细胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量检测

文档简介主要用途细胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，释放黄色对硝基苯胺，产生吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体、昆虫等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或称半胱天冬蛋白酶，是调节细胞凋亡的一类蛋白酶家属。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家属中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀丽隐杆线虫细胞死亡基因数3）分支的一种，又称CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度传说中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前体为32kd，被切离为17kd和11kd而激活细胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ剂（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性检测用来评价细胞或组织的凋亡状况。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰颉氨酰天冬氨酰对硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，释放有色对硝基苯胺，在分光光度仪（405nm波长）下，测定吸光峰值的变化，来定量测定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反应系统为：