肾移植后Treg细胞监测

肾移植是终末期肾病（ESRD）患者目前有效的治 疗手段。为了防止发生免疫排斥，肾移植患者通常都需要使用免疫抑 制剂。然而，过度使用免疫抑 制剂会带来严重的感染和肿瘤等并发症，其中肺炎（肺部感染）是目前肾移植患者术后死亡的主要原因之一。如何准确的找到排斥和感染的平衡点是每一个肾移植医师的课题。目前，通过免疫细胞数量和功能的监测成为实时反映机体免疫状态的有效手段，在器官移植领域开始被推广。

Treg细胞的活化一般认为与免疫抑 制状态有关，免疫抑 制剂和严重的感染状态均会影响Treg的活性，然而，当这两种状态（免疫抑 制和严重感染）同时存在时，Treg细胞及其亚群的数量和功能如何变化，目前尚缺乏研究。

来自中南大学湘雅三医院移植中心的研究者们招募了2019-2020年期间的肾移植后肺炎患者，根据将肺部感染的严重程度分为重度肺炎（SP）和轻度肺炎（MP）组两组。

为详细描绘Treg细胞的免疫分型及功能状态，本文使用了7种流式抗体进行染色，抗体的详细信息如下：

此Panel为贝克曼公司推出的Duraclone IM全套抗体组合方案中的第6种（货号B53346）。该产品的优点是粉末装，保存的时间比液体更久；而且预混抗体也能节省实验时间，相比于自己混匀抗体后分装染色，样本间的一致性会更高。产品质量满足ISO 9001认证标准（ISO 9001-2008）。

所有样本染色好后使用贝克曼库尔特的3激光13色流式分析仪CytoFLEX流式细胞仪分析。本仪器可以轻松做到10色以上的流式分析，本文使用的7色Panel，检测分析起来较为简单。

文章检测完所有样本后，使用的圈门策略流式图如下图所。

最 终的所有检测结果如下表所示，可以发现总Treg、Helios- Treg、CD39+ Treg、 CD45RA+ Treg的百分比在重度肺炎患者中明显升高，而Helios+ Treg、CD39- Treg、 CD45RA- Treg的百分比在重度肺炎患者中明显降低，说明Treg及其亚群细胞确实在肾移植后肺炎的疾病进展中可能起到一定的作用。

文章还做了上述各种Treg亚群的ROC曲线分析，确定了一些CutOff值，为Treg及其亚群在肾移植患者肺炎监测的具体参考值提供了依据。

如果读者对于Treg及其亚群的详细功能有疑问，可以详细查看Treg亚群相关的综述【1，2】，其中详细解释了Treg细胞及其亚群的具体分类和功能。

 文章来源： 

Zhuang Q, Cai H, Yang M, Peng B, Luo Y, Zhang Y, Ming Y. The Association between Regulatory T Cell Subpopulations and Severe Pneumonia Post Renal Transplantation. J Immunol Res. 2022 Apr 9;2022:8720438. doi: 10.1155/2022/8720438. PMID: 35437510; PMCID: PMC9013297.

 Treg细胞分群参考文献： 

【1】Shevyrev D, Tereshchenko V. Treg Heterogeneity, Function, and Homeostasis. Front Immunol. 2020 Jan 14;10:3100. doi: 10.3389/fimmu.2019.03100. PMID: 31993063; PMCID: PMC6971100.

【2】Wing JB, Tanaka A, Sakaguchi S. Human FOXP3+ Regulatory T Cell Heterogeneity and Function in Autoimmunity and Cancer. Immunity. 2019 Feb 19;50(2):302-316. doi: 10.1016/j.immuni.2019.01.020. PMID: 30784578.