石蜡切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）试剂盒

文档简介石蜡切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂盒产品说明书主要用途石蜡切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫（Verhoeff）苏木素以及三色染料（trichrome），分析和区分存档中的石蜡包埋组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景弹性纤维（elasticfiber），又称为黄色纤维（yellowfiber），是固有结缔组织（Connectivetissueproper）细胞外基质的成分之一，由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质（elastin）、原纤维蛋白（fibrillin；FBN）等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带（periodontalligament）、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症（cutislaxa）、威廉姆斯综合征（WilliamsSyndrome）等疾病。基于摩罗利（mallory）首次应用三色系统的方法，马森（masson）进行了改良，在三色复合染料体系中，使用苯胺篮（anilineblue）替代绿篮。同时使用伟郝夫（Verhoeff）苏木素选择性染色弹性纤维，三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）等组织成分。马森方法操作复杂，可以细致区分多种组织成分。产品内容脱蜡液（ReagentA）300毫升脱水液A（ReagentB）100毫升脱水液B（ReagentC）100毫升脱水液C（ReagentD）100毫升脱水液D（ReagentE）100毫升清理液（ReagentF）200毫升韦格液（ReagentG）100毫升祛色液（ReagentH）20毫升岑克液（ReagentI）100毫升范氏液（ReagentJ）10毫升比氏液（ReagentK）10毫升酸性液（ReagentL）10毫升染色液（ReagentM）10毫升修正液（ReagentN）10毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证6月用户自备小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器培养箱或烘箱：用于样品反应孵育微波炉：用于样品反应孵育处理中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析实验步骤脱蜡处理取出10片待测的5微米厚的石蜡包埋的组织切片放进80℃烘箱，孵育30分钟室温下静置15分钟按下表依次放进小染色缸里孵育染色缸孵育时间50毫升脱蜡液（ReagentA）15分钟50毫升脱蜡液（ReagentA）15分钟50毫升脱蜡液（ReagentA）15分钟50毫升脱水液A（ReagentB）3分钟50毫升脱水液B（ReagentC）3分钟50毫升脱水液C（ReagentD）3分钟50毫升脱水液D（ReagentE）3分钟小心移去切片上的脱水液D（ReagentE）小心加上200微升清理液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）样本染色处理操作一：标准染色小心加入1毫升韦格液（ReagentG）在切片上，铺满整个切片样品表面放进60℃恒温培养箱孵育60分钟小心移去韦格液（ReagentG）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升祛色液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟小心移去祛色液（ReagentH）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入1毫升岑克液（ReagentI）在切片上，铺满整个切片样品表面放进60℃恒温培养箱孵育60分钟小心移去岑克液（ReagentI）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升范氏液（ReagentJ）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育30分钟小心移去范氏液（ReagentJ）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升祛色液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟小心移去祛色液（ReagentH）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升比氏液（ReagentK）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）小心移去比氏液（ReagentK）小心加入200微升清理液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面小心移去切片上的清理液（ReagentF）重复实验步骤29至30二次小心加入200微升酸性液（ReagentL）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以孵育15分钟，增强染色效果）小心移去切片上的酸性液（ReagentL）小心加上200微升染色液（ReagentM）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟，避免光照（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）小心移去切片上的染色液（ReagentM）小心加上200微升修正液（ReagentN）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育2分钟小心移去切片上的修正液（ReagentN）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）（选择步骤）小心加上200微升脱水液B（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：如果比氏液（ReagentI）染色过深，建议使用由此步骤开始的选择步骤，并快速操作）（选择步骤）小心移去切片上的脱水液B（ReagentC）（选择步骤）小心加上200微升脱水液A（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面（选择步骤）小心移去切片上的脱水液A（ReagentB）（选择步骤）小心加上200微升脱蜡液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面（选择步骤）小心移去切片上的脱蜡液（ReagentA）放上盖玻片或封片（中性树脂）即刻在一般光学显微镜下观察：弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色操作二：热处理染色准备3个50毫升烧杯或小型染色缸，分别加入50毫升清理液（ReagentF）、韦格液（ReagentG）和岑克液（ReagentI）小心放进上述脱腊处理的切片到50毫升韦格液（ReagentG）小型染色缸里放进微波炉（600瓦）加热45秒小心移去切片上的韦格液（ReagentG）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升祛色液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟小心移去祛色液（ReagentH）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心将切片置入50毫升岑克液（ReagentI）小型染色缸里放进微波炉（600瓦）加热60秒小心移去岑克液（ReagentI）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升范氏液（ReagentJ）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育30分钟小心移去范氏液（ReagentJ）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升祛色液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟小心移去祛色液（ReagentH）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）小心加入200微升比氏液（ReagentK）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）小心移去比氏液（ReagentK）小心加入200微升清理液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面小心移去切片上的清理液（ReagentF）重复实验步骤30至31二次小心加入200微升酸性液（ReagentL）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育10分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）小心移去切片上的酸性液（ReagentL）小心加上200微升染色液（ReagentM）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育5分钟，避免光照（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）小心移去切片上的染色液（ReagentM）小心加上200微升修正液（ReagentN）在切片上，铺满整个切片样品表面室温下孵育1分钟小心移去切片上的修正液（ReagentN）室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentF）中孵育2分钟小心移去切片上的清理液（ReagentF）（选择步骤）小心加上200微升脱水液B（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：如果比氏液（ReagentI）染色过深，建议使用由此步骤开始的选择步骤，并快速操作）（选择步骤）小心移去切片上的脱水液B（ReagentC）（选择步骤）小心加上200微升脱水液A（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面（选择步骤）小心移去切片上的脱水液A（ReagentB）（选择步骤）小心加上200微升脱蜡液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面（选择步骤）小心移去切片上的脱蜡液（ReagentA）放上盖玻片或封片（中性树脂）即刻在一般光学显微镜下观察：弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色注意事项本产品为50次操作操作时，须戴手套试剂具有腐蚀性，注意操作安全建议使用玻璃染色缸每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面整个操作，在避光状态下进行染色完成后，即刻进行光学显微镜观察样品染色后保存，避免光照本公司提供系列特定组织染色试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定显色清晰