本应用简要提出了一种微流体心肌细胞培养模型(microfluidic cardiac culture model, μCCCM),通过使用法国Elveflow微流控OB1压力和流量控制器来重建在天然心脏(正常和病理条件下)中观察到的机械负荷条件。位于芯片内部的心脏细胞通过3D细胞培养获得。
微流控OB1智能界面ESI软件允许轻松配置复杂功能(如正弦、方形、常数等),并将它们添加到项目调度程序(project scheduler)中,以便模拟跳动心脏(压力、应变和剪切应力)的众多生理效应,从培养中的细胞到基因表达,生长和分化所必需的体内各种模拟条件。
可能的应用:
-再生医学/干细胞
-药物发现和测试
-研究其他细胞类型
本应用用到的组件清单
1、Elveflow压力和流量控制器OB1
2、样品池,每个样品池对应一种介质。
3、微流体导管
4、微流体配件和连接器
5、微流体器件(三叉口型微流控芯片)
Elveflow微流控灌注套装(Perfusion pack)
使用我们的专用Perfusion Pack可以在连续灌注下进行细胞生物学实验,微流体Perfusion Pack套装将会另加介绍。如有需要,请联系我们,我们也会根据您的特定应用研究来调整套装的组件组成。
介质重新添加而不会出现任何脉冲
1、流体流速:0.1 μL/min – 5 mL/min
2、轻松注入药物或试剂
3、兼容各种载玻片或灌注室
本实验的实验装置
尽可能避免使用软管(Tygon管),其会增加系统的响应时间。下图给出了本应用的实验连接图。
实验协议
这里向您介绍如何使用Elveflow智能界面ESI设置一系列功能和压强值并将其添加到project scheduler(项目计划程序)中:
确保所有电缆和导管都与Elveflow设备(USB线缆、24V DC等)连接良好。
在开始实验之前进行漏气测试并除去任何气泡,以确保良好的流量调节。了解哪种配件Z适合实验需求是迈向成功的diyi步。如果您对微流体配件不熟悉,可以联系我们。
Step1 – 连接MUX和OB1后,打开电脑上的Elveflow智能界面ESI软件。
Step2 – 选择OB1(示例为OB1MixO1)并为每个通道设置以mbar为单位的初始所需要的功能和压力值。在本设置的示例中:
Channel 1(Yellow medium)
功能正弦波形,Z大压力160mbar和Z小压力118mbar,周期0.7s和不对称相位180°(反相相位)。
Channel 2(White medium)
功能常数,120mbar。
Channel 3(Blue medium)
功能正弦波形,Z大压力160mbar和Z小压力118mbar,周期0.7s和不对称为0。
通过单击“保存配置”按钮,可以保存此配置以供后续使用。可以通过直接编辑窗口左侧的通道名称显示来更改通道的名称。
Step3 – 要将这些参数添加到scheduler中,请单击“添加项目步骤”按钮。
Step4 – 在scheduler程序窗口中,按scheduler table上的“New step”,选择“Wait”按钮并为之前列出的仪器插入performing time(“wait time”)(示例情况下为8s)。
Step5 – 返回OB1主窗口,为每个通道设置下一个所需要的功能和压力值,单位为mbar。在我们设置的示例案例中:
Channel 1(Yellow medium)
功能正弦波形,Z大压力45mbar和Z小压力22mbar,周期0.7s,不对称为0。
Channel 2(White medium)
功能常数,35mbar。
Channel 3(blue medium)
与Channel1相同的配置(这次不再设置反相位)。
Step6 – 重复步骤3和4。
Step7 – 返回OB1主窗口,为每个通道设置下一个所需要的功能和压力值,单位为mbar。在我们设置的示例案例中:
Channel 1(Yellow medium)
函数方波波形,Z大压力10mbar和Z小压力6.5mbar,周期0.5s,不对称为0。
Channel 2(White medium)
函数常数,6.8mbar。
Channel 3(blue medium)
与Channel1配置相同,但将不对称相位设置为180°。
Step8 – 重复步骤3和4。
Step9 – Z后,为了插入循环以重复所有步骤所需要的次数,请按scheduler table上的“New step”按钮并选择“Go to”。选择step1以启动循环(loop)序列(“Step to go”: 1)和重复数字(“repeat”:示例中为5)。
Step10 – 按“Start”按钮以便开始执行项目(project)。
如果需要,可以通过点击“open graph display”按钮查看图形显示,在显示窗口上设置所需要的Z大和Z小显示参数以便获得压力和流体流速,然后按播放按钮以启动压力和流速曲线显示。勾选channel display selection block上的相应框,然后选择需要显示的channel。
与以上其中一些步骤对应的屏幕截图顺序排列依次如下所示。