黄曲霉毒素B1的实验步骤

文档简介Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4黄曲霉毒素B1的实验步骤、自备物品微孔板酶标仪（含450nm）、振荡器、粉碎机、微量移液器、量筒、漏斗、容量瓶、快速定性滤纸、氯化钠（分析纯）、甲醇（分析纯）、去离子水或蒸馏水。样品处理取5g粉碎的有代表性的样品，加1.25g氯化捺及250mL70%甲醇溶液，QL振荡3min，用快速定性滤纸过滤。取50μL稀释液进行分析。根据需要可以增加样品量，但甲醇溶液的量也应相应增加。实验步骤1试剂盒平衡至室温。取所需数量的板条插入微孔架，记录样品及标准的位置。2加入50μL标准品或处理好的样品到微孔，每个标准和样品必须使用新的吸头。3加入50μL抗AFB1单克隆抗体使用液到每个微孔，37℃避光孵育90min。4甩掉空中液体，用洗液洗涤微孔板3min×3次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。5每孔加入酶标物100μL，37℃避光孵育60min。6用洗液洗涤微孔板3min×3次，Z后一次应在吸水纸上拍打已完全除去孔液体。7没空加入显色液100μL（2滴），37℃避光孵育10min。8每孔加入终止液50μL（1滴），立即用酶标仪在波长450nm处测定吸光度值（OD）值。测定1目测法：未加终止液前目测。比较样品孔与标准1的微孔颜色，若浅，则为阳性；若深，则为阴性；颜色接近则需用酶标仪测吸光度值比较。2仪器法：用酶标仪在450nm波长处测定吸光度值。