有哪位大侠使用过percoll gradient

Percoll分层液法
这是一种连续密度梯度离心分离法。Percoll是一种经聚乙烯吡喀烷酮(PVP)处理的硅胶颗粒，对细胞无毒性。利用Percoll液经高速离心后形成一个连续密度梯度的原理，将密度不等的细胞分离纯化。用Percoll原液(密度1.135)与约等量双离子强度的磷酸缓冲液均匀混合，高速离心后，使分层液形成一个从管底到液面密度逐渐递减的连续密度梯度，再将已制备的单个核细胞悬液轻轻叠加在液面上，低速离心后，便得四个细胞层。表层为死细胞残片和血小板，底层为粒细胞和红细胞，中间有两层，上层富含单个核细胞(75%)，下层富含淋巴细胞(98%)，该法是纯化单核细胞和淋巴细胞的一各较好的方法，但操作流程较长，手续较多。
你分离什么细胞？分离的细胞不同，其操作步骤略有差异。
如Z麻烦的，分离大鼠睾丸间质细胞，需要用培养基将等渗Percoll细胞分离液配置成 13 个浓度梯度 (20%～80%)，并依次加入离心管中，将 1 ml 细胞混悬液(约 105 细胞)置细胞分离液顶端， 1 000 g 室温离心 30 min，细胞依据比重不同分为 13 个层面；间质细胞位于第六个密度层面，吸取该层面细胞并用培养基洗 2 遍 (1 000 r/min， 10 min)， 2 ml 培养基悬浮细胞后计数。