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【THUNDER小课堂】D2多巴胺受体在神经元中的表达

徕卡显微系统(上海)贸易有限公司 2023-07-17 14:27:23 118  浏览
  • 小鼠大脑黑质的快速、高对比度成像


    本文讨论如何通过使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay比传统宽场显微镜更加清晰地观察小鼠脑黑质中的D2多巴胺受体(D2R)。研究人员还可以使用THUNDER Imager优化脑样本的抗体染色。D2R是一种突触后受体,可在纹状体中高度表达。D2R激活会导致与细胞分化、生长、代谢等相关的信号通路。D2R在多巴胺能神经传递和运动控制中也发挥着重要的作用。这种类型的神经科学研究旨在更好地理解基因表达如何调控帕金森病、肌张力障碍、舞蹈症和精神错乱等疾病。

    简  介  

    D2多巴胺受体(D2R)是一种突触后受体,其在纹状体中高度表达,D2R激活会导致与细胞分化、生长、代谢及凋亡等相关的信号通路。D2R在多巴胺能神经传递和运动控制中也发挥着重要的作用。神经科学研究的目的是全方位了解基因表达的改变如何调控帕金森病、肌张力障碍、舞蹈症、嗜睡症、强迫症、精神错乱和情绪不稳定等疾病引发的认知功能障碍。本研究对小鼠脑部黑质区[3]神经元[1,2]中的D2多巴胺受体表达水平进行了检测。使用传统的荧光宽视场成像时,图像结果可能非常模糊,因此,通常会使用共聚焦显微镜来代替[4]。研究结果显示,与传统宽场显微镜相比,通过使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay能更加清晰地观察到小鼠脑黑质致密区的D2多巴胺受体(D2R)


    挑 战  

    在这种神经科学研究中,能够快速筛查脑部样本的成像解决方案会非常有用。高质量的图像对于清晰解析被染色的多巴胺受体也必不可少。较厚的样本需要以良好的对比度对其内部深处进行成像。宽视场显微镜成像快速,并具有较高的检测灵敏度,但由于非焦平面的信号干扰,通常会在厚样本上观察到模糊信号,从而显著降低图像的对比度[5,6]。


    方 法  

    本研究中使用了小鼠大脑黑质区样本,对其进行免疫染色,以显示D2多巴胺受体(D2R)(红色)、神经元(TH抗体,绿色)和细胞核(DAPI,蓝色)。使用倒置的复合显微镜平台THUNDER Imager 3D Assay对脑样本进行了成像,并应用了即刻成像解析(ICC)。


    结 果  

    在本研究中,ICC后的THUNDER图像(见图1)中实时显示了小鼠脑样本深处的清晰细节,且无任何离焦模糊。


    图1:显示D2R(红色)、CA神经元(绿色)和细胞核(蓝色)的小鼠脑部图像。

    A) 原始宽场数据和 B) 应用ICC后的数据。

    图片来源:Qi Wang博士,美国德克萨斯州休斯顿贝勒医学院。


    结 论

    与传统的宽场成像结果相比,THUNDER图像可以更清晰地显示被染色受体在脑部的位置。



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【THUNDER小课堂】D2多巴胺受体在神经元中的表达

小鼠大脑黑质的快速、高对比度成像


本文讨论如何通过使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay比传统宽场显微镜更加清晰地观察小鼠脑黑质中的D2多巴胺受体(D2R)。研究人员还可以使用THUNDER Imager优化脑样本的抗体染色。D2R是一种突触后受体,可在纹状体中高度表达。D2R激活会导致与细胞分化、生长、代谢等相关的信号通路。D2R在多巴胺能神经传递和运动控制中也发挥着重要的作用。这种类型的神经科学研究旨在更好地理解基因表达如何调控帕金森病、肌张力障碍、舞蹈症和精神错乱等疾病。

简  介  

D2多巴胺受体(D2R)是一种突触后受体,其在纹状体中高度表达,D2R激活会导致与细胞分化、生长、代谢及凋亡等相关的信号通路。D2R在多巴胺能神经传递和运动控制中也发挥着重要的作用。神经科学研究的目的是全方位了解基因表达的改变如何调控帕金森病、肌张力障碍、舞蹈症、嗜睡症、强迫症、精神错乱和情绪不稳定等疾病引发的认知功能障碍。本研究对小鼠脑部黑质区[3]神经元[1,2]中的D2多巴胺受体表达水平进行了检测。使用传统的荧光宽视场成像时,图像结果可能非常模糊,因此,通常会使用共聚焦显微镜来代替[4]。研究结果显示,与传统宽场显微镜相比,通过使用Instant Computational Clearing(ICC)的THUNDER Imager 3D Assay能更加清晰地观察到小鼠脑黑质致密区的D2多巴胺受体(D2R)


挑 战  

在这种神经科学研究中,能够快速筛查脑部样本的成像解决方案会非常有用。高质量的图像对于清晰解析被染色的多巴胺受体也必不可少。较厚的样本需要以良好的对比度对其内部深处进行成像。宽视场显微镜成像快速,并具有较高的检测灵敏度,但由于非焦平面的信号干扰,通常会在厚样本上观察到模糊信号,从而显著降低图像的对比度[5,6]。


方 法  

本研究中使用了小鼠大脑黑质区样本,对其进行免疫染色,以显示D2多巴胺受体(D2R)(红色)、神经元(TH抗体,绿色)和细胞核(DAPI,蓝色)。使用倒置的复合显微镜平台THUNDER Imager 3D Assay对脑样本进行了成像,并应用了即刻成像解析(ICC)。


结 果  

在本研究中,ICC后的THUNDER图像(见图1)中实时显示了小鼠脑样本深处的清晰细节,且无任何离焦模糊。


图1:显示D2R(红色)、CA神经元(绿色)和细胞核(蓝色)的小鼠脑部图像。

A) 原始宽场数据和 B) 应用ICC后的数据。

图片来源:Qi Wang博士,美国德克萨斯州休斯顿贝勒医学院。


结 论

与传统的宽场成像结果相比,THUNDER图像可以更清晰地显示被染色受体在脑部的位置。



2023-07-17 14:27:23 118 0
【THUNDER小课堂】脑神经发育

整个小鼠胚胎的图像:(左)原始宽场成像结果和(右)应用Large Volume Computational Clearing(LVCC)后的成像结果。图片来源:A. Popratiloff和Z. Motahari,美国乔治·华盛顿大学。


