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“新冠病毒与颗粒”讨论之三——新冠病毒疫苗研发中颗粒的作用

丹东百特仪器有限公司 2020-02-22 14:54:19 375  浏览
  •        对于战胜新冠病毒疫情,除了ZL以外就是预防。研制有效的疫苗就是Z佳的预防形式。疫苗是将病毒或者相关成分,经过人工减毒、灭活或者基因技术处理后打入人的体内,这些“有害成分”本身不会在体内大量繁殖或者造成伤害,但会激发人的免疫反应并形成记忆,一旦有真的病毒入侵,免疫系统就会迅速识别并展开“围剿”,从而达到预防的目的。

           在疫苗中有大量的“颗粒”。比如说病毒本身就是一个个小的颗粒,直径大约在几十到几百纳米之间,这些病毒颗粒可以通过电镜直接观察。研制疫苗需要对大量病毒进行培养和控制,病毒颗粒大小和粒度分布可以采用动态光散射的方法进行测试和评估。

           很多时候,我们还需要使用佐剂来提高疫苗的免疫效果,换句话说,疫苗是佐剂和病毒抗原的结合物,这样可以大大提高疫苗的保护效力和持续时间。比如超细氢氧化铝就是常用的疫苗佐剂,它的颗粒大小对于疫苗制剂工艺和产品质量有显著影响,包括影响制剂均匀性、佐剂跟病毒抗原的吸附作用等。

           随着分子生物技术的不断发展,人们对疫苗及免疫的认识也不断深入。当病毒进入体内时,引起特异性的免疫反应并不是整个病毒,而是病毒表面某些特异性的抗原(蛋白、多肽等结构),因此在制备疫苗的时候,就可以只保留对免疫有作用的成分,而把所有无关甚至有害的成分全部去除。对于一些特异性的抗原,我们可以通过基因工程的方式去“合成”表达获取(比如亚单位疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗),提高疫苗的多样性和可行性。而在这个过程中,我们就需要对大量的抗原、抗体甚至多肽进行处理,这些颗粒粒径跨度比较大,比如抗原、抗体等蛋白一般粒径在几十到几百纳米,而一些分子量小的多肽可能粒径只有几个纳米。这些都可通过激光粒度仪或动态光散射纳米粒度仪来表征。

           在病毒的防护、诊断和ZL过程中,很多都与“颗粒”和“大小”密切相关,因此可通过颗粒学的方法“监视”病毒、蛋白、多肽、佐剂等等,为战胜病毒助上一臂之力。只要各行各业共同努力,就能早日战胜病毒,还“山河无恙,人间太平”!


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“新冠病毒与颗粒”讨论之三——新冠病毒疫苗研发中颗粒的作用

       对于战胜新冠病毒疫情,除了ZL以外就是预防。研制有效的疫苗就是Z佳的预防形式。疫苗是将病毒或者相关成分,经过人工减毒、灭活或者基因技术处理后打入人的体内,这些“有害成分”本身不会在体内大量繁殖或者造成伤害,但会激发人的免疫反应并形成记忆,一旦有真的病毒入侵,免疫系统就会迅速识别并展开“围剿”,从而达到预防的目的。

       在疫苗中有大量的“颗粒”。比如说病毒本身就是一个个小的颗粒,直径大约在几十到几百纳米之间,这些病毒颗粒可以通过电镜直接观察。研制疫苗需要对大量病毒进行培养和控制,病毒颗粒大小和粒度分布可以采用动态光散射的方法进行测试和评估。

       很多时候,我们还需要使用佐剂来提高疫苗的免疫效果,换句话说,疫苗是佐剂和病毒抗原的结合物,这样可以大大提高疫苗的保护效力和持续时间。比如超细氢氧化铝就是常用的疫苗佐剂,它的颗粒大小对于疫苗制剂工艺和产品质量有显著影响,包括影响制剂均匀性、佐剂跟病毒抗原的吸附作用等。

       随着分子生物技术的不断发展,人们对疫苗及免疫的认识也不断深入。当病毒进入体内时,引起特异性的免疫反应并不是整个病毒,而是病毒表面某些特异性的抗原(蛋白、多肽等结构),因此在制备疫苗的时候,就可以只保留对免疫有作用的成分,而把所有无关甚至有害的成分全部去除。对于一些特异性的抗原,我们可以通过基因工程的方式去“合成”表达获取(比如亚单位疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗),提高疫苗的多样性和可行性。而在这个过程中,我们就需要对大量的抗原、抗体甚至多肽进行处理,这些颗粒粒径跨度比较大,比如抗原、抗体等蛋白一般粒径在几十到几百纳米,而一些分子量小的多肽可能粒径只有几个纳米。这些都可通过激光粒度仪或动态光散射纳米粒度仪来表征。

       在病毒的防护、诊断和ZL过程中,很多都与“颗粒”和“大小”密切相关,因此可通过颗粒学的方法“监视”病毒、蛋白、多肽、佐剂等等,为战胜病毒助上一臂之力。只要各行各业共同努力,就能早日战胜病毒,还“山河无恙,人间太平”!


