96T人脱氧核糖核酸酶ⅠELISA检测试剂盒

文档简介人脱氧核糖核酸酶ⅠELISA检测试剂盒　　　　　　　　　　　　本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：　　　　DNase-Ⅰ试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知DNase-Ⅰ浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将DNase-Ⅰ和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中DNase-Ⅰ的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人脱氧核糖核酸酶ⅠELISA检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人脱氧核糖核酸酶ⅠELISA检测试剂盒操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。人脱氧核糖核酸酶ⅠELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的DNase-Ⅰ标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的DNase-Ⅰ含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800nmol/L4、敏感度：1.0nmol/LApo-a1/ApoA1（ApolipoproteinA-1;APOA1protein）载脂蛋白A1抗体0.1mlApo-a1/ApoA1（ApolipoproteinA-1;APOA1protein）载脂蛋白A1抗体0.2mlPhospho-c-Kit（Tyr719）磷酸化原癌基因c-kit抗体0.1mlFASE（fattyacidsynthase,FASN）抗脂肪酸合成酶抗体0.2mlFASTkinase（Fas-activatedserine/threoninekinase）抗Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗体0.2mlFasLFasL抗体0.1mlFasLFasL抗体0.2mlFcγRⅡA/CD32a（lowaffinityimmunoglobu领ammaFcregionreceptorII-aisoform1）免疫球蛋白GFc段受体Ⅱ抗体0.2mlFBN1（fibrillin1）原纤维蛋白1抗体0.1mlFBN1（fibrillin1）原纤维蛋白1抗体0.2mlPhospho-CD19（Tyr531）磷酸化CD19抗体0.1mlPhospho-Bcr（Tyr177）磷酸化T淋巴细胞受体抗体0.1mlPhospho-cdc2（Thr14）磷酸化周期素依赖激酶2抗体0.1mlFDC-SP/ADC（Folliculardendriticcellsecretedprotein）滤泡树突细胞分泌蛋白抗体0.2mlFe65proteinFe65蛋白抗体0.1mlFe65proteinFe65蛋白抗体0.2mlFGF1/aFGF/ECGF-beta/HBGF-1肝素结合生长因子/酸性成纤维细胞生长因子抗体0.1mlFGF1/aFGF/ECGF-beta/HBGF-1肝素结合生长因子/酸性成纤维细胞生长因子抗体0.2mlPhospho-cdc2（Thr161）磷酸化周期素依赖激酶2抗体0.1mlPhospho-cdc2（Thr506）磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体0.1mlPhospho-cdc2（Ser76）磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体0.1mlFGF3/OncogeneINT2（FibroblastGrowthFactor3）纤维母细胞生长因子3抗体0.1mlFGF3/OncogeneINT2（FibroblastGrowthFactor3）纤维母细胞生长因子3抗体0.2ml