离心分离外泌体是差速离心与密度梯度离心一起用吗

标准方法：Ficoll-泛影钠（Ficoll-Hypaque）密度梯度及红细胞裂解法1）取一50ml聚乙烯管，无菌采集人外周静脉血，加4.4ml3.8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml。上述全血300gX20min，离心，室温。2）吸出富含血小板的上清，2500gX15min，制备无血小板血浆（platelet-poorPlasma，PPP）。3）余下的沉降全血加入5ml6%Dextran(分子量500，000，用无菌生理盐水配制)，并用生理盐水（0.9%）调节Z终体积至50ml，轻轻、彻底混匀。室温沉降30min。4）吸出富含白细胞的上层液，275gX6min。5）沉淀的细胞用8mlPPP-生理盐水（1：4）重悬，并移到15ml离心管中。6）悬液细胞上面加入3mlFicoll-Hypaque（密度1.077），750gX5min，室温。7）吸取富含中性粒细胞和红细胞层，用0.155MNH4Cl重悬细胞，使红细胞裂解，然后中性粒细胞用含0.25%BSAHanks平衡液（HBSA，无钙）洗2次，Z终用HBSA（含钙）重悬。8）用此法可得95%以上的中性粒细胞。