FISH技术介绍及荧光显微镜应用

      荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是应用荧光染料标记探针DNA，以荧光标记取代同位素标记组织、细胞核或染色体DNA进行杂交的一种研究DNA序列在染色体上位置的新的原位杂交方法，常被称为是生命科学的“钓鱼”技术。利用这一技术可对待测核酸定性、定位或相对定量的分析。

      传统的原位杂交方法是将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交后采用放射自显影进行检测，这种检测限制了杂交技术的广泛应用，20世纪末由于人类基因组计划的启动，FISH技术得到了迅速的发展和广泛的应用。

      FISH技术是一种非放射性原位杂交技术，结合了生物学和细胞遗传学，将真核生物细胞的染色体区带与特定DNA片段联系起来的一种快速而直接的检测手段，广泛应用于生物学研究中，可作为免疫组化表达初步筛查的方法，提高了基因定位的准确性。

利用DNA碱基对的互补性，将直接标记了荧光的单链DNA(探针)和与其互补的目标样本的DNA(玻片上的标本)杂交，通过观察荧光信号在染色体上的位置反映相应染色体的情况。

通过荧光显微镜观察杂交信号。FISH在荧光显微镜下可以确认出肿瘤所在的位置。

      因其安全性高、特异性好、快速准确，可以同时检测多种序列、使用周期长，在基因定位、染色体结构分析与数目测定、人类产前诊断、病毒感染分析、肿瘤遗传学等方面都发挥了不容小觑的作用。 今后在研究细胞核骨架与基因表达的关系、基因扩增，基因组结构与哺乳动物的染色体调控等领域将会起到积极的作用。

（来源：广州市明美光电技术有限公司）