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ACE C18-AR色谱柱介绍Ⅵ - 可以忽略柱流失的C18

菲罗门色谱柱 2019-05-30

ACE C18-AR色谱柱超低流失相可以确保UV和LC/MS的兼容性

许多相显示有键合相的流失,当基线稳定性受到影响时,这可以在梯度条件下被Z清晰地观察到。

尽管大多数超纯C18相可以预期产生低柱流失,但是需要谨慎选择替代选择性的键合相,以确保在低UV波长或LC/MS下进行分析时柱流失不会引起不可预见的问题。

ACE C18-AR显示UV下的低柱流失


色谱柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.00ml/min
温度:60°C
检测:UV, 214nm
梯度:时间(分钟) %B

               0              5
               20          95

               25          95

              26             5

流动相:

A. 20mM KH2PO4(溶于水中)(pH 2.7)

B. 35:65 (v/v) 20mM KH2PO4(溶于水中)(pH 2.7) /甲醇

化合物:1)尼古丁2)苄胺3)普鲁卡因胺4)特布他林5)沙丁胺醇6)苯酚7)内标A 8)内标B 9)苯海拉明10)去甲替林



本实例对超纯ACE C18色谱柱(顶部)的低流失特性与苯基色谱柱(中间)的中等流失特性进行了比较。

ACE C18-AR色谱柱(底部)显示其流失水平与ACE C18相当,尽管后者包含可以提供替代选择性的完整苯基官能团。


UV流失的比较

lingxian的C18品牌和普通替代键合相的评估

在相同条件下对更宽范围的色谱柱的进一步分析证实,lingxian的高纯度C18柱品牌显示出相似的低水平色谱柱流失。

然而,传统上推荐改变选择性的替代键合相(即苯基,极性嵌入式,PFP和AQ型表面化学物质)的评估显示,所有这些非C18色谱柱均有显著更高的流失。
ACE C18-AR将低流失水平(典型的lingxianC18色谱柱品牌)与替代选择性相结合,从而为分析者提供了有价值的方法开发工具。

当采用MS检测时,非C18相给分析者带来了传统上使用所出现的额外挑战。

在极端情况下,柱流失可能会污染检测器信号并掩盖重要分析物。
在以下实例中,在梯度运行的18-25分钟时段中监测柱流失,此时有机物的百分比增加至其Z大水平,因此柱流失也是Z高的。

MS Spectra(左边系列)提供了在该18-25分钟窗口中检测到流失的m/z裂解,而总离子色谱图(右边系列)阐明了在相同18-25分钟时间段内所获得的流失结果。

ACE C18-AR显示LC/MS下的低柱流失


色谱柱尺寸:150 x 3.0mm
流速:0.43ml/min
温度:60°C
检测:+ ve ESI模式(ThermoFisher Deca LCQ离子阱),全扫描范围50 - 1500m/z

流动相:

A. 0.1% v/v甲酸(溶于水中)
B. 0.1% v/v甲酸(溶于乙腈中)

梯度: 时间(分钟) %B

                   0            5

                  20          90

                  25          90

                  26           5



通过LC/MS分析,极性嵌入式色谱柱的TIC追踪和MS光谱(之前通过UV检测显示有显著流失)再次显示柱流失水平较高。

来自空白运行(在没有连接色谱柱的情况下开展)的MS光谱可以使背景系统流失量化。

ACE C18-AR色谱柱和lingxian的C18色谱柱均显示与空白运行相似的流失水平,这表明正在发生的柱流失可以忽略。

结论:
ACE C18-AR相可用于为lingxian的C18色谱柱提供不同的选择性,同时不会遇到与许多替代(即非C18)键合相相关的柱流失问题。


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