2020-02-22 14:54:19 375 0
赛默飞化学品助力新冠病毒检测试剂盒和疫苗研发

此前,市面上的核酸检测是以传统的荧光定量PCR方法进行,需要经过提取病毒RNA和逆转录PCR (RT-PCR)两步,时间需要耗费2小时左右,操作相对复杂,检测人员感染风险也比较高。科学家Z新研发的试剂盒,采用了恒温扩增技术,在保证灵敏度和特异性的基础上,缩短了扩增检测时间,简化了操作步骤,整个过程只需要20分钟左右,从而,大大降低了检测人员的感染风险,增加了操作安全性。

近期,也有科学家发布消息:已成功研发出新型冠状病毒IgM抗体检测试剂盒,利用胶体金法和免疫层析法的基本原理,Z快3分钟即可出结果。该方法在检测时间窗口上没有核酸检测快,但是采样安全、操作简便、适用面广泛,可与核酸检测形成互补。赛默飞实验室产品和服务可以大量提供四氯金酸和酶联底物,以帮助加速试剂盒的研发和生产。

早在1月24日,浙江省疾控ZX新型冠状病毒检测团队已成功分离到了新型冠状病毒毒株,为新型冠状病毒疫苗的研制、抗病毒 药物的筛选和快速检测试剂的研发奠定了坚实的基础。


无论是试剂盒的开发还是疫苗的研制,都需要高品质的生化试剂。生化试剂中的蛋白和金属杂质,都会给前期病毒RNA的提取和后续的扩增带来不利影响。赛默飞实验室产品和服务(其旗下品牌Fisher Bioreagent)专注于分子生物级试剂的生产,可以全面覆盖体外诊断试剂和疫苗研发所需的各种化学品,能够提供满足USP/EP/BP/JP/FCC/NF技术要求的高品质级别试剂,其中,缓冲液、表面活性剂、胶体金制备材料、酶标显色底物、蛋白质提取和纯化试剂、及多肽测序和DNA&RNA合成所用试剂等,可提供大宗定制服务。

与您携手,共克时艰!

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咨询产品信息,请拨打客服热线:

400-610-6006或800-810-6000


部分体外诊断相关试剂清单

全国物流情况

非危化学品:

使用顺丰快递,除湖北暂时无法派送,其余均可派送。

危险化学品:

·上海地区已于2020年2月10日开始恢复整车及零单业务。

·从2月19日开始,北京全线(含廊坊)、天津全线、广东省(广州市,其它周转城市仍需要专车送达)、福建省(福州、泉州、厦门)、辽宁(大连)、江苏(昆山、苏州、无锡、张家港、江阴)等开始运作零单发车业务。

·除湖北、河南、西藏、浙江(温州、台州、宁波、舟山及附属岛屿)以及上述提到的地区之外的其他省份及城市,预计自2020年3月1日开始提送货业

·河南、西藏、浙江(温州、台州、宁波、舟山及附属岛屿)预计自2020年3月10日开始提送货业务。具体以政府文件为准。

·湖北地区因为是疫情的发源地和重灾区,发运业务的恢复时间待定,具体视疫情的发展情况而定。


*时效在原有的基础上预计增加2-3天,如有冷链危险品请注意增加冰量。

*对于收货客户需要做车辆备案以及登记的请在出单时告知。

*特殊客户需要安排专车运输的请至少提前2天通知物流部,会确认运输报价和时效。


关于物流,特别提醒,提供专车送货服务,具体情况请咨询销售!




2020-02-22 11:16:06 790 0
新冠病毒检测中的气溶胶危机

伴随本次新型冠状病毒肺炎疫情,诸如“体外膜肺氧合(ECMO)”、“肺部磨玻璃影”、“粪口传播”等专业名词不断出现在大众视野。


其中,“气溶胶”一词在Z初的新闻报道中就被提及,在《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第六版)》对传播途径的描述中,也增加了“在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能”。


其实,普通大众一般不会接触到上述高浓度气溶胶从而被病毒感染,但对目前Z主要的确诊手段—核酸检测来说,检测人员是除一线医务人员以外Z有可能因为气溶胶而感染的群体。


那么,气溶胶到底是什么?在检测实验中会存在哪些危险?怎么来降低气溶胶引起的感染风险呢?