本文介绍了如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing(LVCC)对小鼠胚胎快速、高对比度成像,实现了对轴突生长和脑神经发育的研究。许多在发育早期阶段损害神经回路发育的遗传性疾病被认为会对行为造成干扰。用小鼠模型研究早期神经发育的细胞变化、定义与人类疾病相似的行为及潜在发育机制,是非常困难的。而鉴别发育的神经元回路中三叉神经(其参与面部感觉和运动机能)轴突生长的早期分化,使得这些困难迎刃而解。


人们普遍认为,很多遗传性疾病都通过损害神经回路发育的早期阶段来对行为产生干扰[1]。事实证明,在模型动物中分辨早期神经发育中细胞的此类变化具有一定的难度。用与人类遗传性疾病中临床显著缺陷相似的基因突变小鼠模型来定义行为、神经回路和潜在发育机制,是非常困难的[1]。检测单个神经元初始分化中的变化难以实现。这些挑战可通过确定发育的神经回路中三叉神经这一关键组分的轴突生长的早期分化来解决[1]。通过着眼于参与面部感觉及运动机能如哺乳、进食、咬、咀嚼和吞咽等的三叉神经(脑神经V),以及轴突生长和原生传导通路,可以对使用组织学处理可能会缺失的三维环境进行研究[1]。本文介绍如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing(LVCC)[2,3]对小鼠胚胎快速、高对比度成像,以帮助进行脑神经发育研究。


如要以实用高效的方式对整个小鼠胚胎成像,快速、清晰的高对比度3D成像解决方案,对于重要细节展示和解析大有益处。相较于激光共聚焦成像,可在很短的时间内一次性采集到完整胚胎的成像结果。传统宽场显微成像速度快,检测灵敏度高,但是对厚标本的成像,如小鼠胚胎,通常会由于非焦平面信号的影响,呈现模糊的成像结果,降低图像对比度[2,3]。


使用THUNDER Imager 3D Cell Culture对小鼠胚胎成像。使用抗βIII微管蛋白(Tuj1)抗体对胚胎的神经系统和脑神经进行染色。结合BABB透明化处理,即可对整个胚胎中的神经系统进行三维结构成像。图1中的图像使用数值孔径(NA)0.75、工作距离700μm的20x多浸液物镜采集。该图像由32个视野拼接组成,成像深度为672 μm(337层切),采集了完整的胚胎结构。数据采集总时长为18分钟。


通过LVCC和Instant Computational Clearing(ICC)将宽场成像固有的非焦面模糊信号清除[2,3]。之后,再使用徕卡自适应式反卷积技术来增强三维特征结构的分辨率[4]。这种成像模式便于观察胚胎的神经结构以及胚胎的整体布局中更有价值的神经元定位

图1:展示整个小鼠胚胎的俯视图,显示原始数据(A)与应用LVCC后(B)的差异。根据相对物镜深度进行颜色标识的胚胎的角度视图,其中zui大深度为672 μm。C)应用LVCC后的脑部侧视图,显示了沿Z轴方向的精密细节。图片来源:Anastas Popratiloff博士和Zahra Motahari博士,乔治·华盛顿大学纳米制造与成像中心(GWNIC),美国华盛顿特区。

结论

与传统的宽场成像不同,THUNDER技术Large Volume Computational Clearing(LVCC)[2,3]在对小鼠胚胎中的脑神经发育成像时,显著增强了图像对比度,对精密细节有更好的解析。


References:

1.Z. Motahari, T.M. Maynard, A. Popratiloff, S.A. Moody, A.-S. LaMantia, Aberrant early growth of individual trigeminal sensory and motor axons in a series of mouse genetic models of 22q11.2 deletion syndrome, Human Molecular Genetics (2020) vol. 29, iss. 18, pp. 3081-3093, DOI: 10.1093/hmg/ddaa199.

2.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.

3.L. Felts, V. Kohli, J.M. Marr, J. Schumacher, O. Schlicker, An Introduction to Computational Clearing: A New Method to Remove Out-of-Focus Blur, Science Lab (2020) Leica Microsystems.

4.V. Kohli, J.M. Marr, O. Schlicker, L. Felts, The Power of Pairing Adaptive Deconvolution with Computational Clearing: Technical Brief, Science Lab (2021) Leica Microsystems. 


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THUNDER Imager 3D Live Cell 和 3D Cell Culture


2023-04-04 15:58:48 178 0
Current Biology:纹状体多巴胺D1受体神经元能够促进睡眠觉醒

文章概述

帕金森病(Parkinson’s disease, PD)患者伴随有严重的睡眠障碍,包括嗜睡、失眠、快速眼动(Rapid Eye Movement, REM)睡眠行为障碍,有超过50%的PD患者受到嗜睡的影响,但是其机制目前并不明确。2022年1月11日,复旦大学脑科学研究院黄志力和曲卫敏教授团队在《Current Biology》上发表题“Striatal neurons expressing dopamine D1 receptor promote wakefulness in mice”的文章,该研究证实了背侧纹状体多巴胺能神经元(Dopamine D1 Receptor, D1R)在睡眠行为中的作用,揭示了其调控觉醒的神经环路机制,为帕金森病伴发睡眠障碍的治疗提供新策略。


核心观点

1、纹状体 D1R 神经元在觉醒期高度活跃,在非快速眼动(Non-Rapid Eye Movement, NREM)睡眠期安静;

2、纹状体D1R神经元的活动与前额叶皮层(Prefrontal Cortex, PFC)和背内侧丘脑(Mediodorsal Thalamus, MD)神经元高度同步;

3、纹状体D1R神经元通过下游的苍白球内侧部 (Entopeduncular Nucleus, EP)和黑质网状部(Substantia Nigra pars reticulata, SNr)神经元控制觉醒。


