流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:
流式细胞仪能检测多少个通道
需要同时检测检测多少个指标
厂家的抗体有多少种荧光标记
如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多
A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体
1) BD流式细胞仪
BD流式试剂选择及应用的相关问答与简介
流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:
流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。
不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的,比如Calibur的FL3(第3通道)能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP。 Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。Calibur和LSR都能检测4个颜色,但是第4个通道检测荧光素是不一样的