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本文转自http://www.easylabplus.com/index-news-describe-html-749.html
鬼峰是液相色谱中Z常出现的问题之一，鬼峰来源多种多样，理论上讲，在HPLC系统中任何一个节点均有可能引入鬼峰，依据鬼峰出现的频率，其主要来源于溶剂问题，仪器问题、流动相残留气泡以及操作不当等。主要分为以下几种情况 ：
1.溶剂问题
a有机溶剂
甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单，杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广，所以当使用紫外检测器时，尤其是波长较低时，尽量使用乙腈作为有机相，用甲醇的话漂移太大。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高，一般用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。 另外如果有机相使用完后未更换新的流动相瓶，而是采用直接添加补充的方式也有可能会产出鬼峰。
b水
很多单位用自制蒸馏水作为水相，但是结果并不是很好。原因就是一些低沸点的有机杂质并不能够通过蒸馏除掉。有条件的尽量用HPLC级的纯水，没有条件的也可用娃哈哈或是屈臣氏等水代替，但是如果色谱条件比较严格也是有可能出问题的。 此外，水相要现配现用，避免微生物滋长。
c其它试剂
缓冲盐、TFA、EDTA等试剂也会对流动相造成很大的影响，尽量用纯度高的试剂配制流动相。
2.仪器问题
a液相的流动相管路被污染
长时间的使用含水量较高的流动相（尤其是加入缓冲盐的），细菌就容易在管路中滋生，细菌的代谢产物或是细胞碎片能造成鬼峰。
b检测器样品残留
多为一些样品组分在检测器流通池内的残留，其特点具有先后针之间的重复性差，或者没有重复性，色谱峰峰形特别尖锐类似大的毛刺。该种情形下，需要对流通池特别是石英视窗进行彻底清洗(联系工程师或者严格按照manual进行)
c单向阀堵塞
造成系统压力不稳，从而产生鬼峰。早期岛津的液相单向阀貌似不能用纯乙腈作为流动相，现在应该已经得到改进。
d色谱柱中组分残留
色谱柱可对流动相或系统流路内的强保留污染组分起到富集作用，在有机相比例随梯度程序变化的过程中而被冲洗出来。在使用较长的色谱柱的时候尤其值得关注，因此，在水相不确定是否有杂质存在的条件下，梯度运行后的再平衡时间尽可能的短，一般以10倍柱体积为宜。
3.流动相残留气泡
保留时间一般不可重现，即使流路中气泡连续存在，鬼峰出现的位置亦不可预测。可将流动相超声或鼓He脱除气泡并打开purge阀，大流速冲出仪器管路中的气泡，来减少气泡引起的鬼峰现象。
a在线脱气机脱气不完全
a在线脱气机脱气不完全。
b两种流动相的有机相比例相差太大
例如A为水，B为乙腈。在梯度条件允许的情况下尽量减少两中流动相之间的差距，降低空气在两中流动相中溶解度的差异，从而减少气泡的产生。
c流动相配置好后预先超声脱气
c流动相配置好后预先超声脱气。
4.操作问题
a流动相配置过程中受到污染
盛放流动相的容器或是样品瓶受到污染：这种污染可能来自于洗涤剂、铬酸洗液或是其他实验人员用完后的残留杂质。流动相容器的清洗一般用干净的水+有机溶剂涮洗就行，过多的清洗步骤反而可能造成二次污染。有时流动相容器的塑料盖碎片都有可能是杂质的来源。对于样品瓶污染情况下的鬼峰，容易排除，仅需要分别将样品溶解或稀释用的试剂以及进样小瓶更换，即可确定鬼峰的来源。
pH计：很多pH计以聚碳酸酯作为外壳，然而聚碳酸酯是可以溶于有机溶剂的，所以尽量使用玻璃pH计来测量流动相的pH。
滤膜：劣质的或者型号错误的滤膜往往是鬼峰出现的原因。
放置时间过长：流动相在空气中暴露时间过长，就可能吸收空气中的有机杂质，有时流动相中的添加剂，例如TFA，时间长了会氧化从而产生杂质。
由自动进样器引入的鬼峰：自动进样器在进样之后，部分样品溶液残留在进样针头以及针座之上，对下次进样别的样品的结果产生干扰，出现鬼峰。对于一些强吸附性组分，尽管进行程序洗针，有时依然可能会引入鬼峰。针对这种情形，可在仪器平衡之后，分别进样不同试剂的Blank以及不进样，比较得到的图谱，基本可确定鬼峰是否来源于进样过程。
b样品稀释液与流动相极性或者pH相差太大
这也是导致鬼峰的原因之一，这种问题很有可能导致样品分为两个不同的阶段出峰，从而产生双峰或者多峰。
鬼峰对于反相液相色谱来说，是经常遇到的问题，对分析方法造成干扰并影响分析结果的准确性。从上面的讨论可以看出，尽管鬼峰的来源多种多样，基本应对原则就是，找到鬼峰的来源，更换流动相或更换添加剂或对仪器被污染部分进行清洗，在实验中避免不正确的操作。
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