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细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

上海科学仪器有限公司 2018-11-18
文档简介主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)还原后峰值的变化,即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景异柠檬酸脱氢酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循环(citricacidcycle)或克雷布斯循环(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物体内。细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶:同源双体,40至45Kd分子量;单体,80至100Kd分子量。在细菌体内,氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子(Mn)的推动,脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳(氧化性脱羧基作用),转化为α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸环境中,以及有限的葡萄糖条件下,异柠檬酸脱氢酶则失活,从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之间碳的流动。基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性,和作用后所产生的NADPH,通过分光光度仪的峰值变化(340nm波长),来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。异柠檬酸脱氢酶反应系统为:
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