研究结果分析

1.激活纹状体D1R神经元能够诱导小鼠从NREM睡眠到清醒状态的瞬时转变

为了研究纹状体D1R神经元对睡眠状态的控制作用,研究者用到了D1-ChR2-YFP小鼠,用于进行光遗传刺激,同时结合在体脑电肌电记录睡眠-觉醒状态。在小鼠NREM睡眠期间,光遗传激活D1R神经元的可诱导小鼠立即从NREM睡眠过渡到清醒状态(皮质Delta波活动和肌肉张力的出现快速变化)。光刺激纹状体D1R神经元降低脑电Delta波功率,增加肌电均方根值(Root Mean Square, RMS)。在激发后60 s内,从NREM睡眠到觉醒的概率迅速增加;从NREM睡眠到觉醒的潜伏期呈现刺激频率依赖性的缩短。D1-ChR2-YFP小鼠在1、5、10、20或30 Hz持续10 s的光刺激下,从NREM睡眠到觉醒的潜伏期分别比对照组小鼠缩短20.3%、37.7%、64.2%、79.4%和84.9%。值得注意的是,大脑状态的反应对NREM睡眠具有选择性,在REM睡眠中激活纹状体D1R神经元对大脑状态没有影响。综上所述,激活纹状体D1R神经元可诱导小鼠从NREM睡眠立即过渡到清醒状态。


2. 纹状体D1R神经元在自发清醒和对外界刺激反应时活跃

为了评估自由移动小鼠在自发睡眠-觉醒状态下纹状体D1R神经元的群体活动,研究者利用光纤记录系统记录了纹状体D1R神经元的钙信号,利用脑电肌电记录系统分析小鼠的睡眠-觉醒状态。纹状体D1R神经元钙信号在小鼠清醒时比REM或NREM时更强。值得注意的是,纹状体D1R神经元在NREM到觉醒过渡之前活动开始增加,而在觉醒到NREM过渡之前活动减少。相比之下,纹状体D1R神经元在从NREM睡眠到REM睡眠或从REM睡眠到觉醒期间的钙活动没有显著差异。这些研究结果表明,纹状体D1R神经元在从NREM睡眠到清醒的过渡期间活动增加,并且在自发清醒时最活跃。

为了研究纹状体D1R神经元对外界刺激的反应动态,研究者记录了不同显著性刺激下小鼠纹状体D1R神经元的钙信号。在NREM睡眠或清醒状态时,给予70 db、24 khz、持续5 s的声音刺激。在NREM睡眠期间,给予声音刺激,纹状体D1R神经元的活动立即增加,小鼠立即从NREM睡眠转到清醒。在清醒时,给予声音刺激会进一步增加纹状体D1R神经元的活动。其它刺激,比如足底电击、吹气等也会导致纹状体D1R神经元活性增加。这些结果表明,纹状体D1R神经元不仅在自发清醒时被激活,而且在唤醒刺激时也会被激活。



3. 纹状体D1R神经元与PFC和MD神经元在自发睡眠-觉醒周期中的活动高度同步,并受到它们的调节

背侧纹状体接受来自黑质下致密部(Substantia Nigra pars compacta, SNc)的多巴胺能神经传入,以及大脑皮层和丘脑的谷氨酸能神经传入,但是GABA能的神经传入很少被记录。研究者随后探讨了对背侧纹状体有神经投射的区域是否也与参与了睡眠-觉醒的转换。利用光纤记录系统,研究者记录了小鼠SNc、PFC、和MD在大脑不同状态时的钙活动。与纹状体D1R神经元活动相似,PFC和MD神经元在清醒时比NREM睡眠时表现出更高的钙信号。PFC/MD中谷氨酸能神经元和SNc中多巴胺能神经元在NREM睡眠到觉醒过渡后活动增加,在觉醒到NREM睡眠过渡后活动降低。

为了明确地靶向支配背侧纹状体的神经元,研究者采用病毒逆行示踪方法来标记这些对背侧纹状体发出投射的神经元。这些投射到纹状体的皮层和丘脑神经元在NREM睡眠到觉醒过渡期间活动增加,而在觉醒到NREM睡眠的过渡期间活动则减少。并且这些特异性的PFC-纹状体或MD-纹状体投射神经元的活动比PFC或MD神经元活动下降的更快。PFC和MD神经元存在许多细胞类型,并支配许多下游核团。这些活动下降率的差异可能归因投射到纹状体的神经元只是PFC和MD神经元的一个亚型。此外,在睡眠或清醒时给予听觉刺激、足底电击或者吹气刺激,PFC和MD神经元的活动也会增强。这些结果表明,纹状体D1R神经元的活动受到来自PFC和MD兴奋性传入的影响。



为了进一步澄清它们之间的联系,研究者采用多通道光纤记录法同时记录PFC、MD和纹状体D1R神经元的群体钙活动。结果显示纹状体D1R神经元、PFC神经元和MD神经元的活动在清醒时同时增加,在NREM睡眠时同时减少。Pearson相关性分析表明,这些脑区神经活动高度同步。PFC-纹状体投射神经元、MD-纹状体投射神经元和纹状体D1R神经元在NREM睡眠到觉醒过渡期间活动增加,并在觉醒到NREM睡眠过渡期间活动降低。

此外,为了进一步确定纹状体D1R神经元的活动是否与其上游同步,研究者采用了双色多通道光纤记录,同时将不同激发波长的钙荧光探针分别注射到纹状体或者PFC/MD。与单色多通道光纤记录结果一致,纹状体D1R神经元的钙信号和PFC神经元和MD神经元的钙信号在清醒时均增加,在NREM睡眠时均降低。相关性分析表明,这些脑区间的神经活动高度同步。为了研究PFC和MD神经元抑制后对大脑状态和纹状体D1R神经元活动的影响,研究者采用了化学遗传学抑制PFC或MD的神经元的活动,并利用光纤记录系统记录纹状体D1R神经元的活动。结果显示,抑制PFC神经元的活性导致觉醒减少以及NREM睡眠增加,同时,纹状体D1R神经元钙信号的峰值和频率降低;抑制MD神经元活性清醒时间显著降低,纹状体D1R神经元钙信号的峰值和频率也显著降低。这些研究结果表明,纹状体D1R神经元、PFC神经元和MD神经元的钙离子活动与睡眠和觉醒过程中的波动高度同步,且纹状体D1R神经活动受PFC和MD神经传入的调节。



