小鼠ELISA试剂盒饭胶原酶I（Collagenase I）的说明书

文档简介小鼠ELISA试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的抗原抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中待测物质的浓度。试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。小鼠ELISA试剂盒操作步骤1）标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2）加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3）温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4）配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6）加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。