气溶胶,从广义来说是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系。在生物实验中可以认为是在外力作用下空气与液体样品的液面摩擦,样品的分散体系向空气中扩散形成分散体系。


可以引起气溶胶的操作有离心、剧烈振荡反应管、PCR开盖、移液器反复吸液等,分子实验中常发生的核酸污染假阳性,大多都是由气溶胶污染引起的。

核酸检测和同源测序是本次新冠肺炎确诊的两种主要方式,不断送入检验实验室的患者样本会进行核酸提取和荧光定量PCR或测序,这些实验操作都是基于分子水平的,因此核酸污染也有可能发生。

检测过程中产生的气溶胶可能会带来如下风险:

·引起样本间交叉污染造成假阳性,导致原本没感染的人被误确诊

·带有病毒的气溶胶扩散到实验室中,威胁到实验人员的安全,并可能造成整个实验室污染

·因此,除了要求在P2实验室、人员采用三级生物安全防护等,操作中尽量避免气溶胶的产生可以很大程度上减少上述风险的发生。


一些实验室已经采取措施方式来减少气溶胶的产生,如离心后静置、在生物安全柜中开盖、开盖后再静置、非必须混匀操作关闭仪器混匀功能、选用不需开盖的分析仪器等。


对于检测实验中频繁进行的移液步骤,使用滤芯吸头可以有效防止气溶胶进入移液器和扩散,减少移液过程中的气溶胶风险。


我们可以看到,使用普通吸头时,气溶胶伴随吸液操作进入移液器内部,移液器被污染。使用该移液器继续吸取下一个样品,就会造成样品间的交叉污染。使用被污染移液器进行检测试剂配制时会造成试剂污染,从而污染整个实验体系。如果因为操作不当造成气溶胶扩散,还会使病毒在实验室中扩散,进而威胁实验人员安全,整个实验室也将面临短时关闭来清除污染,这对检验需求巨大的地方来说并不是好消息。


如果使用滤芯吸头,气溶胶可以有效地被阻挡在滤芯下方,无法通过滤芯进入移液器,从而减少气溶胶带来的风险。

其实,一般的分子实验中都应该尽量选用滤芯吸头来降低气溶胶造成的污染风险,从而减少因污染带来的不必要花费,甚至面临实验室关闭的后果。对于包括本次新冠病毒在内的一些致病微生物的分子水平实验,滤芯吸头更能起到保护实验人员安全的作用。


梅特勒-托利多瑞宁(RAININ)拥有全面的移液解决方案,其滤芯吸头产品:

·滤芯采用纯聚乙烯烧结,可有效防止气溶胶污染

·吸头生产过程全自动化,滤芯安装和吸头装盒均由机器完成,全程无人员接触

·无DNA/NDase/RNase/热原/ATP/PCRYZ剂/蛋白质/蛋白酶等外源生物污染物

·多种包装的盒装滤芯吸头,可满足不同实验的操作需求

盒装滤芯吸头

双盒装滤芯吸头

单盒环保补充装滤芯吸头

环保盒装滤芯吸头

瑞宁(RAININ)通用滤芯吸头可匹配市面上主流移液器,目前正在进行买10赠1的优惠促销活动,有兴趣的小伙伴可以联系当地销售或经销商,或拨打客服热线 4008-878-788咨询。


2020-03-13 18:42:34 466 0
病毒保存液快速找到隐藏的新冠病毒

当疫情再一次伺机而动时,要想快速的控制病毒的传播,做核酸检测就成了必经之路,同时也备受各界关注。但影响核酸检测结果的因素是多种多样的,包括样本采集部位、采集方式、储运过程、核酸提取操作等等。其中,样本的稳定性是一个关键环节。如何能使病毒快速失活,又能保护病毒核酸不被降解,维持检测稳定性的病毒样本保存液就成了重中之重。

第yi步:打破外壳,消灭“战斗力”

和其他RNA病毒一样,新冠病毒的结果简单来说,是由蛋白质外壳包裹着单链核酸——RNA构成的。我们可以简单地将病毒的RNA视为发号施令的“大脑”,蛋白质则是执行命令的“四肢”。新冠病毒感染人体并发生繁殖活动,引发病症,这个过程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白结构完成。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一种强有力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致病毒结构破碎。当带有新冠病毒的临床样本与保存液混合,样本中的病毒受裂解液作用,蛋白质外壳被迅速破坏,并且这种破坏是不可复原的。这时候,病毒就失去了作恶的“爪牙”,不再拥有对人的感染能力,从而保障了样本运输、处理过程中接触者的安全。

第二步:抑zhi酶活,押送“身份证”

外壳裂解后,新冠病毒的RNA游离在保存液当中。作为单链大分子,RNA的稳定性不像双链的DNA那样岿然不动,在自然环境中随处存在的RNA酶便是使RNA水解断裂的罪魁祸首。因此,通常认为失去外壳保护的病毒RNA是脆弱、不稳定的,需要低温储存才能保证它的完整性。

第三步:配合提取,确认“真凶”

病毒RNA妥善地储存在病毒样本保存液中,在进行检测前,还需要zui后一个步骤:将保存液中的RNA捕捉、浓缩,作为zui终样本加入实时荧光PCR体系中,上机进行检测。

德晟生产的病毒保存液除了灭活型病毒保存液外,还有非灭活型病毒保存液。它是同时保留病毒的蛋白质外壳和病毒核酸DNA或者是RNA,这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。不管是哪种病毒保存液,我们在使用时都需要按照要求严格操作、存放或运输。