4. 激活皮质-纹状体、丘脑-纹状体和黑质-纹状体的神经投射均能诱发觉醒

为了研究PFC、MD和SNc对的背侧纹状体神经传入各自在清醒转变中的贡献。研究者利用光遗传技术分别激活PFC、MD和SNc神经元在背侧纹状体的末梢。对末梢进行激活均降低了脑电波Delta功率,并增加了肌电强度和清醒的概率。激活背侧纹状体中PFC或MD神经元末梢导致小鼠从NREM睡眠到觉醒的过渡潜伏期缩短,且呈刺激频率依赖性。在1、5、10、20和30 Hz的光刺激下,激活纹状体中PFC神经元末梢小鼠从NREM睡眠到觉醒的潜伏期分别缩短了32%、55%、88%、90%和98%。在1、5、10、20和30 Hz的光刺激下,激活纹状体中MD神经元末梢小鼠从NREM睡眠到觉醒的潜伏期分别缩短了16.8%、33.3%、78.7%、80.4%和66.7%。激活纹状体中SNc神经元末梢小鼠从NREM睡眠到觉醒转变的潜伏期减少,但是没有刺激频率依赖性。接下来,研究者分析了每个投射的唤醒促进效果。皮质-纹状体投射的唤醒促进作用最 强,黑质-纹状体投射的唤醒促进作用最弱。总之,激活皮质-纹状体、丘脑-纹状体或黑质-纹状体的投射足以引起觉醒。




5. 纹状体D1R神经元通过下游的EP和SNr区域控制觉醒

为了阐明纹状体D1R神经元下游脑区在调控觉醒的作用,研究者在纹状体中条件性表达了光通道蛋白ChR2,并在纹状体的下游区域E P或SNr分别埋入光纤。在NREM睡眠期间,激活EP或SNr中纹状体末梢导致脑电波Delta功率降低,肌电张力增加。激活纹状体-EP投射或纹状体-SNr投射均会增加了觉醒的概率,并降低了NREM睡眠到觉醒的潜伏期。这些结果表明,光遗传激活源自纹状体D1R神经元的纹状体-EP投射或纹状体-SNr投射均能引起觉醒的。




6. 抑制纹状体D1R神经元可减少觉醒

最后,研究者利用化学遗传学的方法来抑制纹状体D1R神经元活性,来检测它们对睡眠-觉醒状态的控制作用。在小鼠活动期抑制纹状体D1R神经元活性,NREM睡眠在给药后3小时内显著增加(66.1%),清醒时间显著减少(28.9%)。这些结果表明,纹状体D1R神经元的抑制增加了NREM睡眠,并减少了觉醒。


总结

本研究作者发现纹状体D1R神经元的激活可诱导NREM睡眠向清醒状态的瞬间转换,且纹状体D1R神经元在清醒状态下更加活跃。纹状体D1R神经元的活动与投射到纹状体的皮质或丘脑神经元的活动是同步的。激活皮质-纹状体、丘脑-纹状体、黑质-纹状体,或者纹状体-EP、纹状体-SNr的神经投射,会让动物立即从NREM睡眠向觉醒的状态转变。纹状体D1R神经元的上下游构成了一个控制觉醒的上下回路。该研究的结果揭示了一个通过纹状体D1R神经元调节觉醒的神经环路,为疾病相关的睡眠障碍治疗提供了新策略。


亮点研究方法

这项工作利用了光遗传学、光纤记录以及在体脑电肌电记录等技术揭示了纹状体D1R神经元调节觉醒的神经环路。瑞沃德神经科学研究解决方案提供贯穿动物疾病模型构建、检测和评估、调控机制研究的全流程产品和服务,覆盖该研究中涉及的光遗传学、光纤记录、在体脑电肌电记录、免疫组化等所有研究工作。在该项研究工作中,瑞沃德提供了用于病毒注射和颅脑手术的脑立体定位系统,确保相关实验操作能够精确完成。截止目前,瑞沃德产品及服务覆盖海内外 100 多个国家和地区,客户涵盖全 球700+医院,1000+科研院所,6000+高等院校,已助力全 球科研人员发表SCI文章12000+,在行业内得到广泛认可。


2022-05-07 14:47:26 243 0
【THUNDER小课堂】肿瘤细胞中有丝分裂纺锤体的成像

本文展示了如何使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing(LVCC)实现尤文(尤因)肉瘤细胞中有丝分裂纺锤体的更多细节观察,从而协助本研究的进行。活细胞成像等技术在了解肿瘤进展和转移研究中至关重要。真核细胞中的有丝分裂纺锤体由中空的微管组成。它在有丝分裂期间的细胞内重复染色体分离和分裂细胞细胞骨架结构的构建过程中发挥着重要的作用。在尤文肉瘤这一类的肿瘤细胞中,有丝分裂障碍的触发因子可通过检查有丝分裂纺锤体的机能障碍来得以确认。


简介

使用荧光显微镜可以研究肿瘤形成和进展过程中组织及细胞内部发生的变化。像活细胞成像这样的技术对更加深入地了解肿瘤进展和转移是至关重要的。

在真核细胞中,由中空微管组成的有丝分裂纺锤体,有助于构建复制细胞的细胞骨架结构,并在有丝分裂过程中将复制的染色体从原始细胞中分离出来。在尤文肉瘤这一类的肿瘤细胞中,有丝分裂障碍的触发因子可通过检查有丝分裂纺锤体的机能障碍来得以确认[1]。

肉瘤是肌肉或骨骼等结缔组织中形成的一类肿瘤。尤文肉瘤和横纹肌肉瘤,分别生长于骨骼和肌肉中,是一种倾向于发生在骨骼生长活跃区域附近的儿科肿瘤。除了手术和化疗之外,电离辐射也被用于治疗这类肿瘤,但这可能会导致生长中的骨骼受到永jiu性损伤,包括不对称生长停滞、胫骨畸形及骨折概率增加等。骨骼损伤的严重度在很大程度上与骨骼接受的辐射剂量成正比。因此,我们有理由认为,选择性放射致敏肿瘤组织的策略可降低实现局部控制所需的辐射剂量,并能最大限度降低对邻近健康组织造成的间接损伤

运用体外研究和小鼠异种移植模型系统,对使用mRNA合成抑zhi剂光神霉素A预处理,可以通过改变辐射损伤的转录反应实现选择性放射致敏EWS:Fli1+肿瘤细胞的假设进行了验证[2]。结果表明,光神霉素A可以通过抑zhi参与DNA损伤修复相关基因的转录,使EWS:Fli1+细胞在体内外显著放射增敏,导致肿瘤细胞程序性死亡[2]。

