping and TUE Management in Paralympic Sport, International Paralympic Committee.

4. Luginbühl M, Angelova S, Gaugler S,Längin A, Weinmann W. Automated high-throughput analysis of tramadol and O-desmethyltramadol in dried blood spots. Drug Testing and Analysis. 2020.doi:10.1002/dta.2819.

5. Luginbühl M, Fischer Y, Gaugler S. Fully Automated Optical Hematocrit Measurement from Dried Blood Spots, Journal of Analytical Toxicology. 2020. doi:10.1093/jat/bkaa189.

6. Luginbühl M, Gaugler S. Dried blood spots for anti-doping: Why just going volumetric may not be sufficient. Drug Testing and Analysis. 2021; 13: 69–73. doi:10.1002/dta.2977.

7. 北京冬奥会将全面开展干血点兴奋剂检查，人民网，2021 年 6 月 16 日.

8. 实验室认可助力我国反兴奋剂工作走向标准化、规范化，中国质量报，2021 年 7 月 16 日.

9. 北京冬奥会反兴奋剂备战冲刺，新华网，2021 年 10 月 27 日.

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