瞧一瞧看一看水产品中四聚乙醛残留量的检测

四聚乙醛（Metaldehyde）是乙醛聚合而成的四聚物，是一种选择性很强的软体动物杀灭剂，广泛应用于防 治作物上的田螺、蜗牛和蛞蝓。虽然四聚乙醛毒性较低，但由于四聚乙醛导致人畜中毒的事例也时有发生。

作为一种环境污染物，四聚乙醛残留在水产品中对人类健康威胁同样存在，但目前为此我国尚未制定四聚乙醛在水产品中的残留限量，欧盟仅规定了两栖动物（如鳄鱼肉）的残留限量为0.05 mg/kg，从完善标准体系和保障公众身体健康等角度考虑，建立水产品中四聚乙醛残留量分析方法有着重要意义。

安谱实验根据2021年新国标《食品安全国家标准 水产品中四聚乙醛残留量的测定 液相色谱—串联质谱法》，对鱼肉和虾肉进行实验，此方法操作简单，回收率高，精密度好。

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标准溶液配制

精密量取0.25μg/mL四聚乙醛标准工作液和 0.25μg/mL 四聚乙醛-D16标准工作液适量，用50%乙腈-0.1%甲酸水溶液稀释成含四聚乙醛浓度为 0.05、0.10、0.25、0.50、1.0、2.5 和 5.0 ng/mL 的系列标准溶液（内标浓度均为 1.25 ng/mL），供液相色谱-串联质谱测定。以标准溶液浓度为横坐标，四聚乙醛定量离子对峰面积和四聚乙醛-D16离子对峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。

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提取

取试料5g（准确至±0.05g），于50mL离心管中，加四聚乙醛-D16标准工作液（0.25μg/mL）100μL，再依次加入水2.0mL和乙腈10.0mL，以10 000r/min速度匀质1min后加入氯化钠2g，加盖涡旋混合1min后以5000 r/min的速度离心2min，收集上清液，备用。

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净化

取备用液2.0 mL，转入CNW QuEChERS 净化管（货号SBEQ-CA8769-25，内含无水硫酸镁0.3 g、C18 0.1 g、PSA 0.1 g），涡旋混匀1 min，5000 r/min离心2 min，吸取上清液0.5 mL与0.1%甲酸溶液0.5 mL混匀，过0.22 µm滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。

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LC-MS/MS测定

液相色谱条件

色谱柱：Athena UHPLC C18液相色谱柱（2.1mm*50mm*1.8um）

流动相：A：0.1%甲酸水；B：乙腈，梯度洗脱条件见表1：

表1 梯度洗脱条件

流速：0.3 mL/min

柱温：30℃

进样量：10 uL

质谱条件

离子源：电喷雾离子源。

扫描方式：正离子扫描。

检测方式：多反应监测（MRM）。

碰撞气(CAD)：8 psi;

门帘气(CUR)：35 psi;

喷雾气(GS1)：60 psi;

辅助气(GS2)：65 psi;

离子喷雾电压（IS）：5500V;

界面加热(ihe)：On;

加热温度(TEM)：500℃；

定性离子对、定量离子对、碰撞能参考值见表2

表2 定性离子对、定量子离子对、碰撞能量和锥孔电压

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实验谱图

1.标品谱图

图1 (0.5+1.25 ng/mL)四聚乙醛、四聚乙醛-D16标准溶液谱图

2.鱼肉基质谱图

图2 鱼肉基质空白谱图

图3 鱼肉基质加标谱图

3.虾肉基质谱图

图4 虾肉基质空白谱图

图5 虾肉基质加标谱图

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实验数据

1.标准曲线

图6 四聚乙醛标准曲线

在0.05-5 ng/mL浓度范围内，内标法绘制标准曲线:y=0.792x+0.00257(r=0.9977)

2.基质结果

表3 基质添加回收率和精密度

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实验结论

内标法测试鱼肉和虾肉基质中的四聚乙醛，基质中均未检测到，在2 μg/kg的添加水平下，回收率为95%~100%，相对平均偏差<5%。

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注意事项

1、四聚乙醛在进行母粒子和子离子扫描时，存在两种加和方式，M+NH4和M+Na。M+NH4 对应的离子对为194/62和194/106，M+Na对应的离子对为199/67和199/111，由于M+NH4比M+Na方式得到的离子响应更高，且稳定，因此选择M+NH4这种加和方式进行分析。

2、系列标准曲线可以用50%乙腈-0.1%甲酸水溶液配制，保持和待测样品相同的溶液。

3、提取步骤严格按照先加水再加乙腈的顺序，请勿颠倒顺序，以免水产基质中的蛋白质遇到有机试剂发生蛋白质变性迅速结块的现象，影响提取效率。