2021-08-12 11:13:08 453 0
Cole-Parmer为新冠病毒核酸检测助力

       2019年12月底武汉发现新型冠状病毒肺炎以来,感染确诊病例和疑似病例数量仍在不断上升,疑似病例的快速确诊迫在眉睫。目前临床上确诊新型冠状病毒肺炎病例,Z通用的方式仍然是在临床观察的基础上,采集痰液、咽拭子等呼吸道标本进行病毒核酸基因检测,并作出病原学诊断。目前核酸检测的准确性问题牵动了很多人的心,除去该病毒的一些特有特征外,检测过程中的每一个环节涉及的科学仪器和操作步骤都可能对结果产生影响。

       目前新冠状病毒核酸检测主要通过PCR检测的方法,其对试验场地、检验仪器及操作人员的要求都非常高,轻微的污染就可能对结果造成偏差。另外,对检测样本保存条件和设备也有很严苛的要求。并且,由于新冠状病毒的传染危险性,防护准备和后续的消毒处理对整个检测实验来说也异常重要。Cole-Parmer作为一家专业的科研仪器、设备、耗材供应商,可以为新冠状病毒核酸检测提供从防护,采样,样本保存,检测,消毒处理等各环节支持。相信jing准可靠的仪器设备及防护消毒产品一定能为这场战役中的检测工作添砖加瓦。Cole-Parmer与你们一起并肩作战!

Cole-Parmer相关仪器配置单*手套还有病毒防护丁 腈系列可选

       以下是新冠病毒核算检测实验的具体标准介绍,可供各位老师参考,其中涉及的仪器设备和耗材,疫情期间欢迎在微信平台直接联系我们,或者直接联系您当地的销售或经销商。

新冠病毒核酸检测实验

diyi步:样本采集

       通常是在采集地——定点发热门诊进行样本选取。样本一般为鼻咽或口咽拭子、气管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其阳性率非常高)

       在采集过程中,Cole-Parmer可为您提供防护服,护目镜,鞋套,以及手套等防护用品。

第二步、样本的包装、保存与运输

       通常采样管需经过3层包装,即:自封袋+运输罐+专用运输箱。在2-4℃进行保存,(通常保存不能超过72小时),再通过UN2814感染性物质专用运输箱,由经过生物安全培训的专人,全身着防护用品运送转运箱。

第三步、样本的核酸检测

  • 实验地点:基因扩增实验室

  • 实验条件:二级生物安全实验室(P2负压实验室)

  • 防护准备:检测人员需进行三级防护的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、医用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、护目镜和双层乳胶手套。如有条件可加穿一次性隔离衣。                       

  • 检测步骤:准备工作,核酸提取(手动),基因扩增与检测,结果分析     

1.准备工作

       实验仪器设备:二级生物安全柜,水浴或烘箱,移液器

       首先检查运输罐是否严格密闭,然后取出罐内的密封袋进行56℃下30分钟的消毒灭活,灭活后可从密封袋内取出采样管对采集的样品进行分装、混匀。

       整个过程应在二级生物安全柜内进行,灭活设备应尽量选择可放置于生物安全柜内的小型设备以减少样品进出安全柜内的次数。

2.核酸提取(手动)

       实验仪器设备:二级生物安全柜,移液器,振荡器,金属加热器,微型离心机

       首先需要依据不同品牌试剂盒的要求进行裂解液的配置。然后,采用化学试剂法对核酸样本进行裂解,样品裂解前需经过充分的振荡混匀,如有必要可采用金属加热器于56℃下充分裂解病毒所释放出的核酸。通过多次离心完成裂解产物的过滤收集。Z后利用离心纯化法对裂解后的核酸进行洗涤与回收。

3.基因扩增与检测

       实验仪器设备:生物安全柜,PCR板离心机,实时荧光定量PCR仪

       首先,需根据不同品牌试剂盒的要求将试剂盒内的不同组分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的体积量进行配置,并充分离心混匀。然后将核酸样本依次加入至每个PCR反应管中,加盖密闭后进行充分的混匀、离心。Z后,将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中,按照试剂盒说明书的要求进行扩增参数的设置后即开始检测。

4.结果分析

       Z后,通过计算出的CT值,依据检测试剂盒厂家说明书的判断标准进行判定,阳性、阴性或者不确定。

第四步、未测样品的保存

       如样本未能及时检测,需将样本于-70℃或以下进行保存。Cole-parmer专为您提供保存样品的Cole-parmer超低温冰箱。

第五步、消毒处理

       生物安全柜内:对台面、仪器、外层手套进行消毒,相关垃圾投入专用YL垃圾桶中。并开启紫外灯照射生物安全柜,时长应不低于30分钟。

       核酸检测实验室内:对实验室台面、地面进行消毒,并开启紫外照射灯进行空间消毒,时长应不低于30分钟。

       实验人员:按自上而下、由内而外的顺序依次摘脱三级防护穿戴,并置于专用YL垃圾桶内。

       YL垃圾:所有与新型冠状病毒相关的YL垃圾需经过湿热高压灭菌(121℃,30分钟)后再作为普通的YL垃圾处理,且垃圾袋上应标注新型冠状病毒YL垃圾的相关信息。


        注意:实验试剂、设备等需取得YL器械注册证,科学研究除外。



2020-02-17 09:46:59 468 0
新冠病毒或将诱发“痴呆症浪潮”

      一项发表在Journal of Neurophysiology上,题为“COVID-19 and olfactory dysfunction: a looming wave of dementia?”的评论表示,新冠感染所导致的嗅觉丧失或许会增加感染者晚年患上痴呆症的风险,或会因此导致未来出现 “痴呆症浪潮”!

