人转化生长因子B1 (TGF-B1) Elisa试剂盒说明书
2024-08-0713人转化生长因子B1 (TGF-B1) Elisa试剂盒说明书
一、产品概述
本产品为人转化生长因子B1(Transforming Growth Factor Beta 1, TGF-B1)Elisa试剂盒,专为科研及临床诊断领域设计,用于定量检测人血清、血浆、组织液或细胞培养上清液等生物样本中的TGF-B1含量。TGF-B1作为一种多功能的细胞因子,在细胞增殖、分化、凋亡、细胞外基质合成、免疫调节及组织修复等生理病理过程中发挥重要作用。本试剂盒采用高灵敏度、高特异性的双抗体夹心法,结合先进的酶标仪检测技术,确保检测结果准确可靠。
二、产品组成
1. 微孔板:预包被TGF-B1特异性捕获抗体的96孔板。
2. 标准品:系列浓度的人TGF-B1标准溶液,用于绘制标准曲线。
3. 检测抗体:TGF-B1特异性检测抗体,与样本中TGF-B1结合形成“捕获抗体-TGF-B1-检测抗体”复合物。
4. 酶标抗体:辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,识别并结合检测抗体,用于后续显色反应。
5. 显色液A&B:分别为底物溶液和催化剂溶液,混合后用于HRP催化显色。
6. 终止液:用于终止显色反应,使颜色稳定便于检测。
7. 洗涤缓冲液:用于去除未结合物质,保证检测准确性。
8. 样本稀释液(如适用):用于稀释高浓度样本,使其符合检测范围。
9. 封板膜:用于封闭微孔板,防止蒸发和污染。
10. 说明书:详细操作步骤、注意事项及储存条件等。
三、检测原理
本试剂盒基于酶联免疫吸附测定(Elisa)原理。首先,样本或标准品加入微孔板中,与预包被的TGF-B1特异性捕获抗体结合;随后加入检测抗体,形成“捕获抗体-TGF-B1-检测抗体”复合物;再加入酶标抗体,与检测抗体结合;后加入显色液,HRP催化底物产生颜色反应,颜色深浅与样本中TGF-B1含量成正比。通过酶标仪测定各孔吸光度值,根据标准曲线计算样本中TGF-B1浓度。
四、操作步骤
1. 准备工作:提前将试剂盒、样本及所需试剂置于室温平衡。
2. 标准品稀释:按照说明书要求,用标准品稀释液梯度稀释标准品,建立标准曲线。
3. 加样:分别向各孔加入标准品或待测样本,设置空白对照孔,轻轻混匀,避免产生气泡。
4. 孵育:盖上封板膜,置于温育箱中,按说明书规定时间进行孵育。
5. 洗涤:小心揭去封板膜,弃去孔内液体,每孔加入洗涤缓冲液,静置后甩干,重复洗涤数次。
6. 加检测抗体:向各孔加入适量的检测抗体,轻轻混匀,继续孵育。
7. 重复洗涤:同步骤5。
8. 加酶标抗体:向各孔加入酶标抗体,孵育。
9. 再次洗涤:同步骤5。
10. 显色:向各孔加入显色液A和B,避光孵育,观察颜色变化。
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