德晟带你秒懂生物缓冲剂TRIS（三羟甲基氨基甲烷）

Tris（三羟甲基氨基甲烷）是生化实验中最常使用的缓冲液，因为它有好的缓冲能力、毒性低、对生物反应的干扰极低，而且纯度很高。有超过磷酸盐的趋势，如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中都已开始实验TRIS缓冲液，很少再用磷酸盐。在分子生物实验中使用也很广泛。

1、TRIS（三羟甲基氨基甲烷）的应用

① 在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定P值；

② 在凝胶中使用TRIS-HCL缓冲体系稳定PH值；

③ 被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；

④ TRIS缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；

⑤ 在TRIS盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和储存；

⑥ 将调节PH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种溶液常用于核酸电泳实中。

2、使用TRIS（三羟甲基氨基甲烷）缓冲液的注意事项

① TRIS缓冲液的PH值容易受温度的影响，所以在配置的过程中注意环境温度；

② 缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1，常配成pH值为6.8，7.4，8.0，8.8；

③ Tris在一定程度上与各种分子反应，包括RNA酶抑zhi剂，醛，酶，DNA以及常见金属如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑zhi作用；

④ 对某些pH电极发生一定的干扰作用，需使用与Tris缓冲溶液具有兼容性的电极；

⑤ Tris不适用于二喹啉甲酸（BCA）测定；

⑥ 易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封；

⑦ 它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑zhi作用；

⑧ 吸入，摄入，皮肤吸收可造成伤害，操作时需戴好手套和护目镜。

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