使用 PyroGene 重组因子 C 试剂盒进行内毒素检测

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• 使用 PyroGene 重组因子 C 试剂盒进行内毒素检测

  使用 PyroGene 重组因子 C 试剂盒进行内毒素检测[详细]

  2024-09-28 21:52

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• 产品应用（97）使用PyroGene重组因子C试剂盒进行内毒素检测

  在制药和YL器械生产过程中，对污染物样品的监测是一个关键步骤。[详细]

  2021-02-26 12:35

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• 内毒素检测试剂盒说明

  显色基质鲎试剂盒使用说明书（终点显色法，含偶氮化试剂）【用途】显色基质鲎试剂（ChromogenicEnd-pointTachypleusAmebocyteLysate,CETAL）用于体外细菌内毒素的定量检测，禁止以任何途径进入机体。【原理】鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下（温度，pH值及无干扰物质），细菌内毒素激活C因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对硝基苯胺（pNA，λmax=405nm）。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。同时，对硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色（λmax=545nm），避免了供试品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。【检测限】按反应时间不同可检测0.1EU/ml-1EU/ml和0.01EU/ml-0.1EU/ml两个区间（反应时间T1和T2见出厂检验报告）。【试剂盒组成】细菌内毒素工作品，2支鲎试剂，1.7ml/支，2支显色基质，1.7ml/支，2支偶氮化试剂1，10ml/支，2支偶氮化试剂2，10ml/支，2支偶氮化试剂3，10ml/支，2支HCl（反应终止剂），50ml/瓶，1瓶细菌内毒素检查用水，50ml/瓶，2瓶【贮存】阴凉处,**2-8℃,避光贮存。【用法】1.材料和设备1.1试剂鲎试剂、细菌内毒素工作品、显色基质、偶氮化试剂1、偶氮化试剂2、偶氮化试剂3、HCl（反应终止剂）、细菌内毒素检查用水。1.2器材旋涡混合仪、移液器、多道移液器、封口膜、试管架。恒温水浴箱（37±1℃）、分光光度计。注意：接触试剂及供试品的所有器皿必须是无热原的（我公司提供无热原耗材）。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。2.供试品的贮存与预处理备注：若供试品为血液类，请参照配套血液相关处理试剂使用说明书。2.1供试品的pH值应在6-8之间，若超出此范围，需用无热原缓冲液、0.1N氢氧化钠或0.1N盐酸调节。2.2若供试品中可能存在鲎实验的干扰物质，处理参见【供试品的干扰试验】。2.3若供试品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖会产生G因子旁路反应，干扰内毒素检测），需选用特异性鲎试剂（我公司提供）。2.4若供试品为一些KJ素如头孢类KJ素和磺胺制剂会对偶氮染色剂产生偶联反应而干扰偶氮化显色，需要选用不含偶氮化试剂的试剂盒（我公司提供）。2.5若供试品的本底吸光度值大于0.5,必须对供试品进行稀释后再检测。2.6若供试品颜色较深（例如溶血），或在酸性条件下颜色加深（例如一些组织培养介质）,必须设置供试品空白管以扣除供试品自身的颜色本底。供试品空白管不加入鲎试剂，以等体积鲎试剂的溶剂（该处为细菌内毒素检查用水）代替。其余操作同供试品管。3.实验操作3.1细菌内毒素标准溶液配制标准曲线所采用的内毒素浓度可以为0.01,0.025,0.05,0.1EU/ml或0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml。稀释方法如下（以0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml为例）：取细菌内毒素工作品1支，按细菌内毒素工作品使用说明书稀释为10EU/ml的内毒素溶液，再稀释为1.0EU/ml的内毒素溶液，以1.0EU/ml的内毒素溶液为母液按下表稀释成0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。表1内毒素标准溶液配制内毒素浓度（EU/ml）10.50.250.1加细菌内毒素检查用水（ml）00.50.750.9加1EU/ml内毒素溶液（ml）10.50.250.1鲎试剂：按标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解,注意不要用旋涡混匀仪激烈振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内用完。显色基质：按标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中，轻轻振摇使显色基质完全溶解。显色基质溶液可在无污染的条件下于4C贮存8小时以内。偶氮化试剂1：按标示量加反应终止剂盐酸于偶氮化试剂1中，偶氮化试剂2：按标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂2中，偶氮化试剂3：按标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂3中，偶氮化试剂溶液可于4C贮存1周。3.4实验操作取无热原试管，加入100ml细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液，或供试品。再加入100ml鲎试剂溶液，混匀，37C温育T1分钟。温育结束，加入100ml显色基质溶液，混匀，37C温育T2分钟。温育结束，加入500ml偶氮化试剂1溶液，混匀，加入500ml偶氮化试剂2溶液，混匀加入500ml偶氮化试剂3溶液，混匀，静置5分钟，于545nm波长处读取吸光度值。（见表２）表2实验操作阴性对照内毒素标准供试品加细菌内毒素检查用水（ml）100加内毒素标准溶液（ml）100加供试品（ml）100加鲎试剂（ml）100100100混匀，37C温育T1分钟加显色基质溶液（ml）100100100混匀，37C温育T2分钟加偶氮化试剂1溶液（ml）5005005004.数据处理建立标准曲线：Y=bX+a，其中Y为545nm处吸光度值，X为内毒素的浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：1.标准曲线的相关系数r≥0.980，2.标准曲线Zdi点的Y值大于阴性对照的Y值，3.供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。【供试品的干扰试验】供试品的干扰试验详见《中华人民共和国药典》2005版中《细菌内毒素检查法》的“光度测定法干扰试验”。当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须进行干扰试验,步骤如下:1选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度（设为λm），作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度，配制含λm内毒素的供试品阳性对照，测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs；2测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度,称为Ct；3计算该试验条件下的回收率R＝（CsCt）/λm×1**%4当R在50%～200%之间，则认为在此试验条件下供试品溶液不存在干扰作用。5当R在50%～200%之外，需对供试品进行系列稀释（稀释倍数不得超过Zda有效稀释倍数MVD）或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%～200%之间。选择回收率RZ接近1**%的稀释倍数进行内毒素检测。[详细]

