我们在拉制好玻璃微电极后,发现拉制的微电极并不能满足我们的实验需求,是因为锥体长度太短了?还是因为电极口径大小不合适?不要担心,下面我们会详细告诉你应该调整哪些参数,拉制出符合实验需求的玻璃微电极。
参数调试篇
01
膜片钳微电极参数调试方法
1) 测试速度中值
为什么要测试速度中值呢?膜片钳微电极的拉制过程就是通过加热使玻璃管融化,再多次施加拉力从而将玻璃管拉断。多次施加拉力的时候就产生了循环次数这个参数,而拉制速度是影响循环次数的重要因素。为了提高拉制结果的稳定性,我们需将循环次数稳定在一个值,而这个值往往对应着一个速度区间。通过找到速度区间的中值,来保证循环次数保持稳定,一般推荐的循环次数为4次和5次。
举例:推荐参数的速度为31,增加或减少速度值,找到循环5次的速度区间为25-35,循环4次的速度区间为36-44,则循环5次的速度中值为(25+35)*0.5=30,循环4次的速度中值为(36+44)* 0.5=40。
2) 选择速度
当然膜片钳微电极的阻抗也需要调试。
首先用户自行测试循环4次和循环5次的速度中值对应的阻抗,并与目标阻抗比较,选择阻抗更接近目标阻抗的速度中值进行调试。
举例:循环5次的速度中值30对应的阻抗为2M,循环4次的速度中值40对应的阻抗为6M,而目标阻抗为3±1M;则循环5次的速度中值对应的阻抗更接近目标阻抗,因此选择速度30;如果目标阻抗为5M,则选择速度40。
3) 在选择的速度基础上调试参数
注意:参数调试过程中应保证循环次数不变。
单行调试法
调节速度或热量,直到拉制出符合需求的微电极。速度调节范围±10,热量调节范围±15,应优先调节速度。
多行调试法
若采用单行调试法不能拉制出目标微电极,或者单行调试法调试后循环次数发生改变,则使用多行调试法。
举例:选择的速度30循环5次,则将设置参数分为5行,然后调节最后1-3行的热量或者速度,得到目标微电极的拉制参数。热量调节范围为±15,速度调节范围为±10。
02
其他微电极的参数调试方法
以推荐参数为基础,调节拉力或速度,应优先调整速度;若拉制的微电极与目标微电极差异较大,可同时调节拉力和速度。
如果是初次使用拉制仪怎么办?
也不用担心
我们以瑞沃德MP-500微电极拉制仪为例
提供详细的操作流程
操作流程篇
注:本设备使用过程中应放置在稳固水平的平台上,请勿放置在不稳定的平台上!
01
初始启动
连接电源后启动设备,系统进入开机启动界面。
等待 30s 待进度条加载完毕后,进入【主界面】
02
安装玻璃管
将左右拉杆移到最外侧,卡住拉杆,防止拉杆左右滑动;
先将玻璃管全部放在金属固定槽中,转动旋钮轻微固定玻璃管,注意此时玻璃管还可以推动;
按压两侧按钮释放拉杆,轻握拉杆扶手拉动两侧拉杆向中间靠近加热室;
轻微拧松旋钮,沿着拉槽轻轻推动玻璃管,小心从加热片中穿过,直到玻璃管左右的距离大致相等;拧紧旋钮,完成玻璃管安装。
注意:
玻璃管滑动时必须紧贴拉槽,否则可能损坏加热片!
拉动拉杆和拧紧旋钮时不能过度用力,否则可能导致玻璃管破裂!
03
测试软化点
本设备的加热装置通过电流使加热片的温度能够软化玻璃管。软化点是能够软化玻璃管的合适电流值,不同型号的加热片和玻璃管有不同的软化点。本设备配附3个型号的加热片和6个型号的玻璃管,每次更换加热片或不同型号的玻璃管时,用户应自行测试软化点并记录下来。
注意:每次更换加热片或不同型号的玻璃管时,务必测试软化点!
在【主界面】点击【测试】进入【软化点测试】界面
按下显示屏右侧的绿灯按键【START】,开始测试。
得到软化点测试值,记下该测试值。
重新测试软化点,建议重复测试 3 次,取最大值,即为软化点。
注意:测试软化点之后,玻璃管会被拉断,建议更换玻璃管后再拉制!
04
编辑参数
如图所示界面,用户可编辑各参数值。
05
拉制模板
在【主界面】点击【拉制模板】选择瑞沃德预设的模板进行拉制。
1) 选择加热片类型,本设备配附的加热片都是方框形。
当玻璃微电极用于在体微量注射时,建议选用 HF-2545B 型号的加热片!
2) 选择玻璃管规格。
当玻璃微电极用于在体微量注射时,建议选用型号为 B-15086-10F、B-10078-10F、B-12069-10F、B-150110-10F 的玻璃管!
当拉制膜片钳微电极时,建议选用型号为 B-15086-10F、B-12069-10F、B-150110- 10F、B-12094-10F 的玻璃管!
3) 选择微电极用途。
4) 最后,系统根据以上三个选项生成程序参数,用户可选择将当前模板作为一个新程序或者覆盖当前程序的参数。
06
开始拉制和暂停拉制
绿色按键【START/STOP】键为多功能按键,可开始拉制或暂停拉制;红色按键【RESET】键可重启系统。
工作原理:通过对铂铱合金片通恒定电流产生高温融化插入合金片框中的毛细玻璃管,通过重力作用或者施加额外拉力将中间融化的毛细玻璃管向两侧分步拉断成尖端对称的两个玻璃微电极。
相信到这里拉制仪的参数调节以及使用方法,大家应该都有了大概的了解。工欲善其事,必先利其器,想更好把控膜片钳和注射类等各个实验场景,一台工作“好助手”少不了——瑞沃德MP-500微电极拉制仪,将从人性化、智能、高效和安全等方面让您的实验变得更简单。
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