PCR新手指南:热盖的作用及种类
2015-03-201112早期的PCR仪是没有热盖的,通过在PCR反应液中加入石蜡油(或矿物油)来防止PCR反应液蒸发。但反应完成后石蜡油不好除干净(我做实验时是将PCR反应液与石蜡油一起冷冻,取出后用手将管捂热,石蜡油先化开,立即将石蜡油用枪吸出。但并不能完全吸干净)。
后来出现了带热盖的PCR仪,热盖的作用并不是防止蒸发,而是防止蒸发的水汽在管盖上凝结。反应液中的水份还是会有部分变成蒸汽在管中,只是不会凝结在管盖上(如果没有热盖也不加石蜡油,反应管中的水份会全都凝结在管盖上的)。
PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖
1、非可调式热盖:即热盖并不能同时适用于高管和矮管,如AB的2720等只能用高管,用矮管得手工加铝块;
2、可调节式热盖:即热盖的高度可以手工调节,同时适用于各种高管和矮管,但压力需要自己感觉,用力过小或过大都可能会有麻烦,如MJ公司的PTC200。因为有这个问题,后来又出了力矩式可调热盖,即热盖旋转到一定力矩后内置机构打滑,从而保证一定的热盖压力。如东胜龙的黑金刚以及Biometra等。这类热盖打开前**旋松热盖,否则下一个用户如果直接下压热盖,可能造成部分PCR管变型。但很多用户会忘记松热盖。
3、自适应式热盖:即热盖自带预压紧的弹簧,通过与打开和关闭热盖的手柄机构相结合,达到压手柄时自动压紧热盖,开手柄时自动松开热盖,自适应高管和矮管,不用担心压力和没有松开热盖等问题。如东胜龙二代的ETC811型PCR仪。
4、自动式热盖:即热盖是由电机来控制的压紧与松开的。一般用于与实验室自动化相配合的PCR仪,或称为全自动PCR仪,如原MJ公司以及Biometra公司都有此类PCR仪,但价格都较高。