跟踪受强烈刺激球状体中的钙离子变化

荧光共聚焦和光片活体钙离子成像

球状体是易用、高性价比的3D细胞培养物，可用于基础和应用研究。它们可以弥补2D和体内实验的差距，并用于高通量筛选。然而，很难通过显微镜对这些圆形、非粘连细胞团进行活细胞观察急性药物反应，这便妨碍了对细胞内和细胞间信号快速变化的研究。为解决这一问题，我们使用透明和软明胶网状结构稳定微灌注腔内的球状体。

通过这种方法，我们可以使用倒置TCS SP8 DLS共聚焦显微镜在进行急性灌注时对钙离子变化进行活细胞共聚焦显微成像。使用促味剂或ATP刺激味觉/舌乳头（BRAIN Biotech AG）永生化细胞球状体。同心球状体区域的反应分析显示，相比核心区域的细胞，边缘位置的细胞显示出更大、更快的瞬变。这些区域差异在使用光片显微镜开展的类似实验中得到确认。实验采用TCS SP8 DLS完成，可以使我们在不损失时空分辨率的情况下，在大约100 μm的深度进行成像。

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Molitor E., Nürnberg E., Ertongur-Fauth T., Scholz P., Riedel K., Hafner M., Rudolf R. & Cesetti T.:

Analysis of Calcium Signaling in Live Human Tongue Cell 3D-Cultures upon Tastant Perfusion

Cell Calcium 87 (May 2020): 102164, DOI: 10.1016/j.ceca.2020.102164. 

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0143416020300063