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细胞基质金属蛋白酶原位明胶酶谱法荧光染色试剂盒产品说明书

上海科学仪器有限公司 2018-11-18
文档简介主要用途细胞基质金属蛋白酶(MMP)原位明胶酶谱法(insituzymography)荧光染色试剂是一种旨在通过异硫氰酸荧光素标记的明胶作为底物,针对未固定处理的细胞样品予以染色处理,基质金属蛋白酶切离底物产生高度绿色荧光,来定位细胞中的基质金属蛋白酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物细胞基质金属蛋白酶-2和9的分析。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,荧光清晰,重复性好。技术背景基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的总称,因含有金属(锌、钙)离子而得名。迄今为止发现的MMPs至少有28种,几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质(extracellularmatrix)成分,同时参与胚胎发育、形态形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、组织再吸收(tissueresorption)、疾病发生,例如关节炎、癌细胞浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类:(1)胶原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖;(2)明胶酶(Ⅳ型胶原酶):MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维;(3)基质溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11,主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金属蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内绝大多数细胞并不储备MMPs,当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成,合成的MMPs以无活性的酶原(proenzyme)形式分泌到细胞外,随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活,一种激活的MMPs可激活另一种MMPs,形成瀑布效应。原位明胶酶谱法荧光染色(in-situfluorescencezymography)技术在于提高基质金属蛋白酶检测的敏感性,使用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的明胶作为底物,经过基质金属蛋白酶水解后产生荧光多肽,据此在荧光显微镜下检测酶的活性和位置。
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