 

图1 评论截图

      嗅觉丧失是新冠病毒感染的标志性症状之一,约有77-85%的感染者因新冠病毒而出现嗅觉丧失或嗅觉异常,大部分人会很快恢复,但是会有一部分人经历持续性嗅觉丧失或嗅觉异常。既往有研究表明,新冠感染者的嗅觉上皮(位于鼻子上部,靠近嗅觉神经进入大脑嗅球的位置)中携带高病毒载量。

      而嗅球是大脑中管理嗅觉并将感觉信息发送到大脑其他区域进行处理的结构,这些大脑区域与学习、记忆和情感有关,正如评论作者Leslie M.Kay博士所说:“所有这一切都意味着嗅球所关涉的远不止嗅觉,它还涉及记忆、环境、情感以及其他许多过程”。也正因为如此,新冠病毒影响的也不只嗅觉障碍,很有可能会影响人的相关认知功能,由于嗅觉上皮细胞靠近嗅球,即使在康复后,新冠感染也可能会影响认知功能。

阿根廷的研究人员与阿尔茨海默症协会联盟合作研究了新冠感染导致的慢性神经精神后遗症,他们对766名年龄在55岁***95岁的人群进行了一年的跟踪调查,对他们进行了一系列的身体、认知、神经、嗅觉等功能测试。研究人员发现,新冠导致的持续性嗅觉丧失是认知障碍的一个重要预测因素。

      评论作者表示:“以前的流行病也支持这样的理论,即病毒入侵神经系统可能是神经退行性病变的触发因素,导致神经功能受损。该审查提供的证据表明,通过新冠病毒感染和免疫反应引入嗅觉神经的炎症和对嗅球的损害也可能导致与嗅觉系统相关的大脑结构退化和认知障碍”。

      新冠病毒感染对神经系统健康的影响越来越明显,休斯顿卫理公会的研究人员的一项***新研究发现,新冠病毒可使人们易患不可逆转的神经系统疾病,加速大脑老化,并增加中风和脑出血的风险。这项研究发表在Ageing Research Reviews上,题为“SARS-CoV-2 and the central nervous system: Emerging insights into hemorrhage-associated neurological consequences and therapeutic considerations”,研究表明,新冠感染会增加个体罹患神经系统疾病、中风、持续性脑损伤的几率。

 

图2 研究成果(图源:[2])

研究表明:

■ 血脑屏障的主要成分、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞能够表达ACE2受体,其与SARS-CoV-2结合并紧密连接,导致神经炎症增加;

■ 脉络丛细胞中的SARS-CoV-2感染可能影响人脑中的神经干细胞生态位,导致长期的神经病理学并发症;

■ 新冠感染者死后,其大脑中活化的小胶质细胞和星形胶质细胞亚群类似于AD等神经退行性疾病的病理特征。

      研究人员推测,新冠病毒感染可以刺激许多致病机制的激活,进而导致新冠感染者出现复杂形式的神经退行性疾病。

 

图3 新冠感染引起的大脑微出血及其潜在后果(图源:[2])

此外,研究还表明:

■ 感染新冠病毒之后,感染者可能会出现慢性心血管异常,这或许是由于脑干和延髓区域的微出血相关神经元损伤而导致的;

■ 凝血通路的过度激活导致15-30%对抗凝和抗预防无反应的患者出现静脉血栓栓塞和血栓形成;

■ 新冠感染可能导致涉及脑内皮细胞和微血管系统的CNS微血栓栓塞事件;

■ 微出血是大脑衰老的预测因子,形成大量微出血可能表明新冠患者的大脑加速老化;

■ 微出血在病理上与神经退行性病变、认知障碍和痴呆有关。

      综上,研究表明,新冠感染引起的关键大脑区域微出血有可能加速感染者的大脑衰老,还可能导致复杂且不可逆转的神经退行性疾病,这是认知和运动功能的危险因素。

     片段筛选磁珠作为高通量测序中的关键原料,是影响整体实验结果的重要部分。如何对片段筛选磁珠进行稳定性的规模化生产,也是各类磁珠厂商要面临的问题。洛阳吉恩特生物科技有限公司作为生物磁珠的生产厂家,对片段筛选磁珠的关键工艺进行长期、大量的优化,通过在实际应用场景中的反复测试,目的片段筛选准确,尤其对于200-500bp的片段,筛选效果良好稳定,并且磁珠的磁响应速度快,可以在较短的时间内完成实验,筛选结果可直接进行下游环节。


