动物源食品中激素多残留测定的前处理方法
检测对象: | 激素 |
具体物质: | 去甲雄烯二酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、诺龙、雄烯二酮、睾酮、普拉雄酮、甲睾酮、异睾酮、表雄酮、康力龙、17β- 羟基雄烷-3-酮、美睾酮、达那唑、美雄诺龙、羟甲雄烯二酮、美雄醇、雌二醇、雌三醇、雌酮、炔雌醇、己烷雌酚、己烯雌酚、己二烯雌酚、炔诺酮、21α-羟基孕酮、17α-羟基孕酮、左炔诺孕酮、甲羟孕酮、乙酸甲地孕酮、孕酮、甲羟孕酮乙酸酯、乙酸氯地孕酮、曲安西龙、醛固酮、泼尼松、可的松、氢化可的松、泼尼松龙、氟米松、地塞米松、乙酸氟氢可的松、甲基泼尼松龙、倍氯米松、曲安奈德、氟轻松、 氟米龙、布地奈德、丙酸氯倍他索 |
应用范围: | 食品/动物源性食品/猪肉、猪肝、鸡蛋、牛奶、牛肉、鸡肉和虾 |
方法原理: | 试样中的目标化合物经均质,酶解,用甲醇-水溶液提取,经固相萃取富集净化,液相色谱-质谱/质谱仪测定,内标法定量。 |
前处理仪器: | 分析天平:感量 0.0001 g;天平:感量 0.01 g;组织匀浆机; 涡旋混合器;恒温振荡器;超声清洗仪;离心机:10000 r/min; 固相萃取装置;氮吹仪; pH 计。 |
检测仪器: | LC-MS |
试样制备: | 1. 动物肌肉、肝脏、虾 从所取全部样品中取出有代表性样品约 500 g,剔除筋膜,虾去除头和壳。用组织捣碎机充分捣碎均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于-18℃以下冷冻存放。 2. 牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品约 500 g,充分摇匀,均分 成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于 0 ℃〜 4 ℃以下冷藏存放。 3.鸡蛋 从所取全部样品中取出有代表性样品约 500 g,去壳后用组织捣碎机充分搅拌均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密 封,并标明标记,于 0 ℃〜4 ℃以下冷藏存放。 |
前处理方法: |
1.提取: 称取 5 g 试样(精确至 0.01 g)于 50 mL 具塞塑料离心管中,准确加入内标溶液 100 μL 和 10 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液,涡旋混匀,再加入 β-葡萄糖醛酸酶/芳香基硫酸酯酶溶液 100 μL,于 37 ℃士 1 ℃振荡酶解 12 h。取出冷却至室温,加入 25 mL 甲醇超声提取 30 min,0 ℃〜4℃下 10000 r/min 离心10 min。将上清液转入洁净烧杯,加水 100 mL,混匀后待净化。2.净化: 提取液以 2 mL/min〜3 mL/min 的速度上样于活化过的 ENVI-Carb 固相萃取柱。将小柱减压抽干。再将活化好的氨基柱串接在 ENVI-Carb 固相萃取柱下方。用 6 mL 二氯甲烧-甲醇溶液(7 + 3,体积比)洗脱并收集洗脱液,取下 ENVI-Carb 小柱, 再用 2 mL 二氯甲烧-甲醇溶液(7 + 3,体积比)洗氨基柱,洗脱液在微弱的氮气流下吹干,用 1 mL 0.1 %甲醇-水溶液溶解残渣,供仪器测定。 |
注意事项: | 1. 乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 5.2)的配制方法为:称取 43.0 g 乙酸钠(NaAC.4H20),加入 22 mL 乙酸,用水溶解并定容到 1000 mL,用乙酸调节 pH 到 5.2。 2. 加入 β-葡萄糖醛酸酶/芳香基硫酸酯酶溶液 100μL,于 37 ℃士 1 ℃振荡酶解 12 h,保证温度稳定,±1℃,时间足 够,水解完全。 3. 甲醇-水溶液提取超声提取,冷冻离心,提高提取效率。 4. 固相萃取柱的上样速度应低于 2 mL/min〜3 mL/min。 够,水解完全。 5. 甲醇-水溶液提取超声提取,冷冻离心,提高提取效率。 6. 固相萃取柱的上样速度应低于 2 mL/min〜3 mL/min。 7收集液氮吹时应控制温度保持在 40 ℃以下,切记不能提高温度以节省氮吹时间。调节适当的气流大小,防止气流过大, 液体溅出。用氮气吹至近干,避免待测物被吹至过干残留于试管内壁,再次溶解不完全,影响回收率 |
参考文献: | 1.ZG国家标准化管理委员会.GB/T 21981-2008,动物源食品中激素多残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法[S].北京:ZG标准出版社,2006. |
产品编号: | 产品名称 | 标准值 | CAS号 | 规格 | |
1 | 72727-10mg | 甲睾酮-D3同位素标准品 | CP:99.%;IE:>98% atomD | 标记:96425-03-5;未标记:58-18-4 | 10mg |
2 | 71908 | 康力龙 | 99.90% | 10418-03-8 | 10mg |
3 | 75537 | 美雄诺龙 | -- | 521-11-9 | 250mg |
4 | 71114 | 雌三醇 | 99.00% | 50-27-1 | 100mg |
5 | BW901273-1000-A | 甲醇中雌酮 | 1000μg/mL | 53-16-7 | 1.2mL |
6 | 71108 | 雌酮 | 99.40% | 53-16-7 | 100mg |
7 | 71232 | 炔雌醇(含干冰运输费) | 98.90% | 57-63-6 | 250mg |
