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毛细管电泳在 DNA 指纹图谱分析中的应用

2021-03-013636

1984 年英国莱斯特大学的遗传学家 Jefferys 及其合作者S次将分离的人源小卫星 DNA 用作基因探针,与人基因组酶切片段进行 Southern 杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA 指纹"。意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。众多「DNA 指纹」组成「DNA 指纹图谱」。

DNA 指纹的图像在 X 光胶片中呈一系列条纹,很像商品上的条形码。DNA 指纹图谱,开创了检测 DNA 多态性(生物的不同个体或不同种群在 DNA 结构上存在着差异)的多种多样的手段,如 RFLP(限制性内切酶酶切片段长度多态性)分析、串联重复序列分析、RAPD(随机扩增多态性 DNA)分析等等。各种分析方法均以 DNA 的多态性为基础,产生具有高度个体特异性的 DNA 指纹图谱,由于 DNA 指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成为目前ZJ吸引力的遗传标记。

DNA 指纹图谱的高变异性和体细胞稳定性可用于鉴定个体,这对法医学上鉴别犯罪分子和确定个体间的血缘关系极有价值。它在人类医学中被用于个体鉴别、确定亲缘关系、医学诊断及寻找与疾病连锁的遗传标记;在动物进化学中可用于探明动物种群的起源及进化过程;在物种分类中,可用于区分不同物种,也有区分同一物种不同品系的潜力。在作物的基因定位及育种上也有非常广泛的应用。
       DNA 指纹图谱法的基本操作:从生物样品中提取 DNA(DNA 一般都有部分的降解),可运用 PCR 技术扩增出高可变位点(如 VNTR 系统,串联重复的小卫星 DNA 等)或者完整的基因组 DNA,然后将扩增出的 DNA 酶切成 DNA 片断,经琼脂糖凝胶电泳,按分子量大小分离后,转移至尼龙滤膜上,然后将已标记的小卫星 DNA 探针与膜上具有互补碱基序列的 DNA 片段杂交,用放射自显影便可获得 DNA 指纹图谱。
       使用琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 指纹图谱分析中的酶切产物存在着众多不便,需要手工配胶、制胶,加入的染料毒性较大,严重危害人体健康,同时需要使用大量耗材,还需要搭配凝胶成像系统进行拍照及数据的保留,后期再进行数据的处理,费时费力。厚泽生物公司推出 Qsep 系列毛细管电泳仪来实现自动化电泳过程,为科研工作者提供更为方便快捷的科研服务。Qsep 系列毛细管电泳仪也称为全自动核酸蛋白分析系统,只需要实验人员将 PCR 产物或酶切产物放置于仪器载物台上,选择所需要的程序,即可在电脑上得出实验结果,结果以数字峰形图和模拟凝胶图呈现,数据分析方法简单,且成本极低,分辨率很高,500bp 之内可达到 1% 分辨率,适用于各种分子标记。

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