2022-09-01 09:08:09 155 0
为健康护航 | 监测废水中的新冠病毒


随着新冠疫情下经济的进一步开放,大部分国家都通过采取保持社交距离、隔离封锁等措施控制病毒传播,但也随时面临着病毒卷土重来的风险。而通过监测废水中新冠病毒(SARS-CoV-2)的浓度推算病毒在当地人群中的感染情况,可以实现对城市总体感染水平的实时监测和预警,为公共卫生部门决定是否采取禁闭等措施赢得时间。

废水监测一直是追踪病毒在人群中流行的有效手段,可以用来监测针对病毒传染干预措施的有效性。例如,科学家们通过废水监测评估了脊髓灰质炎疫苗接种的有效性。据《自然》杂志报道,已有十多个研究小组正通过监测废水中新冠病毒颗粒推算当地的新冠肺炎感染情况。患者感染新冠病毒后3天内,其粪便中即可检出病毒。排泄物随着排水系统流入废水处理厂之后,研究人员可通过废水中病毒RNA的含量揭示城市新冠病毒感染人数的规模,从而为及时阻断疫情传播的风险拉响早期警报。

废水中SARS-CoV-2的监测有望成为新冠病毒流行的监测方法和预警手段之一,为新冠病毒疫情的实时监控提供了新的分析工具。

PerkinElmer® 废水监测新冠病毒检测方案

PerkinElmer废水监测新冠病毒检测方案包含了新冠病毒检测试剂;自动化病毒RNA提取试剂及仪器;分别用于原始样品转移、QPCR体系构建的JANUS自动化工作站系统。通过完整的新冠检测解决方案,PerkinElmer可以帮助您的实验室建立灵活的工作流程,用于废水中新冠病毒的监测。

新冠病毒检测试剂

PerkinElmer®SARS-CoV-2新冠病毒核酸检测试剂盒具有灵敏度高、特异性强等特点,为基于废水的流行病学监测提供了优化的解决方案。

PerkinElmer®SARS-CoV-2新冠病毒核酸检测试剂盒优点:

灵敏度高:检测下限低,敏感的SARS-CoV-2检测

准确性高:全过程控制,包括外部、内部控制

特异性强:SARS-CoV-2orf1ab和N基因的检测

灵活性高:灵活性:自动化操作,可提供灵活的通量

病毒RNA提取

Chemagen核酸提取技术特点:

安全:ZLM-PVA亲水性磁珠,提取全流程在室温条件下进行,无需加热,在保证核酸高得率与高纯度的同时,有效防止加热可能导致的气溶胶污染。

gao效:ZL的电磁分离技术,可实现独有的磁棒自旋转式混匀,充分混匀反应体系,液面平稳,有效避免孔间交叉污染。

省力:内置自动化分液器,提取过程中自动添加试剂,大大减少手工操作时间。

灵活:样品通量灵活,可实现提取1-96样本/批。

Chemagic360是基于电磁原理进行磁珠分离的高通量自动化核酸提取仪,可从各种类型样本中提取核酸,通过金属棒自我旋转混匀而不是上下震荡方式进行反应体系的混匀,可以有效降低样本间交叉污染的风险;该系统内置自动分液器,除样本和部分小体积试剂需要手工加入提取体系之外,其余核酸提取试剂均自动加入,可大大减少手工操作时间。内置控制电脑,触摸屏操作。结合chemagic自动化病毒RNA提取试剂盒,可得到高质量的病毒RNA,一次可实现1-96个样品的灵活通量。

JANUS®  G3 自动化液体处理工作站

JANUS® G3 原始样品分装工作站:用于自动化离心后原始管样品的转移及部分核酸提取试剂的准备。可对样品进行安全、可追踪的条形码扫描,并将来自原始管中多达192个样品重新格式化到对应样品孔板中,用于病毒核酸提取;同时也用于部分核酸提取试剂的准备。

JANUS® G3 PCR体系构建工作站:自动化病毒RNA的qPCR体系构建。2块96孔板PCR板的制备只需16min,四块板32min,zui大限度地提高通量,具有样品通量灵活、移液jing准度高等优点。

PerkinElmer提供了用于完整的基于废水监测的新冠病毒检测方案,客户可以根据情况建立灵活的废水监测新冠病毒监控工作流程。同时,PerkinElmer可以提供explorer G3自动化整合系统,可实现样本从原始管上样、核酸提取到QPCR检测全流程的高通量、自动化检测。该系统采用模块化设计、可扩展升级的explorer G3自动化整合系统,每天可处理10000份样品,可zui大限度地提高您实验室的新冠病毒检测能力。

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1 监测废水中的敏感SARS-COV-2病毒

2 饮用水中亚硝胺类化合物的检测

3 捕集阱顶空-气质联用仪(HS-GCMS) 用于分析水中挥发性有机物(VOCs)

4 高通量进样系统在电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析饮用水中的优势(方法200.8)

5 QSightLC-MS/MS 测定污水中毒品整体解决方案

6 用单粒子ICP-MS对废水中的银纳米颗粒的分析测量


2020-10-19 16:08:16 484 0
新冠病毒面前,你使用的消毒剂合格吗?

