新标准！GB 31658.22-2022 动物性食品中β-受体激动剂残留量的检测

动物性食品中β-受体激动剂残留的检测
迪马科技

　　β-受体激动剂能促进脂肪分解，抑制脂肪沉淀，显著提高酮体的瘦肉率，因此曾被用作畜禽的促生产剂。但这类药物易在动物体组织内残留，通过食物链进入人体，引起食物中毒。我国自2002起，已经将盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等列为禁用药品，并列入年度例行监测计划。

迪马科技参考国标GB 31658.22-2022，建立了SPE-UPLC-MS/MS法，测定动物性食品中β-受体激动剂的残留，该方案通过对动物性食品酶解、高氯酸沉淀蛋白，经乙酸乙酯、叔丁基甲醚萃取，ProElut PXC净化, Inspire PFP色谱柱分离检测，回收率在70%-120%之间。

本方案具有提取方法回收率高、净化效果优异、方法稳定性好等优点。

1、适用范围

本方案适用于猪肉、猪肝中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、班布特罗、克仑丙罗、妥布特罗、利托君、克仑赛罗、马喷特罗、克仑潘特、羟甲基克仑特罗共18种β-受体激动剂单个或混合物残留量的检测。

2、标准品

(1) 混标储备液：精密称取适量克伦特罗等标准品，用甲醇溶解并定容，配制成浓度为100μg/mL混标储备液(Cat.#: 47936)；

(2) 混标中间液Ⅰ：准确吸取适量混标储备液，用甲醇稀释并定容，配制成浓度为0.1μg/mL混标中间液；

(3) 混标中间液Ⅱ：准确吸取适量混标中间液Ⅰ，用甲醇稀释并定容，配制成浓度为0.01μg/mL混标中间液；

(4) 内标储备液：精密称取适量克伦特罗-D9、莱克多巴胺-D6、沙丁胺醇-D3、西马特罗-D7、齐帕特罗-D7、氯丙那林-D7、特布他林-D9、西布特罗-D9、盐酸马布特罗-D9、盐酸班布特罗-D9、克仑丙罗-D7、盐酸妥布特罗-D9、羟甲基克仑特罗-D6，用甲醇溶解并定容，配制成浓度为10μg/mL内标储备液；

(5) 内标工作液：准确吸取适量内标储备液，用甲醇稀释并定容，配制成浓度为0.1μg/mL内标工作液。

3、提取

(1) 称取样品2.0g于50mL塑料离心管中，加6mL 0.2mol/L乙酸铵缓冲液、40μL β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶，涡旋混匀，37℃避光水浴16h，放置室温，备用；

(2) 取备用液，加100μL内标工作液，涡旋混匀，8000rmp离心8min，取出上清；

(3) 向下层残渣加入5mL 0.1mol/L高氯酸溶液，涡旋5min, 8000rmp离心8min，取上清,与步骤(2)上清混匀，用高氯酸调pH值至1.0±0.2，8000rmp离心8min，取出上清；

(4) 将上清液用10mol/L NaOH溶液调pH值至10.0±0.5；

(5) 加乙酸乙酯15mL，涡旋5min, 5000rmp离心5min，取上层有机相；

(6) 下层水相中再加入10mL叔丁基甲醚，涡旋5min, 5000rmp离心5min，取上层有机相；

(7) 合并两次有机相，混匀，50 ℃水浴氮吹至干，用5mL 2%甲酸溶液超声1min,涡旋1min溶解残渣，备用。

注：0.2mol/L乙酸铵缓冲液：取乙酸铵15.4g,溶解于1000mL水中，用乙酸调pH值至5.2；

0.1mol/L高氯酸溶液：取高氯酸8.7mL，用水稀释至1000mL。

4、净化