Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书

文档简介ProteinASepharose4FF产品使用说明书高IgG结合特异性高流速低蛋白A脱落产品特点特点结合特异性强，基团脱落少颗粒大小50-160μm基质4%的交联琼脂糖凝胶推荐流速50-300cm/h配基重组proteinA使用温度常温配基密度6mg重组蛋白A/mlpH范围3-10动态吸附载量60mg人IgG/ml保存温度+4~8℃蛋白A残留小于3ng蛋白A/mgIgG保存液体20%乙醇ProteinASepharose4FF，上海起福生物专业代理，联系电话：4006551678产品介绍ProteinAsepharose介质是经过我们公司长期开发，在公司生产的nativeproteinA的基础上精致而成。通过ProteinASepharose4FF，可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。本产品相对同类产品具有如下优势：1、偶联条件温和，更好的保持了proteinA的构象，所以抗体载量高，同体积的介质，相同规模的纯化设备，相同体积介质，抗体的产量明显高于用同类产品，大大的降低了抗体药物生产成本。2、非常稳定，不易脱落，用其生产的抗体中proteinA的残留比同类产品的更少。3、公司的ProteinA以及ProteinAsepharose的生产都是在清洁车间生产，符合制药企业生产需求。4、公司生产的ProteinAsepharose使用寿命长，常规条件下能够重复使用100次以上。使用说明（1）缓冲液的准备：平衡缓冲液：纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的，部分参照如下：抗体种类平衡缓冲液成分人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b10mM磷酸盐缓冲液，150mMNaCl，pH7.21人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG350mMTris-Cl，3MNaCl，pH7.8-8.5（2）样品的准备样品上柱前先用平衡缓冲液稀释5至10倍，从而确保样品液的成分和pH与平衡缓冲液相近。如果上样体积过大，可以采取调节上样液pH和盐浓度的方式，使样品的pH和电导与平衡液接近，使样品中的缓冲体系与平衡缓冲液相同。细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰，去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。样品在上柱前也需0.45μm微孔滤膜过滤。（3）操作步骤a）填料装柱后，用纯水流洗至少3个柱管体积，以冲掉乙醇，再用平衡缓冲液流洗至少5个柱管体积来平衡柱子。b）将样品上柱，上样流速控制在60cm/h。c）平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，把UV洗至基线。d）洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，立即用中和缓冲液中和到中性。e）再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于+4-8℃保存。操作中如果没有在线的蛋白监测系统，洗脱峰时可以分阶段收集，Z后根据测定结果合并活性部分。上海起福生物科技有限公司联系人：杨建辉400电话：4006551678办公电话：021-50724187传真：021-50724961*8006手机：15921799099企业QQ:4006551678网址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦东新区绣川路561号1102室