8 | 71505 | 己烷雌酚(Hexestrol) | 99.80% | 84-16-2 | 100mg |
9 | GBW(E)082466 | 甲醇中己烯雌酚 | 200μg/mL | 56-53-1 | 1.2mL |
10 | 70683 | 己烯雌酚 | -- | 56-53-1 | 100mg |
11 | 71506 | 双烯雌酚(己二烯雌酚,Dienestrol) | 96.60% | 84-17-3 | 25mg |
12 | 71999 | 21α-羟基孕酮/去氧皮质酮 | 99.00% | 64-85-7 | 10mg |
13 | 71717 | 17α-羟基孕酮(含干冰运输费) | 99.40% | 68-96-2 | 100mg |
14 | 71676 | 甲羟孕酮 | 97.90% | 520-85-4 | 100mg |
15 | 75408 | 甲羟孕酮乙酸酯 | -- | 71-58-9 | 100mg |
16 | BW902311-1000-A | 甲醇中泼尼松 | 1000μg/mL | 53-03-2 | 1.2mL |
17 | BW902311-100-A | 甲醇中泼尼松 | 100μg/mL | 53-03-2 | 1.2mL |
18 | 71621 | 泼尼松 | 99.76% | 53-03-2 | 10mg |
19 | 75540 | 可的松 | -- | 53-06-5 | 500mg |
20 | 71593 | 氢化可的松 | 99.90% | 50-23-7 | 250mg |
21 | BW902313-1000-A | 甲醇中氢化可的松 | 1000μg/mL | 50-23-7 | 1.2mL |
22 | BW902313-100-A | 甲醇中氢化可的松 | 100μg/mL | 50-23-7 | 1.2mL |
23 | BW902312-1000-A | 甲醇中泼尼松龙 | 1000μg/mL | 50-24-8 | 1.2mL |
24 | BW902312-100-A | 甲醇中泼尼松龙 | 100μg/mL | 50-24-8 | 1.2mL |
25 | 71603 | 泼尼松龙(含干冰运输费) | 97.00% | 50-24-8 | 250mg |
26 | 91032GH | 乙腈中泼尼松龙 | 100μg/mL | 50-24-8 | 1mL |
27 | BW902401-100-A | 甲醇中氟米松 | 100μg/mL | 2135-17-3 | 1.2mL |
28 | BW902401-1000-A | 甲醇中氟米松 | 1000μg/mL | 2135-17-3 | 1.2mL |
29 | 71658 | 氟米松(含干冰运输费) | 98.60% | 2135-17-3 | 100mg |
30 | BW902315-1000-A | 甲醇中地塞米松 | 1000µg/mL | 1950/2/2 | 1.2mL |
31 | BW902315-100-A | 甲醇中地塞米松 | 100µg/mL | 1950/2/2 | 1.2mL |
32 | 71106 | 地塞米松 | 97.00% | 1950/2/2 | 100mg |
33 | BW902314-1000-A | 甲醇中甲基泼尼松龙 | 1000μg/mL | 83-43-2 | 1.2mL |
34 | BW902314-100-A | 甲醇中甲基泼尼松龙 | 100μg/mL | 83-43-2 | 1.2mL |
35 | 71677 | 甲基泼尼松龙(含干冰运输费) | 98.00% | 83-43-2 | 50mg |
36 | BW902317-100-A | 甲醇中倍氯米松 | 100μg/mL | 4419-39-0 | 1.2mL |
37 | BW902317-1000-A | 甲醇中倍氯米松 | 1000μg/mL | 4419-39-0 | 1.2mL |
38 | 75292 | 倍氯米松 | 98.00% | 4419-39-0 | 100mg |
39 | BW902400-1000-A | 甲醇中曲安奈德 | 1000μg/mL | 76-25-5 | 1.2mL |
40 | BW902400-100-A | 甲醇中曲安奈德 | 100μg/mL | 76-25-5 | 1.2mL |
41 | 71689 | 曲安奈德 | 98.00% | 76-25-5 | 250mg |
42 | 75799 | 醋酸肤轻松 | -- | 67-73-2 | 250mg |
43 | 91030GH | 乙腈中氟米龙 | 100μg/mL | 426-13-1 | 1mL |
44 | 75527 | 氟米龙 | -- | 426-13-1 | 250mg |
45 | BW902395-1000-A | 甲醇中丙酸氯倍他索 | 1000μg/mL | 25122-46-7 | 1.2mL |
46 | BW902395-100-A | 甲醇中丙酸氯倍他索 | 100μg/mL | 25122-46-7 | 1.2mL |
47 | 71670 | 丙酸氯倍他索(含干冰运输费) | 99.40% | 25122-46-7 | 100mg |
48 | 90008GH | 乙腈中黄体酮 | 100μg/mL | 57-83-0 | 1mL |
49 | 71053 | 孕酮(黄体酮) | 99.10% | 57-83-0 | 250mg |
50 | BW901274-1000-A | 甲醇中炔雌醇 | 1000μg/mL | 57-63-6 | 1.2mL |
51 | 80719GA | 甲醇中9种激素类混标 | 100μg/mL | -- | 1mL |
52 | 80718GA | 甲醇中8种糖皮质激素类混标 | 100μg/mL | -- | 1mL |