现货人表面活性蛋白AELISA 检测试剂盒

文档简介人表面活性蛋白AELISA检测试剂盒　　　　　　　　　　　　本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：SP-A试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知SP-A浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将SP-A和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中SP-A的浓度呈比例关系。备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。人表面活性蛋白AELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。人表面活性蛋白AELISA检测试剂盒局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与人其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的SP-A标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的SP-A含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-80ug/ml4、敏感度：0.1ug/ml人表面活性蛋白AELISA检测试剂盒DAF1117-0.3mlhumanIgA/FITC荧光素标记人IgA0.3mlDAF1118-0.3mlMonkeyIgG/FITC荧光素标记猴IgG0.3mlDAF1119-0.3mlMonkeyIgM/FITC荧光素标记猴IgM0.3mlDAF1120-0.3mlMouseIgG/FITC荧光素FITC标记小鼠IgG（细胞流式同型对照）0.3mlDA2719-0.2mlpre-Xprotein（CT）[HepatitisBvirusC-Terminus]抗乙肝病毒pre-X蛋白抗体（C端）0.2mlDA2720-0.2mlProfilin2前纤维蛋白2抗体0.2mlDA2721-0.2mlRecombProteinG抗重组蛋白G抗体0.2mlDA2722-0.2mlRecombProteinA抗重组蛋白A抗体0.2mlDA2723-0.2mlRAM-11RAM-11抗体0.2mlDA2724-0.2mlRAMP-1受体活性修饰蛋白1抗体0.2mlDA2725-0.2mlPRMT1（proteinargininemethyltransferase1）蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体0.2mlDA2726-0.2mlPRCP（prolylcarboxypeptidase）脯氨酰羧肽酶抗体0.2mlDAF1122-0.3mlpigIgG/FITC荧光素标记猪IgG0.3mlDAF1123-0.3mlpigIgM/FITC荧光素标记猪IgM0.3mlDAF1124-0.3mlMinkIgG/FITC荧光素标记水貂IgG0.3mlDAF1125-0.3mlRabbitIgG/FITC荧光素FITC标记兔IgG（细胞流式同型对照）0.3ml