上海昊量光电设备有限公司
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昊量/auniontech FISH 滤光片和滤光片组

产品介绍:

       荧光原位杂交 (Fluorescence In Situ Hybridization, FISH) 是指利用荧光染料标记的,已知序列的单链核酸作为探针,通过碱基互补配对原则,与待检样品中核酸进行特异性结合,然后通过观察荧光信号,从而对样品中待检核酸进行定性,定量及定位分析。FISH 具有快速,信号强,特异性高以及可以多重染色等特点,广泛应用于产前诊断,基因组结构分析等领域。

影响 FISH 结果的因素有很多,包括样品准备和处理,显微镜,光源,荧光探针以及滤光片。FISH 通常基于荧光显微镜来观测信号,所用滤光片包括激发片,二向色镜和发射片三种。其工作原理如下图所示:


激发片: 选择透过光源的某部分波段的光,用来激发荧光探针;


二向色镜: 反射光源的光至样品,透过产生的荧光并反射激发光的散射光;


发射片: 选择透过荧光的某部分波段的光至检 测器或人眼,并完全阻挡掉激发光的杂散光。 


在 FISH 实验中,滤光片带宽的大小会对 FISH 图像的对比度产生重要的影响。增加带宽会提高激发和接收效率,使接收的信号增强。但实际接收的信号中同时包含了探针的荧光信号和样品的背底噪音,带宽的增加会同时增加这两者的强度。带宽减小,虽然可以降低背底噪音的强度,但荧光信号也会随之减弱 。所以对于对比度要求很高的 FISH 实验,针对于每种具体的染料,都会存在一个zui佳的带宽,使 FISH 图像能够达到zui佳的对比度。Chroma的FISH 滤光片的带宽都是根据常用的 FISH 染料做过优化,可以为用户的 FISH 实验提供zui佳的对比度的图像。



       FISH 实验中的噪音主要来自三个方面:

      (1) 细胞或组织的自发荧光;

      (2) 试剂的自发荧光;

      (3) 荧光探针的非特异性结合;


      Chroma FISH 滤光片组具有以下特点:

     ·保证足够亮度的同时,提供zui佳的对比度;

     ·消除串色的影响;

       a. 消除 Gold 和 Aqua 串色到 Green 通道;

       b. 消除 Gold 和 Orange 串色到 Red 通道;

     ·对多波段滤光片组中的 DAPI 通道进行特殊处理,避免 DAPI 信号过强而将其他信号掩盖;

     ·多色图像叠加零漂移;

     ·磁控溅射镀膜,终身质保。


FISH 单波段带通滤光片组:

滤光片组

激发片

CWL/FWHM

发射片

CWL/FWHM

二向色镜

50% cut-on

 FISH 探针

49000

350/50

460/50

400

DAPI

49028

395/25

460/50

425

DAPI

**用于395nm 光源

49301

405/10

460/36

425

Spectrum Blue/ZyBlue

49302

436/20

480/30

455

Spectrum Aqua

49303

495/25

537/29

515

Spectrum Green/ZyGreen

 **用于有Aqua,无 Gold 时

49308

485/25

525/30

505

Spectrum Green/ZyGreen

**用于无 Aqua,有 Gold 时

49312

490/20

525/20

505

Spectrum Green/ZyGreen

**用于有 Aqua,有 Gold 时

49304

546/10

572/23

556

SpectrumGold/ZyGold

49305

546/22

590/33

565

Spectrum Orange/ZyOange

**用于无 Red 时

49309

539/21

576/31

556

Spectrum Orange/ZyOange

**用于有 Red 时

49306

580/25

625/30

600

Spectrum Red/ZyRed 

**用于无 Gold,无 Orange 时

49310

592/21

630/30

610

Spectrum Red/ZyRed 

**用于有 Gold,无 Orange 时

49311

599/13

632/28

612

Spectrum Red/ZyRed 

**用于有 Orange 时

49307

630/20

667/30

647

Spectrum Far Red

49009

640/30

690/50

660

Spectrum Far Red


FISH 双波段带通滤光片组:

滤光片组

激发片

CWL/FWHM

发射片

CWL/FWHM

二向色镜

50% cut-on

FISH 探针

探针1

探针2

59001v2

Multi Band 

394/30 

483/26

Multi Band 

443/36 

527/40

Multi Band 

420 

502

DAPI

Green

59002v2

Multi Band 

394/30 

544/30

Multi Band 

462/35 

590/41

Multi Band 

430 

566

DAPI

Orange

59003v2

 Multi Band 

394/30

576/30

Multi Band 

462/35 

627/50

Multi Band 

442 

600

DAPI

Red

59010

Multi Band 

490/20

585/22

Multi Band 

526/25 

628/34

Multi Band 

508 

605

Green

Red

59011

Multi Band 

480/30 

560/25

Multi Band 

521/34 

606/40

Multi Band 

503 

585

Green

Orange

59012

Multi Band 

475/60 

552/24

Multi Band 

515/30 

597/46

Multi Band 

495 

570

Green

Orange

59033

Multi Band 

436/20 

535/25

Multi Band 

480/23 

580/30

Multi Band 

462 

558

Aqua

Gold


FISH 三波段带通滤光片组:

滤光片组

激发片

CWL/FWHM

发射片

CWL/FWHM

二向色镜

50%cut-on

FISH 探针

探针1

探针2

探针3

69008

Multi Band 

435/22 

501/20 

575/24

Multi Band 

469/25 

536/29 

635/69

Multi Band 

453 

517 

595

Aqua

Green

Red

69011

Multi Band 

434/21 

498/20 

566/28

Multi Band 

468/22 

530/25 

610/40

Multi Band 

453 

514 

588

Aqua

Green

Orange

69013v2

Multi Band 

395/25 

480/30 

560/25

Multi Band 

440/31 

520/35 

605/41

Multi Band 

420 

504 

585

DAPI

Green

Orange

89084v2

 

Multi Band Ex1

480/30

560/25

 

Multi Band

440/31

520/35

605/41

 

Multi Band

420

504

585

 


Green

Orange

Multi Band Ex2

395/25

480/30

560/25

 

DAPI

Green

Orange

Singe Band

395/25

480/30

560/25

 

DAPI

Green

Orange

69015

 

Multi Band

395/25

490/20

585/22

 

Multi Band

450/30

525/25

627/34

 

Multi Band

419

508

605

 

DAPI

Green

Red

89085

 

Multi Band Ex1

490/20

585/22

 

Multi Band

450/30

525/25

627/34

 

Multi Band

419

508

605

 


Green

Red

Multi Band Ex2

395/25

490/20

585/22

 


Green

Red

Single Band

395/25

490/20

585/22

 

DAPI


Red


FISH 三波段带通滤光片组:


滤光片组

激发片

CWL/FWHM

发射片

CWL/FWHM

二向色镜

50% cut-on

FISH 探针

探针1

探针2

探针3

探针4

69014

Multi Band 

387/10 

432/25 

498/20 

566/28

Multi Band 

468/22 

530/25 

610/40

Multi Band 

453 

514 

588

DAPI

Aqua

Green

Orange


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