可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒产品说明书

文档简介可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂盒产品说明书主要用途可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释II）试剂是一种旨在使用化学稳定方法，使可溶性变性纯化蛋白重新折叠，恢复其蛋白功能和活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种可溶性纯化蛋白，尤其是细菌内重组蛋白（融合蛋白）以及盐酸胍或Sarkosyl可溶性处理的包涵体蛋白。可后续用于蛋白功能、酶活性等分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作便捷，复性效果理想。技术背景在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了Z有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denaturedprotein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（nativeprotein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redoxpotential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtrationchromatography）等，以达到蛋白复性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜碱（sulfobetaine）、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。产品内容稳定液（ReagentA）20毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品保存的容器恒温摇床：用于反应孵育实验步骤准备好可溶性纯化变性蛋白样品移取50微升蛋白样品（10毫克/毫升）到1.5毫升离心管加入950微升稳定液（ReagentA）放进20℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM（选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值即刻放进－70℃冰箱里保存注意事项本产品为20次操作操作时须戴手套本产品的复性效率达80％以上建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得Zda复性效率如果复性效率过低，建议使用可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒－HL30044.5如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定无蛋白酶污染