HPLC与光散射检测器联用测定右旋糖苷的绝对分子量
2024-07-1269右旋糖苷(dextran)是蔗糖经肠膜状明串珠菌L.-M-1226号菌发酵后生成的高分子葡萄糖聚合物,经处理精制而得。由于聚合的葡萄糖分子数目不同,而产生不同分子量的产品。
本应用将高效液相色谱仪和东曹LenS3光散射检测器联用,配合使用TSKgel GMPWXL尺寸排阻色谱柱(7.8 mmI.D.×30 cm, 13 μm)对右旋糖苷样品的绝对分子量进行测定。
色谱柱:TSKgel GMPWXL(7.8 mmI.D. × 30 cm, 13 μm)
流动相:0.1 M PB+0.1 M Na2SO4
流速:0.8 mL/min
进样量:100 μL
温度:室温
仪器:Elite HPLC230Ⅱ、LenS3
样品制备:使用纯水将右旋糖苷溶解成浓度约2.07 g/L的溶液,使用0.22 μm孔径,PES材质的亲水性针式过滤器过滤,得到待测样品溶液。
图1 右旋糖苷样品多检测器测试谱图
(紫色曲线为RI检测器信号,蓝色曲线为90o角光散射(RALS)检测器信号)
图2 右旋糖苷样品的RI(紫色)&RALS(蓝色)和
分子量随流出时间曲线(绿色)
表1 右旋糖苷测试数据