使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing(LVCC)可以揭示肉瘤细胞中有丝分裂纺锤体的更多细节,协助癌症研究人员获得更有用的见解。


挑战

在有丝分裂纺锤体成像中,可对其实现快速成像,并获得清晰的高对比度3D成像以清晰展示重要细节的解决方案最为实用。传统的宽场显微成像速度快,检测灵敏度高,但不幸的是对于厚样本的成像通常会出现失焦不清晰或模糊的情况,这会降低对比度[3]。要阐明有丝分裂的不稳定性在癌症等复杂疾病中的作用,这需要在同一样本中进行多个关联生物学标记


方法

该研究中使用了尤文肉瘤细胞(SK-ES-1)。对这些细胞进行α-微管蛋白(Clone YL1/2 Thermo-Fisher Scientific # MA1-80017,按1:500比例稀释/ Dylight 488偶联驴抗大鼠 Thermo-Fisher Scientific #SA5-10026)、γ-微管蛋白(Clone TU-30,AbCam # ab27074,按1:200比例稀释/Dylight 550偶联驴抗小鼠 Thermo-Fisher Scientific # SA5-10167)和DNA(Hoechst 33342蓝)进行染色。染色后,使用介质ProLong Glass Antifade(Thermo-Fisher Scientific #P36981)进行盖玻片封片,并通过使用63×/1.4 NA(数值孔径)的油镜进行THUNDER Imager Tissue成像。图像采集使用大体积成像解析(LVCC)[3]模式,并生成最大化投影图像数据


结果

在有丝分裂过程中,α-微管蛋白(绿色)形成有丝分裂纺锤体,染色单体(蓝色)会附着在有丝分裂纺锤体上,而γ-微管蛋白(红色)集中定位在分裂细胞中的纺锤极上。通过THUNDER技术可观察到肉瘤细胞中有丝分裂纺锤体的更多细节。清晰的图像可以展示清晰的结构,以便进行分割和进一步的分析。

图1:尤文肉瘤细胞SK-ES-1 α-微管蛋白(绿色)、γ-微管蛋白(红色)和DNA(蓝色)染色后的最大化投影:原始图像数据(左)和THUNDER LVCC模式成像数据(右)。


 结 论 

THUNDER Large Volume Computational Clearing(LVCC)[3]进行尤文肉瘤细胞中的有丝分裂纺锤体成像时可显著增强对比度。与传统的宽场成像相比,其可展示细胞中有丝分裂纺锤体的更多细节

References:

1.S. Rello-Varona, D. Herrero-Martín, L. Lagares-Tena, R. López-Alemany, N. Mulet-Margalef, J. Huertas-Martínez, S. Garcia-Monclús, X. García del Muro, C. Muñoz-Pinedo, O. Martínez Tirado, The importance of being dead: cell death mechanisms assessment in anti-sarcoma therapy, Frontiers in Oncology (2015) vol. 5, p. 82, DOI: 10.3389/fonc.2015.00082.

2.M. Yun Lin, T.A. Damron, M.E. Oest, J.A. Horton, Mithramycin A Radiosensitizes EWS:Fli1+ Ewing Sarcoma Cells by Inhibiting Double Strand Break Repair, Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. (2021) vol. 109, iss. 5, pp. 1454-1471, DOI: 10.1016/j.ijrobp.2020.12.010.

3.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note : THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.


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THUNDER Imager Tissue全景组织显微成像系统



2023-03-20 14:23:30 155 0
【THUNDER小课堂】自噬与老年病

秀丽隐杆线虫中自噬过程的高对比度成像

通过使用Small Volume Computational Clearing(SVCC)的THUNDER Imager Model Organism机型对模型生物秀丽隐杆线虫(一种线虫)进行高对比度成像,可帮助更深入地理解自噬与老年病之间的关联。自噬是一个自然的过程,细胞通过这个过程来自我毁灭,以产生能量并维持细胞活性。感染或癌症等疾病引发的应激通常会触发以病原体或癌细胞为目标的自噬。自噬与年龄相关的神经退行性疾病之间的关系尚不清楚,对这种关系的深入理解可能有助于维持长期健康。使用高对比度THUNDER成像进行的秀丽隐杆线虫自噬机制研究可能有助于将其推向临床应用,从而实现这一目标。


引言

自噬是一种受调节的自我吞噬过程,其能帮助细胞维持稳态并重新获得能量[1,2]。在基础状态下,自噬可用于长寿命蛋白的降解等,但它主要是在应激反应中被诱发。在感染这样的应激状态下,其会靶向病原体,以进行溶酶体降解。在癌细胞引发的代谢应激中,自噬为细胞活性提供ATP,保持细胞活力。癌细胞会诱导自噬,使细胞吃掉自己,从而保护其免于细胞死亡。自噬的特征是形成自噬体,并涉及多个步骤:开始、成核、延伸、成熟和降解。虽然自噬与健康有关,但自噬与老年病(如神经退行性疾病)之间的关系仍不清楚[2]。如果能更好地理解这种关系,就可能会开发出能促进长期健康的临床应用。

线虫秀丽隐杆线虫是一种经过充分研究的模型生物,使得我们可以在整体生物中研究自噬和年龄相关的病理机制[3,4]。

本文介绍如何使用THUNDER Imager对自噬和老年病进行详细的研究


挑战

对秀丽隐杆线虫成像时,快速获得锐利的高对比度3D成像,清晰展示重要细节的解决方案最为实用。常规的宽场显微成像速度快,检测灵敏度高,但是对厚标本的成像,如整个生物体,通常会出现离焦信号模糊导致的对比度降低[5]。


方法

本研究中使用表达MAH215 [6]、GFP和mCherry的秀丽隐杆线虫。MAH215是一种双色荧光mCherry:GFP:LGG-1蛋白,其可对自噬体和自噬溶酶体进行可视化,以监测自噬流。GFP(绿色)表示自噬体,而mCherry(红色)表示自噬溶酶体,后者可在酸性环境中淬灭GFP,从而导致发射mCherry信号。使用THUNDER Imager Model Organism对线虫进行成像应用Small volume computational clearing(SVCC)处理图像[5],然后生成zui大强度投影。


结果

与传统的宽场显微镜相比,THUNDER Imager Model Organism能够清除非焦面信号,对秀丽隐杆线虫进行清晰的立体与宏观成像[5]。这样,就可以更加详细地研究细胞过程并对其定量。

