组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性定量试剂盒说明书

文档简介主要用途组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过对氧磷酶1反应系统中，水解有机磷酸，释放出对硝基苯产物，出现吸光峰值的变化，即采用光度法来测定组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体组织裂解悬液样品对氧磷酶1的有机磷酸酶活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景对氧磷酶（parapxonase；PON；EC3.1.8.1）是一种水解酯类（esters）、有机磷酸酯（organophosphate）和内酯（lactone）的多态性酶，分成三个亚型：PON1、PON2、PON3。结构同源性在基因层面上达70%，在氨基酸层面上达65%。其中PON1，为钙离子依赖性和高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein；HDL）相关性糖蛋白，含有354氨基酸，43Kd分子量，分布在肝脏、肾脏、小肠和血清（50毫克/升）中。具有有机磷酸酶（organophosphtase）、磷酸三酯酶（phosphotriesterase）、芳香酯酶（arylesterase）和硫内酯酶（thiolactonase）等多重活性：PON1与HDL结合，水解各种LDL和HDL上的氧化性磷酯，以及芳香族羧酸酯、芳香族和脂肪族内酯等，例如杀虫剂对硫磷（parathion）降解产物对氧磷（paraoxon）、毒死蜱（chlorpyriphos）、神经毒因子*（sarin）和*（soman）、同型半胱氨酸（homocysteine）硫内酯、二氢香豆素（dihydrocourmarin；DHC）、γ-丁内酯（γ-butyrolactone）等，延缓和YZ低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein；LDL）氧化作用，阻止脂质过氧化物产生，保护脂蛋白以及质膜受到氧化损伤，达到抗粥样硬化（antiatherogenic）、、抗氧化的功能。PON1活性降低与慢性肾衰、糖尿病、外周神经病变、家属性高胆固醇血症、心血管疾病、肝纤维化等有关。PON2为44Kd分子量，分布在脑、肝脏、肺、肾脏、睾丸等大多数组织中，但血清中测不到。PON2具有水解芳香酯和内酯酶的功能，但不能水解有机磷酸。具有细胞内抗氧化作用，预防粥样硬化等功能。PON3为40Kd分子量，主要分布在肝脏中，少量在肾脏中。主要水解各种内酯和环状羧酸酯，具有抗氧化功能。基于人工合成底物对硝基苯磷酸二乙酯（diethyl-p-nitrophenylphosphate），在对氧磷酶1的作用下，水解产生对硝基苯（p-nitrophenol）和磷酸二乙酯（diethylphosphate），通过对硝基苯产物吸收峰值的变化（405nm波长），来定量分析对氧磷酶1的有机磷酸酶活性。其反应系统为：