具有广谱抗 菌活性且价格实惠的次氯酸钠(NaOCl)是最常见的家用和商用消毒剂成分,也因此成为抗击COVID-19最常使用的消毒剂。正如个人防护装置的生产和使用需要一系列安全操作规程一样,次氯酸钠的生产也同样需要一套质量控制体系,限制接触浓度,以确保家用和工业增强型漂白剂中次氯酸钠的含量在可接受的范围之内,避免对人体造成伤害。 

碘还原滴定法是测定次氯酸盐的标准方法,尽管十分有效,但制备样品时需用到较多的化学试剂,成本高且耗时。相比之下,UV-Vis光谱仪能在30秒内测定样品,无需使用过多的化学试剂。珀金埃尔默的LAMBDA® 365 UV-Vis光谱仪(图1)为次氯酸钠的测定提供快速且GX的解决方案,适用于需要高度精度和效率的QA/QC分析。

图1. 珀金埃尔默LAMBDA 365 UV/Vis光谱仪

实验条件

表1. 测定消毒剂中次氯酸钠含量的仪器参数

校准曲线

记录292nm处次氯酸钠吸光度随其浓度的变化,建立校正曲线。校准试样的UV/Vis光谱如图2中所示。校正曲线如图3所示,线性相关系数R2=0.9999,体现出高度的线性相关度。

图2. NaOCl标准样品的UV/Vis光谱

图3. 292nm处的次氯酸钠校正曲线

方法验证

使用三种不同的验证溶液和商用漂白剂试样,进行方法验证,结果如表2所示。

表2. 验证结果

实验结果表明,经过校正稀释系数后,漂白剂试样中次氯酸钠含量为5.40%。测量10份同样的0.015%试样,进行方法精确度验证,相对标准偏差(RSD)仅为0.07%,表明数据高度精确。测量5份同样的空白溶液,根据公式LOD=yB+3sB确定方法检出限(LOD)。结果表明该方法的检出限为0.0002%NaOCl,灵敏度极高。

结论

LAMBDA 365 UV/Vis光谱仪能为消毒剂中次氯酸钠的定量检测提供更加快速、准确的结果,有助于QA/QC实验室分析员节省时间和费用。对于消毒剂中次氯酸钠的定量检测而言,珀金埃尔默LAMBDA 365不失为一种快速且性能强大的解决方案,还可与UVWinLab或UVExpress软件搭配使用。UVWinLab允许用户zui大限度地控制仪器参数,提供了先进的数据分析选项。UVExpress使用简化的“指点式”解决方案,无论是否有分光光度计使用经验都可以轻松操作。

欲详细了解珀金埃尔默消毒剂中次氯酸钠定量检测解决方案,扫描下方二维码即刻获取《消毒剂中次氯酸钠的定量检测》,或与珀金埃尔默当地销售人员联系。

2020-12-11 16:11:18 432 0
新冠病毒检测之Chemagen自动化核酸提取方案

2020庚子鼠年有一个不一样的开场,一场新冠病毒性肺炎疫情牵动着国人的心。目前,疫情防控工作正进入攻坚阶段。早发现、早隔离、早ZL正是有效控制疫情发展的有效举措。根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第五版 修正版)》,新冠肺炎确诊标准之一是新型冠状病毒核酸检出阳性。然而近期媒体报道,在疑似患者人群中,新冠病毒核酸检出阳性率低于50%,导致多数患者不能得到确诊。这可能与样本采集、核酸提取和RT-PCR等多环节的质控密切相关,而核酸提取作为检测流程中非常重要的环节,其良好的性能对检测结果至关重要。

全面的核酸提取解决方案

珀金埃尔默专业的chemagen技术在核酸提取方面的优势有目共睹:

一、安全

ZLM-PVA亲水性磁珠,提取全流程在室温条件下进行,无需加热,在保证核酸高得率与高纯度的同时,有效防止加热可能导致的气溶胶污染。

二、GX

ZL的电磁分离技术,可实现独有的磁棒自旋转式混匀,充分混匀反应体系,液面平稳,有效避免孔间交叉污染。

三、省力

内置自动化分液器,提取过程中自动添加试剂,大大减少手工操作时间。

四、灵活

多种机型可选,灵活的提取通量,可实现提取1-192样本/批。

 

Chemagic Prepito-D自动核酸提取仪

Prepito-D是一款桌面式小型自动化核酸提取仪,批处理通量为1~12,可对血液、血浆、咽拭子、唾液、组织等多种类型的样本进行自动化的核酸提取,提取过程中,试剂通过内置分液器进行自动添加。

 

