利用压力循环技术（PCT）对皮质骨中分离出来的蛋白和多肽进行电泳分析

文档简介Extractionofproteinsfromextensivelycalcifiedosseoustissue,suchascorticalbonehasbeenparticularlychallengingfortraditionalmethodsofsamplepreparation.However,acomprehensiveproteomicanalysisofboneisonlypossiblewhenthetotalproteinconstituencyiseffectivelyisolated.Theefficiencyofsamplepreparationisthereforeacriticalcomponentoftheanalyticalprocess.Historically,extractionofproteinfrombonerequiredprolongedaciddemineralizationoverseveraldaystoenablecompletepenetrationofhistochemicalreagentstocellularcomponents.Herewedescribeamethodfortheextractionofproteinfromostrichtibia,whichwasusedasamodelsampletodevelopanextractionprocessthatusespressurecyc领technology（PCT）andalsowhichobviatestheneedforaciddemineralizationpriortoextraction.Theabilitytoextractproteinsfrombonewithoutpriordemineralizationoffersimportantadvantagesinefficientrepresentativeextractionofproteinandsignificanttimesavingsduringsamplepreparation.利用压力循环技术（PCT）对皮质骨中分离出来的蛋白和多肽进行电泳分析从皮质骨等充分钙化的骨质组织中提取蛋白的方法极大地挑战了传统的样品制备方法。然而这种方法只有在总的目标蛋白有效分离的时候，广泛的蛋白质组学分析才能成为可能。因此，样品制备的有效性成为分析过程中的关键因素。历史上，从骨头中提取蛋白需要几天的去除矿物质的过程使得组织化学试剂完全渗透到细胞组分中。本文描述了一种从鸵鸟胫骨中提取蛋白的方法，该方法利用了压力循环技术（PCT），而且省去了以往的在提取蛋白之前先对样品进行去除矿物质的过程。这种方法使得提取蛋白非常有效而且节约了大量的时间成本。Liberty研究级微波多肽合成仪详情请浏览http://www.pynnco.com,或咨询：电话：010-65528800，传真：010-65519722，邮件sales@pynnco.com