【假期清洁小贴士】色谱柱篇
2024-01-3168适用于T3/C18+/Shield RP18/C18SB等C18、C8、苯基、氟苯基等键合相。
1.
90%水相(若分析方法初始水相比例高于90%,可使用相同的水相比例)等度洗脱10-20个柱体积,保证缓冲盐及极性大的成分(如糖、醇等组分) 冲洗干净;
2.
梯度方式过渡至50%有机相并等度洗脱10-20个柱体积,以冲洗中等极性组分;
3.
梯度方式过渡至100%有机相,并最后用100%有机相等度洗脱10-20个柱体积,保证非极性、强保留成分冲洗干净;
4.
柱温在色谱柱耐受范围内将提高2-5度,方法运行完及时关闭柱温;
5.
反相色谱柱长时间保存时建议使用100%乙腈或甲醇。
表1. 不同内径及长度色谱柱柱体积参考表。
以4.6 × 150 mm规格色谱柱为例,柱体积为2.5 mL时,可参考如下冲洗梯度:若样品分析方法中初始水相比例更高,建议与分析方法保持一致,如有需要可反复冲洗2-3次。
图1. 冲洗梯度。
适用于HILIC/BEH Amide/BEH Z-HILIC等色谱柱。
对于HILIC模式色谱柱,参照如下方法进行清洗,如有必要可反复冲洗2-3次。
若流动相体系中不含缓冲盐:
1.
95:5的乙腈:水等度洗脱10-20个柱体积,将极性小的组分冲洗干净;
2.
梯度洗脱至50:50的乙腈:水,并等度维持10-20个柱体积,冲洗中等极性的组分;
3.
将流速降低至原流速一半(如由1 mL/min降至0.5 mL/min),以避免水相升高时突然发生压力骤升而导致超压;
4.
梯度洗脱至5:95的乙腈:水,并等度维持10-20个柱体积;对BEH Amide或BEH Z-HILIC可洗脱至100%水相;
5.
等度5-10个柱体积置换溶剂,并将色谱柱保存在100%乙腈中;
6.
柱温在色谱柱耐受范围内将提高2-5度,方法运行完及时关闭柱温。
若流动相体系中含有缓冲盐时:
1.
先用50:50的乙腈:水等度冲洗,去除缓冲盐;
2.
再按照不含缓冲盐步骤1开始进行清洗。
在色谱柱清洗完成后,可参考【假期关机小贴士】仪器篇再对您的仪器进行维护。
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此类疑问您可在公众号-耗材应用-消耗品资料库-色谱柱的使用维护/资料工具与常见问题中查询。
色谱柱的使用维护/资料工具与常见问题(左右滑动查看)
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