果蝇样品研磨——昊诺斯第12期组织研磨和样品处理分享、讨论

果蝇样品研磨昊诺斯第12期组织研磨和样品处理分享、讨论

本周昊诺斯第12期组织研磨和样品处理分享、讨论，我们给大家分享的案例是果蝇样品研磨。

那接下来，就让我们先睹为快，看看这个案例的情况。

实验：果蝇样品研磨

实验地点：某大学

试验样品：实验用果蝇

实验步骤：

1、取实验用果蝇，每个离心管中放入约7-8只，离心管可采用2ml圆底离心管或1.5ml离心管；

2、在离心管中加入5mm硬质不锈钢研磨珠2颗和1mm玻璃珠10颗，常温下加入提取液，盖好管盖，将离心管对称装入鼎昊源TL2010S自动研磨仪适配器中；

3、设置频率2000rpm研磨时间60s。

实验要点总结：

I.根据此实验经验，研磨果蝇使用1.5ml离心管研磨效果更好；

II.该实验必须配用玻璃珠，使研磨效果更好；由于果蝇个体太小，只用钢珠果蝇翅膀处不易磨，并且有些部位可能会磨不到。

研磨效果照片

此外，我们的分享嘉宾还跟群内用户进行了激烈的分享、讨论，让我们一同来看看擦出了怎样的火花吧！

昊诺斯嘉宾：这次用组织研磨仪研磨样品是比较小的昆虫，Z开始单纯用钢珠研磨效果一般，后来选择钢珠加玻璃珠的研磨方式，研磨效果还不错。

用户：玻璃珠不会碎吗？

昊诺斯嘉宾：不会，玻璃珠也是很硬的。

昊诺斯嘉宾：当时试过单颗钢珠，2颗钢珠，单纯玻璃珠及1颗钢珠配玻璃珠，结果发现还是1颗钢珠配玻璃珠效果**，研磨Z均匀。

用户：钢珠加玻璃珠挺有想法的，你试过光玻璃珠吗？钢珠和玻璃珠的直径是多少？

昊诺斯嘉宾：试过，单纯的玻璃珠比较轻，对于稍微有点硬的果蝇效果一般。

用户：果蝇在研磨前需要做哪些处理么？

昊诺斯嘉宾：钢珠是5mm的，玻璃珠是1mm的。

用户：只用玻璃珠肯定质量太轻，效果不好。

昊诺斯嘉宾：果蝇之前是培养在试管里面的，然后用组织研磨仪研磨之前，加入缓冲液，直接研磨。

昊诺斯嘉宾：当时单纯用钢珠不加玻璃珠的时候，只能把样品大致研碎，但还碎的不是很充分。

用户：玻璃珠直径很小，所以使得样品研磨的更细致吧？

昊诺斯嘉宾：是的，其实以后要是遇到类似样品也可以试下这种办法，既有一定硬度，又比较细小的样品可以试一下，像果蝇、线虫，或者是藻类都可以试下。

用户：果蝇冻干处理了吗？

昊诺斯嘉宾：没有，就是死的果蝇然后加入缓冲液。

用户：处理完怎么清理？感觉挺那个的。

昊诺斯嘉宾：研磨完吗？

用户：嗯。

昊诺斯嘉宾：就是补齐缓冲液，然后低速离心取上清。

用户：我正在磨马尾藻。

昊诺斯嘉宾：是鲜样还是干样？

用户：新鲜的，加了一个5mm钢珠和3个3mm钢珠。

昊诺斯嘉宾：研磨时间呢？

用户：时间9分钟，九次，每次1分钟。干磨效果不佳。

昊诺斯嘉宾：您试过冻液氮后再研磨吗？

用户：我又加了缓冲液，再磨了次，略好些，以前试过液氮。

昊诺斯嘉宾：效果怎么样？

用户：想不通过液氮试试，效果一般。我现在加了缓冲液再磨一次。

昊诺斯嘉宾：植物样品研磨一般是冻液氮干磨，或者加提取液湿磨。

用户：时间还是比较长。

昊诺斯嘉宾：您缓冲液加了多少？如果缓冲液加的多的话，对钢珠的阻力也会比较大。

用户：200mg加400ul，我对DNA要求不高，估计还行。

昊诺斯嘉宾：您提取过DNA吗？

用户：你是指哪种？植物动物微生物都弄过。

昊诺斯嘉宾：我是说研磨之后，提取过DNA吗？效果怎么样？

用户：做动物的我直接不磨，直接20mg提取。

昊诺斯嘉宾：刚才我看了下马尾藻，跟小球藻不一样，您试下用2颗5mm，或者2颗6mm钢珠试下。我怀疑一颗5mm的撞击力度可能有点小，试下2颗。

用户：实践证明，磨不碎，再试试别的。

Z后，让我们共同期待第13期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧！下期，我们不见不散！

温馨提示：

我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的！如果您也想参与我们的活动，那么就找昊诺斯销售工程师拉您进群，或者回复昊诺斯微信公众号申请进群（申请时要注明所在单位名称+微信号）。

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