图1:秀丽隐杆线虫的宏观扩展景深图像:原始宽场数据(左)和应用SVCC后的THUNDER数据(右)。MAH215:自噬流,GFP(绿色):自噬体,mCherry(红色):自噬溶酶体。

图片来源:Aditi U. Gurkar博士,美国匹兹堡大学医学系。


结 论

与传统的宽场成像相比,THUNDER的Small volume computational clearing(SVCC)技术[5]在对秀丽隐杆线虫成像时会显著增强对比度,从而解析高度细节化和更加清晰的立体图像。THUNDER技术具备的zhuo越成像功能有助于对自噬和老年病之间的关系进行更深入的理解


References:(上下滑动查看更多)

1.A.U. Gurkar, K. Chu, L. Raj, R. Bouley, S.-H. Lee, Y.-B. Kim, S.E. Dunn, A. Mandinova, S.W. Lee, Identification of ROCK1 kinase as a critical regulator of Beclin1-mediated autophagy during metabolic stress, Nature Communications (2013) vol. 4, iss. 1, 2189, DOI: 10.1038/ncomms3189.

2.Y. Aman, T. Schmauck-Medina, M. Hansen, R.I. Morimoto, A.K. Simon, I. Bjedov, K. Palikaras, A. Simonsen, T. Johansen, N. Tavernarakis, D.C. Rubinsztein, L. Partridge, G. Kroemer, J. Labbadia, E.F. Fang, Autophagy in healthy aging and disease. Nature Aging (2021) vol. 1, pp. 634–650, DOI: 10.1038/s43587-021-00098-4.

3.L. Marchal, S. Hamsanathan, R. Karthikappallil, S. Han, H. Shinglot, A.U. Gurkar, Analysis of representative mutants for key DNA repair pathways on healthspan in Caenorhabditis elegans, Mechanisms of Ageing and Development (2021) vol. 200, 111573, DOI: 10.1016/j.mad.2021.111573.

4.A.U. Gurkar, M.S. Gill, L.J. Niedernhofer, Genome Stability and Ageing, In A. Olsen, M. Gill, Eds. Ageing: Lessons from C. elegans. Healthy Ageing and Longevity (Springer, Cham., 2017) DOI: 10.1007/978-3-319-44703-2_11.

5.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems. 

6.J.T. Chang, C. Kumsta, A.B. Hellman, L.M. Adams, M. Hansen, Spatiotemporal regulation of autophagy during Caenorhabditis elegans aging, eLife (2017) vol. 6, e18459, DOI: 10.7554/eLife.18459.


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2023-03-07 11:55:46 108 0
LCS小课堂之液体闪烁计数中的统计学

我们在使用液体闪烁计数系统的核计数中采用统计学方法,因为放射性核素衰变的本质是其可在任一时间释放β粒子(随机衰变)。虽然我们不能确定核衰变会在什么时候发生,但我们可使用统计学方法描述一个样品中所有核衰变的平均行为。为了应对放射性核素的随机衰变行为,我们采用了计数统计方法。统计可用来表示在某一限定的置信区间内得到给定计数的概率,一般使用 %2σ(%2s标准偏差)来表示。

下面我们可通过对单一放射性样品计数十次来简单明了的说明液体闪烁计数中的统计学方法。该实验的数据列于表 1 中。我们可明显看到,任何一次计数的 CPM 结果都不相同(随机衰变)。我们怎样才能获得这 10 次计数的统计数据呢?如果我们进行基本统计,则这些数值的分布可表示为正态分布或高斯分布。

表 1. 10次样品计数的统计分析

这些数据可通过计算两个参数来描述:平均值和标准偏差。平均值 () 被定义为 CPM 的总和除以被计数样品的计数次数(i),表示为。因此从表 1 来看,466148 CPM/10 = 46615,这就是平均值  CPM。接下来必须获得这 10 个样品计数的标准偏差。标准偏差可通过下面的公式获得:

因此,该样品计数十次的计数结果表示为(平均值)46615±S.D. 或 46615±102 CPM。现在我们可以计算标准偏差,但 S.D. (±102 CPM) 对于核计数的真正意义是什么?我们可通过图 1 来清楚说明,图中显示了重叠在实际计数数据上的正态分布(高斯分布)(表 1)。计数数据以柱状图表示。

图 1. 放射性样品计数十次的正态分布和计数数据

正态分布曲线通过下面的公式计算得到:

因此,发生在平均值的 +s 范围内的真实计数的概率是68%。68% 称为针对 s(标准偏差)的置信水平。由于核计数需要高于 68% 的置信水平,因此我们采用 2s 值,该值定义为 95.5% 的置信界限。

那么,这些值可如何用于核计数中呢?根据基本统计方法,我们知道预期的标准偏差等于总计数数量的平方根。这是计数统计计算的主要公式。

计数统计计算

如上所述,标准偏差可按样品检测的总计数数量的平方根来计算。该结果的置信界限为 68%。但核计数使用 2s 值(95.5% 置信界限)。典型的计算如实例 2 所示。

实例 2:如果在 1.0 分钟内进行了 9500 次计数,那么 2s 值等于多少?

因此,在 95.5% 的置信界限内,计数的统计结果(实例 2)可表示为 9500±195 次计数。这一表达结果的方法相当笨拙(因为可能获得非常多的数字)。为更方便起见,我们计算了 %2s值。%2s 值可根据公式1或者公式 2(公式 1 的数学简化)计算得到。实例 2中数据的%2s 值显示在实例 3中。

实例 3:样品计数的 %2s 计算

因此,Z终结果可表示为 9500 次计数 ± 2.05%,置信水平为 95.5%。

计数率的统计分析

因为大多数核计数方法是分析 CPM 值而不是样品的总计数,所以确定计数率的统计值很重要。以计数率为参考将如何影响计数的统计数据?如果现在对同一样品计数三分钟,则总计数数量增加了三倍。样品总体计数从 9500 次增加到 28500 次,这增加了测量的准确性。28500 次总计数的 2s 值 (338) 的百分比更小,由此可指示出准确度得到了提升。

实例 4:计算计数率的 2s 值

因此,Z终结果可表示为 9500 ± 113 CPM。现在,我们已经计算了计数率的 2s 值,那么该如何计算 %2s(使用核计数仪分析样品时通常打印输出的值)?

