中性蛋白酶(NP)活性检测试剂盒
2024-01-2330中性蛋白酶(NP)活性检测试剂盒
产品简介
中文名称:中性蛋白酶(NP)活性检测试剂盒
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
英文名称:Neutral Proteinase(NP) Activity Assay Kit
别名:中性蛋白酶试剂盒 中性蛋白酶测试盒
检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格:100T/48S
测定意义:NP在一定的温度和中性pH条件下,催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点,中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。
测定原理:中性条件下,NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰
需要的仪器,耗材:可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP管和蒸馏水。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
研钵/匀浆器、台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP 管、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)称约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃离心 10min,取上清,即粗酶液,置冰上待测。或直接称取 0.1g 酶制品,加入 1mL 提取液,置冰上待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、 试剂一、试剂二和试剂三置于30℃水浴保温30min以上。
3、 标准溶液的配制:临用前将20μmol/mL标准液用蒸馏水稀释80倍至0.25μmol/mL标准溶液使用,现用现配。
4、 样本测定 (1.5mLEP管中分别加入下列试剂)
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