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96T人不对称二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒

研域(上海)化学试剂有限公司 2018-09-14
文档简介人不对称二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒          本试剂仅供研究使用标本:细胞上清液试验原理:    ADMA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ADMA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ADMA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ADMA的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人不对称二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人不对称二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人不对称二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的ADMA标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的ADMA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/LHAI-1(HepatocyteGrowthFactorActivatorInhibitor1)肝细胞生长因子激活物YZ因子抗体0.2mlHDAAg(HumanHepatitisBSurfaceAntigenPolyclonalAntibody)山羊抗人乙肝表面抗原抗体(包被0.1mlHBA1(hemoglobinalpha1)抗人血红蛋白α1抗体0.1mlHBA1(hemoglobinalpha1)抗人血红蛋白α1抗体0.2mlHDAAg(HumanHepatitisBSurfaceAntigenMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝表面抗原抗体(检测)0.1mlHBcAg(HumanHepatitisBcoreAntigen)小鼠抗人乙肝核心抗原抗体0.1mlHBcAg(HumanHepatitisBcoreAntigen)小鼠抗人乙肝核心抗原抗体0.2mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗体(1)0.1mlRabbitanti-pigIgG/RBITC罗丹明标记兔抗猪IgG0.3mlRabbitanti-PigIgM/RBITC罗丹明标记兔抗猪IgM0.3mlRabbitanti-DogIgG/RBITC罗丹明标记兔抗狗IgG0.3mlRabbitanti-RatIgG/RBITC罗丹明标记兔抗大鼠IgG0.3mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗体(1)0.2mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗体(1)1mgHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗体(2)0.1mlHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗体(2)0.2mlHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗体(2)1.0mlURGCP/URG4(Up-regulatorofcellproliferation)乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体0.2mlβ-HCG(Humanchorionicgonadotropinβ)抗人β亚基人绒毛膜促性腺激素抗体0.1mlβ-HCG(Humanchorionicgonadotropinβ)抗人β亚基人绒毛膜促性腺激素抗体0.2mlα-HCG(Humanchorionicgonadotropinα)抗人α亚基人绒毛膜促性腺激素抗体0.1ml血友病因子C域抗体0.2mlHBV/preS1/S2protein抗乙肝病毒preS1/乙肝病毒preS2抗体0.1mlHBV/preS1/S2protein抗乙肝病毒preS1/乙肝病毒preS2抗体0.2mlβ-HCG(HumanChorionicGonadotropinβ)mousemonoclonalantibody小鼠抗人β亚基人绒毛膜促性腺激素单抗0.2mlBRI3BP/HCCR-1(BRI3bindingprotein)人宫颈癌基因/bri3结合蛋白抗体0.1mlBRI3BP/HCCR-1(BRI3bindingprotein)人宫颈癌基因/bri3结合蛋白抗体0.2mlα-HCG(MouseHumanChorionicGonadotropinαMonoclonalAntibody)小鼠抗人α亚基人绒毛膜促性腺激素单抗0.2mlHck(hemopoieticcellkinase)造血细胞激酶抗体0.2mlRabbitanti-guineapigIgM/RBITC罗丹明标记兔抗豚鼠IgM0.3mlRabbitanti-bovIgG/RBITC罗丹明标记兔抗牛IgG0.3mlRabbitanti-bovIgM/RBITC罗丹明标记兔抗牛IgM0.3mlRabbitanti-chiIgM/RBITC罗丹明标记兔抗鸡IgM0.3mlHCFHrp/BTA(Bladdertumorantigen)human膀胱肿瘤抗原抗体0.2mlHCN4(HyperpolarizationactivatedCyclicNucleotide-gatedchannel4)环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型40.2mlHCV-Core丙型肝炎病毒-C区抗体0.1mlHCV-HCBP1/ACY-3(HepatitisCviruscore-bindingprotein1)丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白-1抗体0.2mlHCV-NS1丙型肝炎病毒-NS1抗体0.1mlHCV-NS1丙型肝炎病毒-NS1抗体0.2ml
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