3D打印的样品转换器进行的流线型数字生物实验

The continuous phase is composed of fluorinated oil (Novec-7500, 3M) containing 1% or 4% (w/w) fluorosurfactant (Fluosurf, Emulseo, France) for isothermal amplification and PCR amplification, respectively.

连续相由含1%或4% (w/w)氟表面活性剂(Fluosurf, Emulseo, France)的氟化油(Novec-7500, 3M)组成，分别用于等温扩增和PCR扩增。

Roberta Menezes; Adèle Dramé-Maigné; Valérie Taly; Yannick Rondelez; Guillaume Gines, Streamlined digital bioassays with a 3D printed sample changer, Royal Society of Chemistry (RSC), Analyst, 2020,145, 572-581. DOI: 10.1039/C9AN01744E .

基于微滴的微流体已经渗透到生命科学的许多领域，包括生物化学、生物学和医学。油包水液滴作为独立的飞升到纳升的储层，以最小的样品输入实现(生物)化学反应的并行化。在液滴微流控的应用范围中，利用泊松分离隔间中的单分子进行生物分子的数字检测，由于这些方法的高精度、灵敏度和鲁棒性而受到了相当大的关注。然而，虽然液滴通量可以非常高，但与基于孔板的分析相比，这些方法的样品通量较差。这种限制来自于必须将每个样品独立地转化为单分散乳液。本文报告了一种通用装置，该装置使用单个微流控芯片对多达15个样品进行快速顺序划分。3D打印的样品转子装载了所有样品并连接到压力源。然后使用简单的磁驱动将样品注入微流控芯片中，而不会造成压力中断。这个过程产生单分散液滴具有高样品到样品的一致性。我们还描述了一种荧光条形码策略，允许所有样品同时收集，孵育，成像和分析，从而显着减少化验的时间。作为一个应用实例，我们在不到2小时的时间内对8个样本的DNA扩增子进行了液滴数字PCR定量分析。我们进一步验证了我们的方法，证明了使用等温核酸扩增化学方法对来自人类样本的11个microRNA进行平行定量。作为一个片外装置，样品转换器可以连接到各种微流体几何形状，因此，用途广泛。