  2018-09-18 10:00

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• 采用重组 C 因子法在 Molecular Devices 四款不同型号多功能微孔板读板机上进行定量检测

  采用重组 C 因子法在 Molecular Devices 四款不同型号多功能微孔板读板机上进行定量检测[详细]

  2024-09-16 04:16

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• 采用重组 C 因子法在 Molecular Devices 四款不同型号多功能微孔板读板机上进行 定量检测

  在制药和YL器械生产过程中，对污染物样品的监测是一个关键步骤。内毒素存在于革兰氏阴性细菌的细胞壁中，是一种常见的污染物，可引起发烧、炎症、头痛、恶心，甚至死亡。内毒素的常规检测方法是鲎试剂溶酶法 (LAL)，核心成分由鲎的血液中提取而来。在内毒素存在的情况下，LAL 通过酶促级联凝固，可以通过比浊法或显色法定量 ( 图 1A )。这些方法涉及多个酶的步骤，并取决于鲎的可用性。 2021 年 2 月 5 日，国家林业和草原局、农业农村部发布公告，调整后的的《 国家ZD保护野生动物名录 》正式发布，将我国分布的鲎科动物 ( ZG鲎、圆尾蝎鲎 ) 升级为国家二级保护动物。ZG药典 2020 年版 9251 细菌内毒素检查法应用指导原则中指出，目前新的细菌内毒素检测方法不断出现，以适应特殊品种细菌内毒素检查的需要，或减少鲎试剂的使用量。如重组 C因子法 ( 见附 )、微量凝胶法等。[详细]

  2024-09-10 23:17

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• 大肠杆菌内毒素试剂盒使用说明书

  检测范围：96T0.03Eu/L0.8Eu/L使用目的：本试剂盒用于测定大肠杆菌样本中内毒素(endotoxin)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌内毒素(endotoxin)水平。用纯化的大肠杆菌内毒素(endotoxin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素(endotoxin)，再与HRP标记的内毒素(endotoxin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内毒素(endotoxin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌内毒素(endotoxin)浓度。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 兔内毒素ELISA检测试剂盒

  兔内毒素ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：Endotoxins试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Endotoxins浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Endotoxins和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Endotoxins的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Endotoxins抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。兔内毒素ELISA检测试剂盒试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：80pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（pg/ml）A8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。兔内毒素ELISA检测试剂盒样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的Endotoxins标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的Endotoxins含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-80pg/ml4、敏感度：0.1pg/ml[详细]