%2s可使用公式 3计算。

实例 5:计数率为 9500 CPM、计数时间为 3 分钟的样品的 %2s 计算。

因此,对样品计数三分钟与计数一分钟相比较,%2s 从2.05%(实例 3)降低至 1.18%(实例 5)。这一数值 (%2s) 与总计数和计数时间成反比。

 

那么这些参数是如何在液体闪烁计数中使用的呢?

在珀金埃尔默的 Tri-Carb & Quantulus 和 MicroBeta 仪器中,终止样品计数的方法通常有两种。diyi种方法称为预设时间。在该方法中,系统在到达用户设定的计数时间后停止样品计数。第二种方法是基于特定 %2s 值终止计数,所有的样品计数都具有相同的统计精确度。我们可以通过公式 3和对样品的统计精确度来反向推导对样品计数所需要的时间。


2020-04-29 10:51:03 422 0
激素调节中,受体在垂体还是在哪
 
2017-09-10 11:22:37 1207 4
干货| Joe Flow的流变学小课堂

锥板、平板和同轴圆筒?选择的烦恼!

       由于现在流变仪用户通常会拥有多个测试夹具,可以从流变专业角度表征大部分材料。但是,选择正确的测夹具应该遵循什么标准呢?

       选择Z合适的测试系统,需要考虑下列问题:

       样品稠度如何?位于流变之路的哪一段?

       有无颗粒,粒径大小?

       样品量有多少?

       容不容易清洗?

       样品发生沉降或溶剂是否挥发?

       不同测试系统的优缺点?


       样品稠度?

       表1 给出了从低粘度液体到固体不同材料的总览和大致分类。每一列给出Z通用测试类型和推荐测试夹具。

       样品粘度越低,测试转子的表面积应该要越大。

       低粘度样品通常使用同轴圆筒测试系统测试。在高剪切速率下,离心力导致测试间隙中产生湍流(Taylor 旋涡),使得表观粘度增加。因此,不应该超过临界剪切速率。

       我们的推荐:越是粘性的材料,更应该采用类似锥板或平板测试夹具。



       有无颗粒,粒径大小?

       测试系统的选择也依赖于样品中颗粒的Z大粒径。测试间隙应该足够大,保证颗粒之间无互相干扰。因此,测试间隙应该至少大于Z大粒径的5 倍(10 倍更好)。

       这对锥板夹具更为关键,为防止锥和底板发生摩擦,在锥顶端打磨掉一定的高度,成为平台。图2 显示通用锥板的间隙值。

       如果样品中含有颗粒,会在顶端发生聚集,产生不真实的结果。

       如果样品中包含大颗粒,应该使用平行板夹具。测量间隙可以根据需要设定(推荐: 0.25 mm ~ 2 mm)。


       有多少样品可用于测试?

       有时由于只有少量样品而限制了测试夹具的选择,因而无法选择同轴圆筒测试系统。

这种情况下,推荐使用锥板或平行板夹具,比如,只有0.09ml样品,可采用CP40-0.3(直径: 40 mm, 角度: 0.3°)。


       清洗是否困难?

       如果测试结束后测试系统难以清洗,可更换为平行板或锥板,同轴圆筒测试系统清洗相对困难。

所有类型的测试系统都有一次性配件,可抛弃或者单独清洗,一次性配件是固化过程测量所需要的。


       样品是否会沉淀或挥发?

       样品含有溶剂,若使用平行板,锥板或双间隙系统,样品可能在边缘变干,导致测试的粘度偏高。

       因此可能的话,请使用同轴圆筒系统,即使样品表面变干,也不影响测试结果。

       当使用锥板和平行板测试系统时,有以下几种方法防止样品挥发变干:

       使用低粘度硅油涂在样品周围或表面

       使用防挥发罩,形成溶剂的饱和蒸气压

       如果使用帕尔贴上控温罩,可以使用专用的防挥发模块,达到Z大程 度的密封和减少样品裸露面积。

       如果样品发生沉降,由于只测试了液相,样品粘度可能偏低,对此类样品推荐使用同轴圆筒系统。


      不同测试系统的优缺点?



       特殊情况解决方案

       如果样品滑移,应该使用磨砂或刻痕夹具,对挑战性样品需要特殊材质的夹具。如果样品中颗粒粒径大于1mm,推荐使用球型系统或桨式转子。

       如果使用特殊系统,每次都采用相同的方法是很重要的,以获得可以比较的结果。



2020-01-14 17:18:04 264 0
原子荧光小课堂|钢铁行业中重金属污染及检测技术

钢铁行业虽未被列入ZD重金属防控行业,但因其落后的冶炼、涂镀工艺以及附属的采矿选矿、铁合金等带来重金属的污染依然不容忽视。因此在十三届全国人们代表大会上就有代表提出要推进钢铁等行业的改造,施行高污染排放标准并且限期达标。今天金索坤和您聊一聊钢铁工业中重金属污染以及主要的检测技术。

重金属污染特点

重金属污染与其他污染物相比,具有三个显著的特点:一为毒性,二为富集性和滞后性,三为难降解和难治理性。它的特点使得其对环境污染Z终造成对人健康的严重危害,其中对人体危害Z大的为Pb(铅)、Hg(汞)、As(砷)、Cd(镉)、Cr(铬) 5 种。其中工业重金属污染大多通过废气、废水、固体废物以及产品进入环境,通过在空气、水域、土壤、生物体中迁移,在植物、动物和人体中富集,由于难以降解,从而对环境和人的健康造成很大的危害,产生不可逆转的影响。

钢铁企业重金属污染物的来源

钢铁企业重金属元素主要由原(辅助)料、燃料带入,在高温烧结、冶炼、轧制过程中,随着废气、废水.固体废物,产品与副产品排出;另外原(辅助)料,燃料的转运.破碎.堆存(储存)中散逸烟(粉)尘也携带微量重金属元素。钢铁企业排放物中的重金属元素的量和种类取决于原(辅助)科的成分和组成.燃科的种类、成分和组成。

钢铁企业重金属污染物的检测

钢铁行业中对人体危害较大的重金属元素主要为Pb(铅)、Hg(汞)、As(砷)、Cd(镉)、Cr(铬) 5 种,其中对人体和环境危害Z大的主要为砷、汞,对于这两种的元素检测主要是应用原子荧光光谱法,其原理是:其中检测这五种重金属元素Z常用采用的方法的原理分别为:

试样在一定酸度下与硼氢化钾溶液通过氢化物发生器产生氢化物,随载气进人石英管原子化,在待测元素的特征波长处测定其中荧光强度,将测得的试液的荧光强度与标准溶液的荧光强度相比较,得出试液中待测元素的含量。(SN/T 2680-2010 铁矿石中砷、汞、镉、铅、铋含量的测定 原子荧光光谱法,GB/T 20127.2-2006 钢铁及合金 痕量元素的测定 第2部分氢化物发生-原子荧光光谱法测定砷含量)

从钢铁工业中重金属的检测方法看出原子荧光光度计在钢铁检测中发挥重要作用。北京金索坤技术开发有限公司作为市面上唯yi一家只专注原子荧光光度计的研发以及生产的高薪技术企业会一如既往的为原子荧光技术的发展探索乾坤,用更加优质GX的原子荧光光度计和其他各种检测仪器一起为钢铁工业的检测贡献力量.

新产品SK-盛析原子荧光光度计有以下优势:

1)采用与ICP-MS相同的连续进样方式,提高稳定性及测试效率,30s/3次数据。

2)无需动力,自动排废,提高反应稳定性,精简装置。

3)电路上增加分道信号控制模块,可保证双道同测砷锑及砷汞同测时,效果更佳。

4)氩气流量采用进口质量流量计的数字控制方式,提高仪器在长时间工作下的稳定性

5)新增添了审计追踪功能,有效做到数据溯源。

金索坤SK-盛析 原子荧光光度计


2019-11-07 16:16:29 518 0
原子荧光小课堂—关注检测细节

       随着食品中重金属超标案例的增多,人们对于食品中重金属检测的关注度越来越高,这对食品中重金属的检测提出了更高的要求。实际上,食品检测所得到的数据的准确与否和检测中使用的检测方法、使用的仪器以及使用的试剂、称装试剂的器皿等都有着密不可分的关系,其中检测时使用的试剂、称装试剂的器皿是在检测中Z容易被忽略的因素,今天金索坤和大家分享一下在使用原子荧光光度计检测砷、汞等重金属元素时,使用的试剂和器皿对检测结果产生的影响。

       首先是检测中使用的试剂:有一些实验操作人员会认为,在实验过程中已经扣除了空白值,所以试剂底值对检测结果不会产生影响。对于这个问题,我们可以设想一下,如果空白的荧光强度100,漂移为5%,那么5个荧光强度的差值对测设的结果影响的确不是很大,但如果空白的荧光强度为1000,那么就会有50个荧光强度的差值,如果样品正好也是50个荧光强度,那么就会对测试结果产生很大的影响。值得注意的是,不同厂家生产的试剂是不同的,同一厂家不同批号的试剂也会有差异,甚至于同一厂家生产的相同批号的试剂也会因为不同的试剂瓶而不同。所以就需要通过空白试验来减少试剂对测试结果的影响。

       另外,检测过程中使用到的器皿也可能对检测产生影响。所以器皿在使用前需要用酸浸泡。Z好直接将酸倒入器皿进行浸泡,而不是直接将器皿浸泡在酸缸中,因为酸缸也可能被污染。配制标准溶液的时候加入重铬酸钾可以减少器皿对汞的吸附。另外,实验证明与玻璃器皿相比,塑料器皿对汞的吸附性更小。

       当然,除了检测时使用的试剂、称装试剂的器皿之外,检测中使用的检测方法、使用的仪器对检测结果同样也有很大影响。原子荧光光度计作为检测砷、汞等重金属元素的主要仪器,在食品检测中发挥很大作用。北京金索坤技术开发有限公司作为原子荧光技术的领跑者,经过三十多年的研究,倾心打造出检测元素多、测试速度快、技术指标好、安装省事操作省心节约耗材的新一代原子荧光光度计,提高食品中重金属检测的准确性。相信有了先进的检测仪器再加上对检测细节足够关注一定能很好地完成检测任务.

金索坤新SK-盛析 原子荧光光度计产品特色

1. 增加快速建立标准曲线功能,简化操作,提高测试效率。

2. 无需动力,自动排废,提高反应稳定性,精简装置。

3. 电路上增加分道信号控制模块,可保证双道同测砷锑及砷汞同测时,效果更佳。

4. 氩气流量采用进口质量流量计的数字控制方式,提高仪器在长时间工作下的稳定性。

金索坤SK-盛析 原子荧光光度计




(来源:北京金索坤技术开发有限公司)


2019-10-28 09:22:25 282 0
LINSEIS小课堂:《STA 同步分析仪》

     同步热分析仪(STA)是将热重分析 (TG )与差热分析(DTA )或差示扫描量热 (DSC )结合为一体,在同一次测量中利用同一样品可同步得到热重与差热信息的仪器。

STA的应用范围

       具体研究:无机物、有机物及聚合物的热分解;金属在高温下受各种气体的腐蚀过程;固态反应;矿物的煅烧和冶炼;液体的蒸馏和汽化;煤、石油和木材的热解过程;含湿量、挥发物及灰分含量的测定;升华过程;脱水和吸湿;爆炸材料的研究;反应动力学的研究;发现新化合物;吸附和解吸;催化活度的测定;表面积的测定;氧化稳定性和还原稳定性的研究;反应机制的研究。

LINSEIS STA 优点

      1.同步测量样品质量、热量变化

      2. -150℃ 至 2400℃,可以同时搭载双炉体

      3. 适用氧化还原性气氛

      4.提供水蒸气,热红、热质联用等附件

STA 实验中注意事

       1、检查坩埚是否洁净、无破损或裂纹,应使用镊子夹取,避免用手触摸。干锅用完后需用超声处理,然后酒精清洗并干燥。

       2、定期清洁炉腔出气口,用无水酒精去除垢物,防止堵塞。

       3、通过惰性气氛下草酸钙的差热曲线定期检查仪器的气密性

tips:高精密仪器使用需要用户使用严格按照操作手册与售后工程师的培训,定期的检修与故障排查能使仪器拥有更长久的使用寿命。LINSEIS专业售后团队,期待与您的合作。

2019-11-21 09:32:43 322 0
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