Chemagic 360 自动核酸提取仪

Chemagic360是基于电磁原理进行磁珠分离的高通量自动化核酸提取仪,可从各种类型样本中提取核酸,通过金属棒自我旋转混匀而不是上下震荡方式进行反应体系的混匀,可以有效降低样本间交叉污染的风险;该系统规格为:90cm*90cm*95cm,内置自动分液器,除样本和部分小体积试剂需要手工加入提取体系之外,其余核酸提取试剂均自动加入,可大大减少手工操作时间。三个规格(12、24与96)提取头可选,可实现1~96个/批次,可处理10µL~10mL的原始样本,单孔反应体系1.5mL~40mL,真正实现大体积样品核酸提取。内置控制电脑,触摸屏操作。

 

Chemagic Prime 全自动核酸提取与体系构建系统

Chemagic Prime是PerkinElmer JANUS自动化液体处理工作站与Chemagic 360自动核酸提取仪的wan美整合,可以实现高通量无人值守的自动化核酸提取。

除了兼具Chemagic 360的所有性能特点之外,Chemagic Prime可以实现不同规格原始样本管上机,自动化条码扫描,试剂分装及提取产物的转移、分装、浓度均一化等操作,还可以自动化构建PCR反应体系。可并行处理2块96孔板,是一款真正高通量无人值守的全自动化核酸提取设备。

仪器与配套提取试剂盒信息

 

另外,PerkinElmer自动化机器人整合系统(ARS),可整合存储板栈、JANUS G3液体处理工作站、chemagic 360自动核酸提取仪、封膜机以及主流荧光定量PCR仪,实现样本从原始管上样、核酸提取到RT-PCR检测全流程的无人值守式自动化检测方案,通量更高,有效提高样本检测效率,保护实验人员免于感染风险。

 

自动化机器人整合系统(ARS

全力支持各地的公共卫生、YL部门及科研院校使用核酸提取技术是珀金埃尔默积极抗击新冠肺炎疫情的承诺。我们将时刻做好准备,与疫情抗争,赢得这场新冠战“疫”。


2020-02-13 15:33:40 954 0
新冠病毒快速检测试剂盒研发!Z快2分钟完成检测,准确率97%以上!

作者:年年 公众号:检测家

当前,正值复工、复产与抗击新冠肺炎疫情并举的关键时刻,浙江省科技厅组织的新冠病毒检测攻关项目传来好消息!

由杭州医学院吕建新教授担任首席科学家,杭州医学院、浙江东方基因生物制品股份有限公司、浙江省疾病预防控制ZX三方组成的联合攻关组研制的三类产品(病毒核酸、抗体、抗原检测)中的病毒核酸和病毒抗体两类产品取得突破,已开发完成了新冠肺炎病毒(2019-nCoV)核酸诊断试剂盒,现又开发完成了新型冠状病毒 IgM/IgG抗体检测试剂(胶体金法)

图源浙视频


新冠肺炎核酸诊断试剂盒已完成近500例临床样本验证,试剂盒无需样本核酸提取,融合样品裂解液于扩增体系,咽拭子、痰液等临床标本洗液或标本保存液免核酸提取直接进入PCR体系,实现闭管封闭式扩增Z快29 分钟左右完成检测,灵敏度达 300 拷贝/毫升以下,与现有制备核酸后检测的病毒实时荧光 PCR 试剂相比,符合率超过97%,特异性高于99%,且更快速和安全。

免提取一步法核酸荧光PCR检测结果


经大量实验室以及临床样本验证,表明IgM/IgG双指标快速诊断胶体金试剂,Z快2分钟完成检测。


该检测操作简便,无需仪器,只需10 μL指尖全血滴入检测孔,对感染3-7天的样本即可检出,准确率97%以上,从而极大降低检测时感染风险。

图源浙视频


检验抗体呈阳性结果则表明:患者当前处于感染状态或既往感染。已开发完成的胶体金快速检测产品,可大量用于企业复工、大型活动甄别、学校返校、家庭自测等应用场景。


联合攻关组开发的病毒抗体二联检,可进一步排除假阳性、假阴性,实现快速便捷确诊。正在开发中的病毒抗原检测试剂也取得重要进展,后续三联检有望将进一步缩短检出时间,提高特异性和灵敏性。

IgM/IgG抗体胶体金检测试纸


目前,新型冠状病毒核酸检测试剂盒(免提取荧光PCR法)、新型冠状病毒胶体金检测试剂,已经在欧盟注册备案。


近日,已陆续接到来自于英国、法国、瑞士、奥地利、格鲁吉亚、印度、日本、美国等国家和地区的订单。


在国内,攻关团队正加大法定检测机构临床试验和注册检验力度,积极组织各种生产物料,生产线,大批量生产新型冠状病毒IgM/IgG的抗体检测试剂(胶体金法)和核酸诊断试剂盒,用于抗击新冠肺炎疫情。


*文章素材来源网络、浙江新闻、浙视频,侵删



2020-02-25 14:03:37 880 0

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