  2018-11-04 10:00

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• 大鼠内毒素(Endotoxin)检测试剂盒

  大鼠内毒素(Endotoxin)检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 00:45

  安装说明

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• 人内毒素(ET)检测试剂盒

  人内毒素(ET)检测试剂盒[详细]

  2024-09-29 02:02

  课件

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• 人内毒素(ET)检测试剂盒

  人内毒素(ET)检测试剂盒[详细]

  2024-09-30 14:18

  应用文章

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• 300 40074 CS Rev. A - Eclipse使用重组级联试剂分析细菌内毒素

  Sievers Eclipse BET 检测仪采用动态方法来分析标准曲线和最多 21 个带阳性对照（PPC，Positive Product Controls）的样品。[详细]

  2024-11-07 18:06

  应用文章

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• 大肠杆菌内毒素elisa试剂盒使用说明书

  大肠杆菌内毒素elisa试剂盒使用说明书[详细]

  2015-05-14 00:00

  标准

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• 透析专用快速内毒素检测试剂盒

  透析专用内毒毒检测试剂说明[详细]

  2024-09-30 22:50

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• 内毒素检测恒温仪

  《ZG药典》2002年版细菌内毒素检查法要求：反应试管应“垂直放入37±1℃适宜恒温器中，保温60±2分钟”。根据这一要求，公司研制开发了一种专用于凝胶法细菌内毒素检查的实验设备N10型试管恒温仪。与传统使用的恒温水浴箱比较，N10型试管恒温仪有如下特点：产品特点1.即时温度显示、时间递减显示2.自动故障检测及报警功能3.蜂鸣器报警提示功能4.温度偏差校准功能5.便捷的模块更换,便于清洁与消毒6.内置超温保护装置7.具有中断暂停功能8.液晶显示,薄膜开关[详细]

  2018-09-10 11:11

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• 大鼠内毒素（ET）ELISA试剂盒使用说明书

  南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中大鼠内毒素（ET）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内毒素（ET）水平。用纯化的大鼠内毒素（ET）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素（ET）再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠内毒素（ET）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠内毒素（ET）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：0.9Eu/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为0.6Eu/L，0.4Eu/L，0.2Eu/L，0.1Eu/L，0.05Eu/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：0.02Eu/L-0.8Eu/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 人脂多糖/内毒素(LPS)检测试剂盒

  人脂多糖/内毒素(LPS)检测试剂盒[详细]

  2015-03-17 00:00

  专利

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• 大鼠内毒素（Endotoxin）ELISA 检测试剂盒现货

  大鼠（Rat）内毒素（Endotoxin）ELISA检测试剂盒用途：大鼠EndotoxinELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的Endotoxin。本试剂盒可以检测天然和重组的Endotoxin。本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。试验原理：大鼠Endotoxin试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Endotoxin浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Endotoxin和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Endotoxin的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Endotoxin抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（60ml）1瓶（30ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型大鼠（Rat）内毒素（Endotoxin）ELISA检测试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：80pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（20×）的稀释：蒸馏水20倍稀释。大鼠（Rat）内毒素（Endotoxin）ELISA检测试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（pg/ml）A8080样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品结果分析以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的Endotoxin标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的Endotoxin含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。大鼠（Rat）内毒素（Endotoxin）ELISA检测试剂盒局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1．灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2．特异性：不与人其它细胞因子反应。3．重复性：板内、板间变异系数均小于10%。[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 大鼠内毒素（endotoxin）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  大鼠内毒素（endotoxin）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：0.03Eu/L0.8Eu/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中内毒素（endotoxin）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内毒素（endotoxin）水平。用纯化的大鼠内毒素（endotoxin）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素（endotoxin），再与HRP标记的内毒素（endotoxin）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的内毒素（endotoxin）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠内毒素（endotoxin）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（1.6Eu/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。0.8Eu/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液0.4Eu/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液0.2Eu/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液0.1Eu/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.05Eu/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 大白鼠类风湿因子试剂盒使用

  大白鼠类风湿因子试剂盒使用[详细]

  2015-04-02 00:00

  标准

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• 人组织因子 （TF） ELISA 检测试剂盒使用说明书

  人组织因子（TF）ELISA检测试剂盒使用说明书操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。ELISA检测试剂盒试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。ELISA检测试剂盒操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的TF标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的TF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-1600pmol/L4、敏感度：1.0pmol/L[详细]

  2024-10-03 20:16

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