植物3-羟-3-甲戊二酰辅酶A试剂盒说明书

文档简介主要用途植物3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂是一种旨在运用3-羟-3-甲戊二酰辅酶A作为底物，在还原酶的催化下，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法来测定植物裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解悬液、微粒体，或纯化酶样品3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景甲戊二羟酸通路（mevalonatepathway），又称为3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶通路或甲戊二羟酸依赖性通路，是所有高等真核生物和许多细菌具有的重要的细胞代谢通路，用于体内产生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallylpyrophosphate；DMAPP）和异戊二烯焦磷酸（isopentenylpyrophosphate；IPP）作为生物大分子合成的基础，包括蛋白质异戊二烯化、细胞膜维护、激素合成、蛋白固着、蛋白糖化等。3-羟-3-甲戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoAreductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羟酸通路的关键的酶，调节胆固醇和类异戊二烯脂分子的产生。HMG-COA还原酶位于内质网膜上，含有8个跨膜结构域，其中活性结构域在细胞浆里。HMG-COA还原酶是许多降脂药物的靶标，包括lovastatin（Mevacor）、atorvastatin（Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物组织中，HMG-COA还原酶位于质体、线粒体和内质网上，含有2个跨膜结构域，组织发育、光照、病原菌感染、创伤等将诱导HMG-COA还原酶活性增加。在HMG-COA还原酶的催化下，将4个电子的3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原为甲戊二羟酸（mevalonate），同时产生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）被氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值变化（340nm波长），来定量分析3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶的活性。3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶反应系统为：