【海能实验室】膳食纤维测定仪测定可溶性、不可溶性及总膳食纤维含量
2024-05-24235
在追求健康生活的今天,大豆及豆制品
因其丰富的营养价值和多样的烹饪方式
逐渐成为人们的选择。
大豆膳食纤维粉
是一种常见的食品原料,
含有丰富的
可溶性和不可溶性膳食纤维,
还含有丰富的氨基酸和少量植物脂肪。
测定大豆膳食纤维粉的膳食纤维含量
对于其质量把控、食效分类
具有重要意义。
本方案使用DF06膳食纤维测定仪
对大豆膳食纤维粉进行测定。
1、将滤膜编号,于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MG后,安装于过滤漏斗中,并安装至仪器相应位置处。
2、移取350 μLl的热稳定淀粉酶溶液,溶于盛有50 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中;移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液,溶于盛有47 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中;移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液,溶解于盛有50 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中,然后将酶瓶安装至仪器相应位置处。
3、将酶解袋装于仪器相应位置处。
4、确保95%乙醇、纯水、顺丁烯二酸缓冲液、醋酸溶液的对应试剂桶中试剂充足,然后将其与对应接头连接。
本方案采用SOX606索氏提取仪进行样品的脱脂处理。
精确称取混匀后的样品10~12 g(精确至0.1 mg)左右,记为MC。将称好的样品转移至滤纸筒中。将盛有样品的滤纸筒置于仪器萃取室内,向溶剂杯中加入沸程30~60℃的石油醚,仪器参数设置如下:
2、在运行-第一法中选定设定酶解程序,开始运行,并按照步骤将酶解袋安装至仪器对应位置处,然后按照步骤提示将样品倒入酶解袋中。(注意避免样品粘在酶解袋内壁高于上压条的未知,否则应用带针头的注射器吸取缓冲液将样品冲入酶解袋,冲洗体积不超过两毫升)。
3、仪器自动进行酶解、乙酸溶液添加。然后根据弹窗提示测定(或需添加1 mol/L氢氧化钠溶液或乙酸溶液调整)空白、样品的pH值为4.3±0.2,然后点击下一步。若需测定不可沉降性膳食纤维(SDFS),则需按照提示加入内标物,以进行后续的液相法测试。
4、仪器自动进行沉淀、抽滤,得到滤液与TDF的残渣,将附有残渣的滤纸取出,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。
5、每两份残渣中,一份按照国标《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法进行消解(推荐试剂量为硫酸铜0.2 g、硫酸钾3 g、硫酸20 mL,420℃下保温时间至少为3小时),蒸馏、滴定,计算蛋白质质量MP;另一份置于马弗炉中,于550℃下灰化3h测定灰分,计算灰分质量MA。
2、在运行-第一法中选定设定酶解程序,开始运行,并按照步骤将酶解袋安装至仪器对应位置处,然后按照步骤提示将样品倒入酶解袋中。(注意避免样品粘在酶解袋内壁高于上压条的未知,否则应用带针头的注射器吸取缓冲液将样品冲入酶解袋,冲洗体积不超过两毫升)。
3、仪器自动进行酶解、乙酸溶液添加。然后根据弹窗提示测定(或需添加1mol/L氢氧化钠溶液或乙酸溶液调整)空白、样品的pH值为4.3±0.2,然后点击下一步。若需测定不可沉降性膳食纤维(SDFS),则需按照提示加入内标物,以进行后续的液相法测试。
4、仪器自动进行抽滤,得到滤液与ISDF的残渣,将附有残渣的滤纸取出,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。
5、将过滤漏斗的外斗装回仪器对应位置,点击下一步,仪器自动加入95%乙醇进行沉淀。
6、沉淀完成后,在仪器上换装另一套装有恒重好的滤膜的漏斗及烧瓶,将沉淀好的溶液摇匀并倒入新的漏斗中抽滤。抽滤完成后,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。
7、每两份残渣中,一份按照国标《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法进行消解(推荐试剂量为硫酸铜0.2 g、硫酸钾3 g、硫酸20 mL,420℃下保温时间至少为3小时),蒸馏、滴定,计算蛋白质质量MP;另一份置于马弗炉中,于550℃下灰化3h测定灰分,计算灰分质量MA。
实验选取的大豆膳食纤维粉样品经酶解、抽滤、烘干恒重、测定蛋白和灰分后,得到实验结果如下表所示,其中不可溶性膳食纤维(ISDF)的结果如下:
总膳食纤维(TDF)为ISDF与SDF的加和,测得该大豆膳食纤维粉的总膳食纤维含量为71.090%。
大豆膳食纤维粉可部分残留于称量纸上,必要时可用不超过2 mL缓冲溶液冲洗,洗液一并转移至酶解袋中。
随着人们越来越注重饮食健康,更多人关注到膳食纤维这一指标。根据《中国居民膳食指南》要求,每日需摄入25-30g 膳食纤维,在日常选购商品时,大家也可关注“增加膳食纤维”等标注。
自动膳食纤维测定仪可一键化完成酶解、沉降、洗涤等过程,以自动化操作替代繁琐人工,有效提高实验效率。DF06膳食纤维测定仪高效自动、精准可靠、简便友好、安全合规,主要应用于食品中总膳食纤维、可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维等指标的检测。